Digital PCR based an end point meas

Digital PCR based an end point measurement
that works by random distribution of the sample into
discrete partitions.
6
This concept was started in 1992 by
Sykes et al. to quantify the total number of initial targets
present in a sample using limiting dilution of PCR, and
Poisson distribution statistics. The PCR has been opti-
mized to provide an all-or-none end point at very low DNA
target numbers that means some portions of these reac-
tions contain the target molecule (positive) while others
contain no template (negative), and these partitions are
thermally cycled to end point, and then lead to determine
the fraction of positive partitions to calculate copy number
without standards.
6
Currently there are three approaches
employed by commercially available digital PCR sys-
tems. The
fi
rst approach is micro
fl
uidic dPCR
19
based
on standard 5’-nuclease probe (TaqMan) chemistry and
primer–probe design rules by using single used micro
fl
u-
idic chip to split the sample into the nanoliter individual
cDNA partitions, then detection using a PCR end-point
scan after thermocycled.
20
The second approach, called
BEAMing dPCR based on 4 principle including beads,
emulsion, ampli
fi
cation, and magnetic.
21-22
Recently there
is another new approach that uses water-in-oil droplet,
called droplet digital PCR (ddPCR) system in 96-well plate

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

PCR ดิจิทัลโดยใช้วัดเป็นจุดสิ้นสุดที่ทำงานโดยการกระจายสุ่มของตัวอย่างเป็นพาร์ติชันแยกกัน6แนวคิดนี้เริ่มต้นในปี 1992 โดยAl. ร้อยเอ็ด Sykes วัดปริมาณจำนวนของเป้าหมายเริ่มต้นในตัวอย่างที่ใช้เจือจางจำกัดของ PCR และสถิติการแจกแจงปัวซอง แล้ว PCR opti-mized ให้เป็นจุดสิ้นสุด all-or-none ที่ดีเอ็นเอมากตัวเลขเป้าหมายที่หมายถึง บางส่วนของ reac เหล่านี้-tions ประกอบด้วยโมเลกุลเป้าหมาย (บวก) ขณะที่คนอื่นประกอบด้วยแม่แบบไม่ (ลบ), และพาร์ติชันเหล่านี้มีแพล้มไปจุดสิ้นสุด และจากนั้น นำไปสู่กำหนดสัดส่วนของพาร์ทิชันบวกเพื่อคำนวณจำนวนสำเนาไม่ มีมาตรฐานการ6ในปัจจุบันมี 3 วิธีว่าใช้ได้ในเชิงพาณิชย์ดิจิตอล PCR sys-สิน ที่ไร้สายวิธี rst เป็นไมโครfluidic dPCR19ตามบนมาตรฐาน 5'-nuclease เคมีโพรบ (TaqMan) และสีรองพื้น – โพรบออกกฎโดยใช้ไมโครเดียวflu-ตัวอย่างจะแบ่งแต่ละ nanoliter idic ชิปพาร์ติชัน cDNA แล้วตรวจสอบโดยใช้การวิ PCRสแกนหลังจาก thermocycled20วิธีที่สอง เรียกว่าอย่างเบิกบาน dPCR ยึด 4 หลักรวมทั้งลูกปัดอิมัลชัน ampliไร้สายcation และแม่เหล็ก21-22ล่าสุดมีเป็นวิธีการใหม่อีกที่ใช้หยดน้ำในน้ำมันเรียกหยดดิจิตอล PCR (ddPCR) ระบบในจานดี 96

