Stromally derived keratinocyte grow

Stromally derived keratinocyte growth factor (KGF) can play an important role in mammary gland development as a mesenchymal/stromal mediator of epithelial growth and morphogenesis. However, the possible coordinate regulation of mammary gland development by mammogenic hormones and KGF is unexplored. In these studies, the direct effect of mammogenic hormones on KGF-mediated mammary epithelial mitogenesis and expression of the KGF receptor was examined using primary mouse mammary epithelium growing in serum-free, collagen gel cell culture. Addition of KGF produced an average 7-fold increase in cell number after 10 days of culture. This effect of KGF was further increased in the presence of PRL (9-fold) or progesterone (P; 15-fold), with the combination of P and PRL (22-fold) producing the strongest synergistic stimulation. Estrogen did not show any additional stimulation of growth either alone or in combination with PRL and/or P. Ribonuclease protection analysis showed that epithelial cells grown in medium supplemented with P, but not PRL or estrogen, exhibited a 10-fold higher steady state level of KGF receptor (KGFR) messenger RNA (mRNA). KGFR expression was not induced by short term P exposure, suggesting an effect on mRNA stability rather than transcriptional activation. Time-course studies showed that an early decrease in the level of KGFR mRNA in basal cultures was significantly reduced by P addition. Measurement of RNA turnover after actinomycin D treatment showed that P increased the t1/2 of KGFR mRNA compared with basal medium. Thus, P and PRL may differentially potentiate the direct mitogenic effect of KGF: P partly by elevation of the level of KGFR mRNA, and PRL principally by intracellular pathways not affecting KGFR expression.
MAMMARY gland development is regulated by the coordinated action of ovarian and pituitary hormones and, most likely, peptide growth factors produced locally and/or present in the systemic circulation (1). Although many growth factors can potentially affect the growth and differentiation of the mammary epithelium, there is a gap in our understanding of how these growth factors cooperate with the primary physiological regulators of mammary development, the mammogenic hormones, to orchestrate a complex developmental program. The identification of locally synthesized mammary stromal growth factors has prompted speculation that these factors may in part mediate the recognized influence of the stroma on normal and abnormal mammary growth and development (2). Therefore, a thorough understanding of their influence on the mammary epithelium and their interplay with mammogenic hormones is necessary.
Keratinocyte growth factor (KGF or FGF-7) is a member of fibroblast growth factor family (3) that was discovered as a heparin-binding protein secreted by cultured stromal fibroblasts. In epithelial tissues, KGF is produced only by associated stromal cells and targets only the epithelium (4), which expresses the KGF receptor (KGFR), a transmembrane tyrosine kinase encoded by the IIIb splice variant of FGF-2 receptor (FGFR-2) or bek (5, 6, 7). KGF is strongly mitogenic in vitro for a broad range of epithelial cells from different organs, including skin (8), cornea (9), stomach (10), liver (11), prostate (12, 13), ovary (14), lung (15), and mammary gland (16). Analysis of KGF and KGFR expression during embryonic development, including the mammary gland, has provided evidence that KGF is an important mesenchymal mediator of epithelial growth and differentiation (17, 18).
