IntroductionMethodThe method descri

Introduction

Method

The method described here contains both a real-time PCR method for rapid screening and a cultural method for the detection/isolation of Cronobacter spp. (3). Chromogenic agars are used to isolate the culture for confirmation. A pre-enrichment step is used to grow the bacteria to an amount (≥ 103 CFU/ mL) detectable by PCR and chromogenic agars. The cultural portion of this method is a complete detection/isolation method, so it can be used as a stand alone method if PCR technology is unavailable. The PCR portion of the method is a screening method, whose positive results should always be confirmed with the cultural method. The PCR method may be used to confirm pure cultures as Cronobacter spp. This method was validated in pre-collaborative and collaborative studies (1,2).
The inclusivity of this method was determined by analyzing 51 different Cronobacter strains representing the six Cronobacter species that were isolated from foods, clinical samples, environmental surfaces, and nationally/internationally recognized culture depositories. The origin and source of each strain are listed in the Inclusivity Table (A). Each strain was enriched in brain heart infusion (BHI) broth and diluted in buffered peptone water (BPW) to approximately 10 times the limit of detection. The diluted cultures were then tested according to this method.
The exclusivity of this method was determined by testing 42 non-Cronobacter strains. The source and origin of each strain are listed in the Exclusivity Table (B). Each strain was enriched in BHI broth. These incubated cultures were tested according to this method.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

แนะนำวิธีการวิธีการอธิบายไว้ที่นี่ประกอบด้วยวิธี PCR แบบเรียลไทม์สำหรับการคัดกรองอย่างรวดเร็วและวิธีการตรวจสอบ/แยกโอ Cronobacter (3) วัฒนธรรม Chromogenic agars จะใช้ในการแยกวัฒนธรรมสำหรับการยืนยัน ขั้นตอนขอก่อนใช้แบคทีเรียจะเติบโตเป็นยอดเงิน (≥ 103 CFU / mL) ตรวจ ด้วย PCR และ chromogenic agars ส่วนวัฒนธรรมของวิธีนี้คือ วิธีการตรวจแยกสมบูรณ์ เพื่อให้สามารถใช้เป็นวิธีเดี่ยวถ้าเทคโนโลยี PCR ไม่ ส่วนวิธี PCR เป็นวิธีคัดกรอง ที่มีผลบวกควรจะยืนยัน ด้วยวิธีการทางวัฒนธรรม วิธี PCR สามารถใช้ยืนยันวัฒนธรรมบริสุทธิ์เป็นโอ Cronobacter วิธีนี้ถูกตรวจสอบในการศึกษา pre-collaborative และทำงานร่วมกัน (1, 2)Inclusivity ของวิธีการนี้ถูกกำหนด โดยวิเคราะห์ 51 แตกต่างกัน Cronobacter สายพันธุ์แทนพันธุ์ Cronobacter หกที่แยกจากอาหาร ตัวอย่างคลินิก ผิวด้านสิ่งแวดล้อม และ depositories วัฒนธรรมรู้จักผลงาน/ต่างประเทศ มาและแหล่งที่มาของแต่ละต้องใช้แสดงในการตาราง Inclusivity (A) ต้องใช้แต่ละอุดมไปในซุปคอนกรีต (BHI) หัวใจสมอง และทำให้เจือจางในน้ำ peptone ถูกบัฟเฟอร์ (สมาคมฯ) ประมาณ 10 เท่าขีดจำกัดของการตรวจสอบ วัฒนธรรมแตกออกแล้วทดสอบตามวิธีนี้ความพิเศษของวิธีนี้ถูกกำหนด โดยการทดสอบสายพันธุ์ไม่ใช่ Cronobacter 42 แหล่งที่มาและจุดเริ่มต้นของแต่ละต้องใช้แสดงในการตารางผูกขาด (B) ต้องใช้แต่ละถูกอุดมไปใน BHI ซุป วัฒนธรรมเหล่านี้ incubated ถูกทดสอบตามวิธีนี้

