2.5. Determination of patulin production Patulin
content was detected as described by Morales et al.(2013). In briefly, a spore suspension at 1.0 × 106
spores/mL(100 L) was dispersed evenly with a sterile spatula on PDA medium supplemented with or without 0.6% NaHCO3. After 2, 4 and 6 days of incubation at 25◦C, ten plugs (5 mm diameter) of mycelial agar (about 10 g) were obtained randomly and immersed into 10 mL ethyl acetate for 1 h. After centrifugation, a volume of 1.5 mL of supernatant was dried under N2, and then dissolved in 1.5 mL of acidified distilled water (pH 4.0). The solution was centrifuged, filtered through a 0.22 m syringe filter (Albet, Spain) and transferred to an autosampler vial of high performance liquid chromatography(HPLC). Patulin content was determined by reversed-phase HPLC with UV detection (Waters, USA). A Waters XTerra ® RP18 column(Waters, USA) was used with mobile phases (95% water and 5% ace-tonitrile). The operational parameters were as follows, Flow rate:1 mL/min, column oven temperature: 18◦C, detector wave length:276 nm. Result was expressed as g of patulin per 1 g PDA.
2.5 ความมุ่งมั่นของการผลิต patulin patulin
เนื้อหาถูกตรวจพบว่าเป็นอธิบายโดยโมราเลส et al. (2013) ในเวลาสั้น ๆ เป็นสปอร์แขวนลอยที่ 1.0 × 106
สปอร์ / มิลลิลิตร (100 ลิตร) ได้รับการแพร่ระบาดอย่างสม่ำเสมอด้วยไม้พายผ่านการฆ่าเชื้อบนอาหาร PDA เสริมด้วยหรือไม่ 0.6% NaHCO3 หลังจากที่ 2, 4 และ 6 วันของการบ่มที่25◦Cสิบปลั๊ก (เส้นผ่านศูนย์กลาง 5) ของเส้นใยอาหารเลี้ยงเชื้อ (ประมาณ 10 กรัม) ได้รับแบบสุ่มและแช่เป็น 10 มิลลิลิตรเอทิลอะซิเตเป็นเวลา 1 ชั่วโมง หลังจากที่ปั่นปริมาณ 1.5 มิลลิลิตรใสแห้งภายใต้ N2 และเลือนหายไปแล้วใน 1.5 ml ของน้ำกลั่นกรด (pH 4.0) วิธีการแก้ปัญหาที่ได้รับการหมุนเหวี่ยงกรองผ่าน 0.22? เมตรกรองเข็มฉีดยา (Albet, สเปน) และโอนไปยังขวดฉีดตัวอย่างอัตโนมัติของประสิทธิภาพสูงของเหลว chromatography (HPLC) เนื้อหา patulin ถูกกำหนดโดยวิธี HPLC กลับเฟสมีการตรวจสอบรังสียูวี (Waters, สหรัฐอเมริกา) คอลัมน์น้ำ Xterra ® RP18 (Waters, สหรัฐอเมริกา) ถูกนำมาใช้กับโทรศัพท์มือถือขั้นตอน (น้ำ 95% และ 5% เอซ tonitrile) พารามิเตอร์ในการดำเนินงานดังต่อไปนี้, อัตราการไหล 1 มิลลิลิตร / นาทีอุณหภูมิเตาอบคอลัมน์: 18◦C, เครื่องตรวจจับคลื่นความยาว: 276 นาโนเมตร ผลที่ได้แสดงเป็น? patulin กรัมต่อ 1 กรัม PDA
การแปล กรุณารอสักครู่..

2.5 การหาปริมาณการผลิตที่พาตูลินพาตูลินเนื้อหาที่ถูกตรวจพบตามที่อธิบายไว้โดย Morales et al . ( 2013 ) ในสั้น , สปอร์แขวนลอย× 106 สำหรับสปอร์ / มิลลิลิตร ( 100 ลิตร ) ถูกกระจายอย่างทั่วถึงด้วยไม้พายปลอดเชื้อบนอาหาร PDA MS ที่มีหรือไม่มี 0.6% โซเดียมไบคาร์บอเนต . หลังจาก 2 , 4 และ 6 วัน บ่มที่ 25 ◦ C 10 ปลั๊ก ( 5 มม. เส้นผ่าศูนย์กลางของเส้นใยอาหาร ( 10 กรัม ) ที่ได้รับการสุ่มและแช่ลงใน 10 เอทิลอะซีเตทเป็นเวลา 1 ชั่วโมง หลังการปั่นเหวี่ยง เป็นปริมาณ 1.5 มิลลิลิตร นำแห้งได้ที่ 2 แล้วละลายใน 1.5 มิลลิลิตร ปรับน้ำ ( pH 4.0 ) สารละลายไฟฟ้า , กรองผ่านตัวกรอง ( 0.22 เมตร เข็ม albet , สเปน ) และย้ายไป autosampler ขวดวิธีโครมาโทกราฟีของเหลวสมรรถนะสูง ( HPLC ) พาตูลินถูกกำหนดโดยเนื้อหา reversed-phase HPLC ตรวจจับยูวี ( น้ำ , USA ) มีน้ำ xterra ® rp18 คอลัมน์ ( น้ำ , USA ) ใช้เฟสเคลื่อนที่ ( น้ำ 95% และ 5% เอซ tonitrile ) พารามิเตอร์ปฏิบัติการดังนี้ อัตราการไหล 2 มล. / นาที อุณหภูมิเตาอบคอลัมน์ : 18 ◦ C , ความยาวของคลื่นตรวจจับ : 278 นาโนเมตร ผลคือแสดงเป็นกรัม พาตูลินต่อ PDA 1 กรัม
การแปล กรุณารอสักครู่..