In hormone-responsive tissues, KGF expression can be modulated by systemic hormones. KGF may act as a stromal andromedin in prostate (13, 19, 20) and seminal vesicle (21) or as a progestomedin in uterus (22). KGF is expressed in the mammary stroma of adult mice (23) and humans (24, 25) and changes in KGF expression during postnatal growth of the mouse mammary gland suggest that it may be hormonally regulated (26). We envision that mammogenic hormones can potentially regulate KGF bioactivity by modifying its synthesis in the mammary stroma, altering the sensitivity of the epithelium to KGF by regulation of the level and affinity of the KGFR or by modulation of postreceptor signaling pathways. In this report, we employed a collagen gel culture system permissive for hormone-responsive, three-dimensional epithelial cell growth and morphogenesis under defined conditions (27) to examine the modulation of KGF mitogenesis by mammogenic hormones.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

Keratinocyte stromally ได้รับปัจจัยการเจริญเติบโต (KGF) สามารถเล่นมีบทบาทสำคัญในการพัฒนาต่อมน้ำนมเป็นผู้ไกล่เกลี่ย mesenchymal/stromal น่าเจริญเติบโตของ epithelial morphogenesis อย่างไรก็ตาม ระเบียบประสานงานเป็นไปได้ของการพัฒนาของต่อมน้ำนมฮอร์โมน mammogenic และ KGF จะ unexplored ในการศึกษานี้ ผลกระทบโดยตรงของฮอร์โมน mammogenic บน KGF mediated ทางหน้าอก epithelial mitogenesis และนิพจน์ของตัวรับ KGF ถูกตรวจสอบโดยใช้เมาส์หลัก epithelium ทางหน้าอกเจริญเติบโตในซีรั่มฟรี คอลลาเจนเจลเซลล์วัฒนธรรม เพิ่ม KGF ผลิตเฉลี่ย 7-fold เพิ่มจำนวนเซลล์หลังจาก 10 วันวัฒนธรรม ลักษณะพิเศษนี้ของ KGF เพิ่มเติมขึ้นในต่อหน้าของ PRL (9-fold) หรือโปรเจสเตอโร (P; 15-fold), กับ P และ PRL (22-fold) ผลิตการกระตุ้นพลังที่แข็งแกร่ง ฮอร์โมนหญิงไม่ได้แสดงกระตุ้นใด ๆ เพิ่มเติมของการเติบโตเพียงอย่างเดียว หรือร่วมกับ PRL หรือ P. Ribonuclease ป้องกันวิเคราะห์แสดงให้เห็นว่า เซลล์ epithelial ปลูกเสริม ด้วย P แต่ไม่ PRL หรือฮอร์โมน หญิง สื่อจัดแสดง 10-fold ระดับที่สูงขึ้นท่อน KGF ตัวรับ (KGFR) เอ็มอาร์เอ็นเอ (mRNA) KGFR นิพจน์ไม่เกิดจากสั้น P แสง การแนะนำลักษณะพิเศษบน mRNA เสถียรภาพมากกว่าเปิด transcriptional ครั้งหลักสูตรการศึกษาพบว่า ลดลงเป็นต้นในระดับของ mRNA KGFR ในวัฒนธรรมโรคถูกลด โดยเพิ่ม P วัดหมุนเวียนอาร์เอ็นเอหลังจากรักษา actinomycin D พบว่า P เพิ่มขึ้น t1/2 ของ mRNA KGFR เปรียบเทียบกับโรคปานกลาง ดังนั้น P และ PRL อาจ differentially potentiate mitogenic ผลโดยตรงของ KGF: P บางส่วน โดยเพิ่มระดับของ KGFR mRNA, PRL โดยมนต์ intracellular KGFR นิพจน์ที่ไม่ส่งผลกระทบต่อหลักการMAMMARY gland development is regulated by the coordinated action of ovarian and pituitary hormones and, most likely, peptide growth factors produced locally and/or present in the systemic circulation (1). Although many growth factors can potentially affect the growth and differentiation of the mammary epithelium, there is a gap in our understanding of how these growth factors cooperate with the primary physiological regulators of mammary development, the mammogenic hormones, to orchestrate a complex developmental program. The identification of locally synthesized mammary stromal growth factors has prompted speculation that these factors may in part mediate the recognized influence of the stroma on normal and abnormal mammary growth and development (2). Therefore, a thorough understanding of their influence on the mammary epithelium and their interplay with mammogenic hormones is necessary.Keratinocyte growth factor (KGF or FGF-7) is a member of fibroblast growth factor family (3) that was discovered as a heparin-binding protein secreted by cultured stromal fibroblasts. In epithelial tissues, KGF is produced only by associated stromal cells and targets only the epithelium (4), which expresses the KGF receptor (KGFR), a transmembrane tyrosine kinase encoded by the IIIb splice variant of FGF-2 receptor (FGFR-2) or bek (5, 6, 7). KGF is strongly mitogenic in vitro for a broad range of epithelial cells from different organs, including skin (8), cornea (9), stomach (10), liver (11), prostate (12, 13), ovary (14), lung (15), and mammary gland (16). Analysis of KGF and KGFR expression during embryonic development, including the mammary gland, has provided evidence that KGF is an important mesenchymal mediator of epithelial growth and differentiation (17, 18).In hormone-responsive tissues, KGF expression can be modulated by systemic hormones. KGF may act as a stromal andromedin in prostate (13, 19, 20) and seminal vesicle (21) or as a progestomedin in uterus (22). KGF is expressed in the mammary stroma of adult mice (23) and humans (24, 25) and changes in KGF expression during postnatal growth of the mouse mammary gland suggest that it may be hormonally regulated (26). We envision that mammogenic hormones can potentially regulate KGF bioactivity by modifying its synthesis in the mammary stroma, altering the sensitivity of the epithelium to KGF by regulation of the level and affinity of the KGFR or by modulation of postreceptor signaling pathways. In this report, we employed a collagen gel culture system permissive for hormone-responsive, three-dimensional epithelial cell growth and morphogenesis under defined conditions (27) to examine the modulation of KGF mitogenesis by mammogenic hormones.