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

PCR ดิจิตอลตามการวัดจุดสิ้นสุดที่ทำงานโดยการกระจายแบบสุ่มของกลุ่มตัวอย่างลงในพาร์ทิชันที่ไม่ต่อเนื่อง. 6 แนวคิดนี้เริ่มต้นในปี 1992 โดยSykes et al, ปริมาณจำนวนของเป้าหมายเริ่มต้นอยู่ในตัวอย่างโดยใช้การ จำกัด การลดสัดส่วนของ PCR และ Poisson สถิติกระจาย PCR ได้รับเหมาะสมที่สุดmized เพื่อให้เป็นจุดสิ้นสุดทั้งหมดหรือไม่มีดีเอ็นเอที่ต่ำมากตัวเลขเป้าหมายที่หมายถึงบางส่วนของreac- เหล่านี้ทั้งนี้มีโมเลกุลเป้าหมาย (บวก) ขณะที่คนอื่นมีแม่แบบที่ไม่มี(ลบ) และเหล่านี้ พาร์ทิชันที่มีการกรณืความร้อนที่จะยุติการจุดและจากนั้นนำไปสู่การตรวจสอบส่วนของพาร์ทิชันในเชิงบวกในการคำนวณจำนวนสำเนาโดยไม่ต้องมาตรฐาน. 6 ปัจจุบันมีสามวิธีการจ้างงานโดยใช้ได้ในเชิงพาณิชย์ดิจิตอลงานระบบ PCR TEMS สายวิธีแรกคือไมโครชั้นuidic dPCR 19 ตามมาตรฐานการสอบสวน 5'-Nuclease (TaqMan) เคมีและกฎการออกแบบไพรเมอร์-สอบสวนโดยใช้ไมโครใช้เดี่ยวชั้นยูชิปidic แบ่งกลุ่มตัวอย่างออกเป็นแต่ละ nanoliter พาร์ทิชันยีนแล้ว การตรวจสอบโดยใช้วิธี PCR จุดสิ้นสุดการสแกนหลังจากที่อุณหภูมิ. 20 แนวทางที่สองเรียกว่ายิ้มแย้มแจ่มใส dPCR บนพื้นฐานของหลักการที่ 4 รวมทั้งลูกปัด, อิมัลชัน ampli สายไอออนบวกและแม่เหล็ก. 21-22 เมื่อเร็ว ๆ นี้เป็นอีกหนึ่งวิธีการใหม่ที่ใช้-in-น้ำหยดน้ำมันที่เรียกว่า PCR หยดดิจิตอล (ddPCR) ของระบบในแผ่น 96 หลุม

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ดิจิตอลเทคนิคตามจุดสิ้นสุดการวัด
ที่ทํางานโดยสุ่มการกระจายตัวของตัวอย่างในพาร์ทิชัน
6

ไม่ต่อเนื่อง แนวคิดนี้ เริ่มต้นในปี 1992 โดย
ไซค์ et al . ที่มีจำนวนของเป้าหมายแรก
ปัจจุบันในตัวอย่างโดยใช้การเจือจางของ PCR และ
สถิติการแจกแจงปัวส์ซอง pcr ได้ OPTI -
mized ให้หมด หรือ ไม่มีจุดที่สิ้นสุดต่ำมาก
ดีเอ็นเอเป้าหมายตัวเลข นั่นหมายความว่า บางส่วนของเหล่านี้ให้การ -
tions ประกอบด้วยโมเลกุลเป้าหมาย ( บวก ) ในขณะที่คนอื่น
ไม่มีแม่แบบ ( เชิงลบ ) , และพาร์ทิชันเหล่านี้
แชกรณืที่จะจุดสิ้นสุด แล้วนำไปสู่การตรวจสอบ
ส่วนของพาร์ทิชันบวกคำนวณจำนวนสำเนา
6

ไม่มีมาตรฐาน ขณะนี้มี มี 3 วิธีที่ใช้โดย SYS - PCR

ดิจิตอลพร้อมใช้งานในเชิงพาณิชย์tems .

RST Fi วิธีไมโคร



มี uidic dpcr 19 ตาม
มาตรฐาน 5 ' - นิวเคลียสโพรบ ( taqman ) และเคมี
รองพื้น–ตรวจสอบการออกแบบกฎโดยใช้เดียวใช้ไมโคร
FL
U -
idic ชิปจะแบ่งตัวอย่างในแต่ละวิธี nanoliter
พาร์ทิชันแล้วตรวจสอบโดยใช้ ความหมาย : เป็นเทคนิคสแกนหลังจาก thermocycled
.
20

ยิ้มแย้ม วิธีที่สอง เรียกว่า dpcr ตาม 4 หลักการ ได้แก่ ลูกปัด
อิมัลชัน ampli

fi ไอออนบวก และแม่เหล็ก


เป็นอีก 21-22 มีวิธีการใหม่ที่ใช้น้ำมันในน้ำหยด , หยด
เรียกว่าดิจิตอล PCR ( ddpcr ) ระบบ 96 ดีจาน