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

การแนะนำวิธีการวิธีการอธิบายที่นี่มีทั้งแบบreal-time PCR วิธีการสำหรับการคัดกรองอย่างรวดเร็วและวิธีการทางวัฒนธรรมสำหรับการตรวจสอบ / การแยกเอสพีพี Cronobacter (3) สาหร่ายให้สีที่ใช้ในการแยกวัฒนธรรมเพื่อยืนยัน ขั้นตอนก่อนการตกแต่งที่ใช้ในการเจริญเติบโตของแบคทีเรียที่จะมีจํานวน (≥ 103 โคโลนี / มิลลิลิตร) ที่ตรวจพบโดยวิธี PCR และสาหร่าย chromogenic ส่วนทางวัฒนธรรมของวิธีนี้คือตรวจสอบที่สมบูรณ์แบบ / วิธีการแยกเพื่อที่จะสามารถนำมาใช้เป็นวิธีการยืนอยู่คนเดียวหากเทคโนโลยี PCR ไม่พร้อมใช้งาน ส่วนของวิธี PCR เป็นวิธีการตรวจคัดกรองที่มีผลในเชิงบวกควรได้รับการยืนยันด้วยวิธีการทางวัฒนธรรม วิธี PCR อาจจะถูกใช้เพื่อยืนยันวัฒนธรรมบริสุทธิ์เป็นเอสพีพี Cronobacter วิธีการนี้จะได้รับการตรวจสอบในการศึกษาก่อนการทำงานร่วมกันและความร่วมมือ (1,2). inclusivity ของวิธีการนี้ถูกกำหนดโดยการวิเคราะห์ 51 สายพันธุ์ที่แตกต่างกัน Cronobacter เป็นตัวแทนของหกชนิด Cronobacter ที่ถูกแยกจากอาหารตัวอย่างทางคลินิกพื้นผิวในสิ่งแวดล้อมและในระดับประเทศ / ยอมรับในระดับสากลศูนย์รับฝากวัฒนธรรม กำเนิดและแหล่งที่มาของแต่ละสายพันธุ์มีการระบุไว้ในตาราง inclusivity (A) แต่ละสายพันธุ์ผสานแช่ในหัวใจสมอง (BHI) น้ำซุปและเจือจางในน้ำเปปโตนบัฟเฟอร์ (BPW) ประมาณ 10 ครั้งขีด จำกัด ของการตรวจสอบ วัฒนธรรมเจือจางได้รับการทดสอบแล้วตามวิธีนี้. การผูกขาดของวิธีการนี้ถูกกำหนดโดยการทดสอบ 42 สายพันธุ์ที่ไม่ Cronobacter แหล่งที่มาและที่มาของแต่ละสายพันธุ์มีการระบุไว้ในตารางเฉพาะตัว (B) แต่ละสายพันธุ์ผสานในน้ำซุป BHI วัฒนธรรมบ่มเหล่านี้ถูกทดสอบตามวิธีนี้

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

วิธีแนะนํา



วิธีการที่อธิบายที่นี่มีทั้งแบบ PCR วิธี Rapid Screening และวัฒนธรรมวิธีการตรวจหา / แยก cronobacter spp . ( 3 ) การสนทนาผ่านข้อความโต้ตอบแบบทันที agars ใช้แยกวัฒนธรรมเพื่อยืนยัน ขั้นตอนก่อนการใช้เติบโตแบคทีเรียเพื่อเงิน ( ≥ 103 CFU / ml ) ที่ตรวจพบโดยวิธี PCR และการสนทนาผ่านข้อความโต้ตอบแบบทันที agars .ส่วนวัฒนธรรมของวิธีนี้คือ วิธีการตรวจสอบ / แยกสมบูรณ์ ดังนั้นมันสามารถใช้เป็นยืนอยู่คนเดียวถ้า PCR วิธีเทคโนโลยีที่ใช้งาน การตรวจคัดกรองส่วนวิธีเป็นวิธีที่มีผลในเชิงบวกเสมอควรยืนยันด้วยวิธีทางวัฒนธรรม โดยวิธีพีซีอาร์สามารถใช้ยืนยันเชื้อบริสุทธิ์เป็น cronobacter spp .วิธีนี้คือการตรวจสอบก่อนร่วมกัน และร่วมกันศึกษา ( 1 , 2 )
inclusivity ของวิธีการนี้ถูกกำหนดโดยการวิเคราะห์ 51 สายพันธุ์แตกต่างกัน cronobacter แทน 6 cronobacter ชนิดที่แยกได้จากอาหาร คลินิกตัวอย่าง พื้นผิวด้านสิ่งแวดล้อม และโอเปอเรเตอร์ / การยอมรับระดับนานาชาติวัฒนธรรมชาว .กำเนิดและที่มาของแต่ละสายพันธุ์มีการระบุไว้ใน inclusivity ตาราง ( ) แต่ละสายพันธุ์มีอุดมในแช่หัวใจสมอง ( BHI ) เจือจางในน้ำซุปและ 2 ตามลำดับ ( BPW ) ประมาณ 10 เท่าของขีด จำกัด ของการตรวจสอบ วัฒนธรรมที่เจือจางแล้วทดสอบตามวิธีนี้ ความพิเศษของ
วิธีนี้ถูกกำหนดโดยการทดสอบ 42 ไม่ cronobacter สายพันธุ์แหล่งกำเนิดและที่มาของแต่ละสายพันธุ์ แต่อยู่ในโต๊ะ ( B ) แต่ละสายพันธุ์มีอุดมใน BHI broth . โดยวัฒนธรรมเหล่านี้ถูกทดสอบตามวิธีนี้