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

มา Stromally ปัจจัยการเจริญเติบโต keratinocyte (kgf) สามารถมีบทบาทสำคัญในการพัฒนาต่อมน้ำนมเป็น mesenchymal / stromal คนกลางของการเจริญเติบโตเยื่อบุผิวและ morphogenesis แต่ที่เป็นไปได้ประสานงานการพัฒนากฎระเบียบของต่อมน้ำนมจากฮอร์โมน mammogenic และ kgf คือการสำรวจ ในการศึกษานี้มีผลโดยตรงของฮอร์โมนใน mitogenesis mammogenic เยื่อบุผิว kgf พึ่งนมและการแสดงออกของตัวรับ kgf ถูกตรวจสอบโดยใช้เยื่อบุผิวนมหลักเมาส์ที่กำลังเติบโตในซีรั่มฟรีคอลลาเจนเจลการเพาะเลี้ยงเซลล์ นอกเหนือจาก kgf ผลิตเฉลี่ยเพิ่มขึ้น 7 เท่าในจำนวนเซลล์หลังจาก 10 วันของวัฒนธรรม ผลกระทบของการ kgf นี้เพิ่มขึ้นต่อไปในการปรากฏตัวของ PRL นี้ (9 เท่า) หรือฮอร์โมน (P 15 เท่า) โดยมีการรวมกันของ P และ PRL (22 เท่า) ผลิตการกระตุ้นการทำงานร่วมกันที่แข็งแกร่ง สโตรเจนไม่ได้แสดงการกระตุ้นเพิ่มเติมใด ๆ ของการเจริญเติบโตเพียงอย่างเดียวหรือร่วมกับ PRL และ / หรือพีวิเคราะห์การป้องกัน Ribonuclease แสดงให้เห็นว่าเซลล์เยื่อบุผิวปลูกในกลางเสริมด้วย P แต่ไม่ PRL หรือสโตรเจนแสดงระดับรัฐ 10 เท่าสูงขึ้นอย่างต่อเนื่อง การรับ kgf (KGFR) สาร rna (mRNA) การแสดงออก KGFR ไม่ได้เกิดจากการสัมผัสสั้น P บอกผลกระทบต่อความมั่นคง mRNA มากกว่าการเปิดใช้งานการถอดรหัส เวลาการศึกษาหลักสูตรการศึกษาพบว่าลดลงในช่วงต้นระดับของ mRNA KGFR ในวัฒนธรรมพื้นฐานลดลงอย่างมีนัยสำคัญโดยการเพิ่ม P วัดของผลประกอบการหลังจากที่อาร์เอ็นเอ actinomycin D แสดงให้เห็นว่าการรักษาที่เพิ่มขึ้น P t1 / 2 ของ KGFR mRNA เมื่อเทียบกับฐานกลาง ดังนั้น P และ PRL แตกต่างกันอาจ potentiate ผล mitogenic โดยตรงของ kgf: P บางส่วนโดยระดับความสูงของระดับของ KGFR mRNA และ PRL โดยเฉพาะทางเดินภายในเซลล์ไม่ได้มีผลกระทบต่อการแสดงออก KGFR.
