2.5. Synthetic Pectin Media and Co↵ee Pulp Media Preparation for Enzymatic AssaysThe SPM was prepared with the following formulation: 10% citric pectin, 0.1% glucose, 0.5% MgSO4, 1.0% KH2PO4, 1.0% (NH4)2SO4, and 0.5% CaCl2. The CPM was prepared by measuring 400 g of co↵ee pulp, including mucilage (Co↵ea arabica L.), and 0.5% glucose. The pulp was boiled using water for 10 min and adjusted to 1 L [17]. Active yeast cells that were grown for 48 h were added with 1.0 ⇥ 10 4 cells mL 1 (4.0 Log colony forming unit (CFU) mL 1). The cultures were incubated at 28 C for 96 h at 120 rpm and periodically sampled at 24, 48, 72, and 96 h. The supernatants were collected for PG, PL, and PME activity from both SPM and CPM growing conditions.In addition, the fermentation characteristics of the CPM culture, such as yeast cells, pH, and Brix, were regularly measured at 24-h intervals. Serial dilutions were prepared from the fermented solution and plated onto YPDA media. The living yeast colonies were counted using the Neubauer hemocytometer slide (Electron Microscopy Sciences, PA, USA) and expressed in Log CFU value.
2.5. ตัวกลางเพคตินสังเคราะห์และการเตรียมสื่อเยื่อ Co↵ee สำหรับการตรวจวิเคราะห์เอนไซม์SPM เตรียมด้วยสูตรต่อไปนี้: ซิตริกเพคติน 10%, กลูโคส 0.1%, 0.5% MgSO4, 1.0% KH2PO4, 1.0% (NH4)2SO4 และ 0.5% CaCl2 . CPM เตรียมโดยการวัดเยื่อ co↵ee 400 กรัม รวมถึงเมือก (Co↵ea arabica L.) และกลูโคส 0.5% เยื่อกระดาษถูกต้มโดยใช้น้ำเป็นเวลา 10 นาทีและปรับเป็น 1 ลิตร [17] เซลล์ยีสต์ออกฤทธิ์ที่ถูกเติบโตเป็นเวลา 48 ชั่วโมงถูกเติมด้วย 1.0 ⇥ 10 4 เซลล์ มล. 1 (4.0 หน่วยการขึ้นรูปโคโลนีล็อก (CFU) มล. 1) การเพาะเลี้ยงถูกบ่มที่ 28 C เป็นเวลา 96 ชั่วโมงที่ 120 รอบต่อนาทีและสุ่มตัวอย่างเป็นระยะที่ 24, 48, 72 และ 96 ชั่วโมง ส่วนลอยเหนือตะกอนถูกรวบรวมสำหรับกิจกรรม PG, PL และ PME จากทั้งสภาวะการเจริญเติบโตของ SPM และ CPM นอกจากนี้ คุณลักษณะการหมักของการเพาะเลี้ยง CPM เช่น เซลล์ยีสต์, pH และ Brix จะถูกวัดเป็นประจำทุกๆ 24 ชั่วโมง การเจือจางแบบอนุกรมถูกเตรียมจากสารละลายหมักและชุบลงบนอาหารเลี้ยงเชื้อ YPDA อาณานิคมของยีสต์ที่มีชีวิตถูกนับโดยใช้สไลด์ Neubauer hemocytometer (Electron Microscopy Sciences, PA, USA) และแสดงเป็นค่า Log CFU
การแปล กรุณารอสักครู่..
2.5 สื่อเพคตินสังเคราะห์และโคบอลต์ ↵ การเตรียมสื่อเยื่อกระดาษสำหรับการวิเคราะห์เอนไซม์<br>SPM จัดทำโดยสูตรต่อไปนี้: เพคตินมะนาว 10%, เดกซ์โทรส 0.1%, 0.5% MgSO4, 1.0% KH2PO4, 1.0% (NH4) 2SO4 และ 0.5% CaCl2 CPM เตรียมโดยการวัดโคบอลต์ 400 กรัม ↵ อี slurries รวมทั้งเมือก ( Co ↵ ea arabica L. ) และกลูโคส 0.5% ต้มเยื่อกระดาษด้วยน้ำประมาณ 10 นาทีและปรับเป็น 1 ลิตร [17] เพิ่มเซลล์ยีสต์ที่ใช้งานอยู่ 48 ชั่วโมงที่เติบโต 1.0 ⇥ 10 4 เซลล์ mL 1 (4.0 ลอการิทึมเซตหน่วยการก่อตัว (CFU) mL 1) วัฒนธรรมบ่มที่ 28 ℃, 120 รอบต่อนาทีเป็นเวลา 96 ชั่วโมงและเก็บตัวอย่างเป็นระยะ ๆ ที่ 24, 48, 72 และ 96 ชั่วโมง กิจกรรม PG, PL และ PME ใน supernation จะถูกเก็บรวบรวมจากสภาพการเจริญเติบโตของ SPM และ CPM<br>นอกจากนี้คุณสมบัติการหมักของวัฒนธรรม CPM จะถูกวัดอย่างสม่ำเสมอทุก 24 ชั่วโมงเช่นเซลล์ยีสต์ค่า pH และ Brix เตรียมสารละลายเจือจางจากสารละลายหมักและวางลงบนสื่อของ YPDA อาณานิคมของยีสต์ที่มีชีวิต
การแปล กรุณารอสักครู่..