การพัฒนาต่อมน้ำนมจะถูกควบคุมโดยการดำเนินการประสานงานของรังไข่และต่อมใต้สมอง ฮอร์โมนและส่วนใหญ่มีแนวโน้มการเจริญเติบโตของเปปไทด์ปัจจัยที่ผลิตในประเทศและ / หรืออยู่ในการไหลเวียนของระบบ (1) แม้ว่าปัจจัยการเจริญเติบโตจำนวนมากที่อาจจะมีผลต่อการเจริญเติบโตและการเปลี่ยนแปลงของเยื่อบุผิวนมที่มีช่องว่างในความเข้าใจของเราว่าปัจจัยการเจริญเติบโตเหล่านี้ให้ความร่วมมือกับหน่วยงานกำกับดูแลทางสรีรวิทยาหลักของการพัฒนาเต้านมที่ฮอร์โมน mammogenic เพื่อ orchestrate โปรแกรมการพัฒนาที่ซับซ้อน บัตรประจำตัวของการสังเคราะห์ในประเทศปัจจัยการเจริญเติบโต stromal เต้านมที่ได้รับแจ้งการเก็งกำไรว่าปัจจัยเหล่านี้อาจจะเป็นส่วนหนึ่งในการเป็นสื่อกลางในการยอมรับอิทธิพลของ stroma ต่อการเจริญเติบโตนมปกติและผิดปกติและการพัฒนา (2) ดังนั้นความเข้าใจในอิทธิพลของพวกเขาในเยื่อบุผิวนมและมีอิทธิพลซึ่งกันและกันของพวกเขาด้วยฮอร์โมน mammogenic เป็นสิ่งที่จำเป็น.
keratinocyte ปัจจัยการเจริญเติบโต (kgf หรือ FGF-7) เป็นสมาชิกของปัจจัยการเจริญเติบโต fibroblast ครอบครัว (3) ที่ถูกค้นพบเป็นเฮผูกพัน โปรตีนที่หลั่งมาจากเซลล์เพาะเลี้ยง stromal ในเนื้อเยื่อเยื่อบุผิว kgf ผลิตโดยเฉพาะเซลล์ stromal เกี่ยวข้องและเป้าหมายเพียงเยื่อบุผิว (4) ซึ่งเป็นการแสดงออกถึงรับ kgf (KGFR) ไคเนสซายน์รนเข้ารหัสโดยตัวแปรประกบ IIIb ของ FGF-2 รับ (FGFR-2) หรือเบค (5, 6, 7) kgf เป็นอย่างยิ่ง mitogenic ในหลอดทดลองสำหรับช่วงกว้างของเซลล์เยื่อบุผิวจากอวัยวะที่แตกต่างกันรวมทั้งผิว (8), กระจกตา (9), กระเพาะอาหาร (10) ตับ (11), ต่อมลูกหมาก (12, 13), รังไข่ (14) ปอด (15) และต่อมน้ำนม (16) การวิเคราะห์ kgf และการแสดงออก KGFR ในระหว่างการพัฒนาของตัวอ่อนรวมทั้งต่อมน้ำนมได้ให้หลักฐานที่แสดงว่า kgf เป็นคนกลาง mesenchymal ที่สำคัญของการเจริญเติบโตของเยื่อบุผิวและความแตกต่าง (17, 18).
ในเนื้อเยื่อฮอร์โมนที่ตอบสนองต่อการแสดงออก kgf สามารถปรับจากฮอร์โมนระบบ . kgf อาจทำหน้าที่เป็น stromal andromedin ในต่อมลูกหมาก (13, 19, 20) และถุงน้ำเชื้อ (21) หรือเป็น progestomedin ในมดลูก (22) kgf จะแสดงใน stroma นมของหนูผู้ใหญ่ (23) และมนุษย์ (24, 25) และการเปลี่ยนแปลงในการแสดงออก kgf ระหว่างการเจริญเติบโตหลังคลอดของต่อมน้ำนมเมาส์ชี้ให้เห็นว่ามันอาจจะควบคุม hormonally (26) เรามองเห็นว่าฮอร์โมน mammogenic ที่อาจเกิดขึ้นสามารถควบคุมทางชีวภาพ kgf โดยการปรับเปลี่ยนการสังเคราะห์ใน stroma นมการเปลี่ยนแปลงความไวของเยื่อบุผิวที่จะ kgf ตามระเบียบของระดับและความสัมพันธ์ของ KGFR หรือโดยการปรับวิถีการส่งสัญญาณ postreceptor ในรายงานนี้เราจ้างระบบคอลลาเจนเจลวัฒนธรรมอนุญาตสำหรับฮอร์โมนตอบสนองสามมิติเจริญเติบโตของเซลล์เยื่อบุผิวและ morphogenesis ภายใต้เงื่อนไขที่กำหนดไว้ (27) เพื่อตรวจสอบการปรับ kgf mitogenesis จากฮอร์โมน mammogenic

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

stromally ได้มาปัจจัยการเจริญเติบโตเคราติโนไซต์ ( kgf ) สามารถมีบทบาทสำคัญในการพัฒนาต่อมเต้านมเป็นสื่อกลาง stromal มีเซนไคมอล / การเจริญเติบโตของเยื่อบุผิว และการเปลี่ยนแปลงทางสัณฐานวิทยาของ . อย่างไรก็ตาม ได้ประสานงานการควบคุมการพัฒนาต่อมเต้านมและโดยฮอร์โมน mammogenic kgf คือ unexplored . ในการศึกษาเหล่านี้ผลโดยตรงของฮอร์โมนในระดับ mammogenic กิโลกรัมน้ำหนักเยื่อบุ mitogenesis และการแสดงออกของตัวรับเป็นกิโลกรัม ตรวจสอบการใช้เมาส์ในการ serum-free ต่อมน้ำนมการบุผิว คอลลาเจน เจลเซลล์วัฒนธรรม 1 กิโลกรัม ผลิตเพิ่มขึ้นเฉลี่ย 7-fold จำนวนเซลล์หลังจาก 10 วันของวัฒนธรรมนี้ผลต่อกิโลกรัม เพิ่มขึ้นในการปรากฏตัวของฮอร์โมนโปรเจสเตอโรน ( 9-fold ) หรือ ( P ; 15 เท่า ) กับการรวมกันของ P และฮอร์โมน ( 22 เท่า ) การผลิต การกระตุ้นที่แข็งแกร่งที่สุด เอสโตรเจนไม่แสดงใด ๆเพิ่มเติมกระตุ้นการเจริญเติบโตอย่างใดอย่างหนึ่งเพียงอย่างเดียวหรือใช้ร่วมกับฮอร์โมนและ / หรือ Pการวิเคราะห์การป้องกันไรโบนิวคลีเ พบว่าเซลล์เยื่อปลูกในอาหารสูตร MS ที่เสริมด้วยฮอร์โมนเอสโตรเจนต่อ แต่ไม่ได้ หรือ มีเป็น 10 เท่าสูงกว่าระดับของสถานะคงตัวกิโลกรัม รีเซพเตอร์ ( kgfr ) เอ็มอาร์เอ็นเอ ( mRNA ) การแสดงออก kgfr ไม่ได้เกิดจากการสัมผัสระยะสั้น P จะมีผลต่อเสถียรภาพของ mRNA มากกว่าลองเปิดใช้งานศึกษาพบว่า การลดเวลาในช่วงต้นระดับ kgfr mRNA ในวัฒนธรรมแรกเริ่มถูกลดลงอย่างมากโดย p และ การวัดอัตราการหมุนเวียนของ RNA หลังจากการรักษาพบว่า แอกติโนมัยซินดี P เพิ่ม T1 / 2 ของ kgfr mRNA เมื่อเทียบกับพื้นฐานปานกลาง ดังนั้น P และฮอร์โมนอาจต่างกัน เสริมบารมี ผลโดยตรงของ mitogenic กิโลกรัม : P บางส่วนโดยความสูงของระดับ mRNA ของ kgfr ,โดยแนวทางหลักและเซลล์ PRL ไม่มีผลต่อการแสดงออก kgfr . การพัฒนาต่อมเต้านมจะถูกควบคุมโดยฮอร์โมนจากต่อมใต้สมองและรังไข่ ประสานงาน และ มากที่สุด ปัจจัยการผลิตในประเทศ และ / หรือ เปปไทด์ที่มีอยู่ในระบบการไหลเวียนโลหิต ( 1 ) แม้ว่าปัจจัยการเจริญเติบโตมากอาจมีผลต่อการเจริญเติบโตและความแตกต่างของน้ำหนักเยื่อบุผิว ,มีช่องว่างในความเข้าใจของวิธีการที่ปัจจัยการเจริญเติบโตเหล่านี้ให้ความร่วมมือกับหน่วยงานหลักด้านการพัฒนาต่อมน้ำนม , ฮอร์โมน mammogenic เพื่อเริ่มต้นการพัฒนาโปรแกรมที่ซับซ้อน .