ติดตามตรวจสอบด้วยโปรแกรมเทิร์นอิทอิ

ติดตามตรวจสอบด้วยโปรแกรมเทิร์นอิทอิน (Turn it in) และโปรแกรมอักขราวิสุทธิ์
Dengue virus (DENV) is enveloped viruses containing a single positive-stand genomic RNA. It is classified in the genus Flavivirus into the family flaviviridae with 4 different serotypes (DENV-1, DENV-2, DENV-3 and DENV-4) (Chambers et al., 1990). DENV is the cause of dengue fever and hemorrhagic fever which transmitted between people by mosquitoes called Aedes aegypti and Ae. albopictus. The disease is a public health problem in many countries around the world because the disease has spread widely distributed and almost 40% of the world population at risk of infection, roughly 50-100 million individuals is infected with DENV each year and approximately 390 million people are at risk of dengue infections per year (Bhatt et al., 2013; WHO, 2015). Dengue infections are cause of morbidity and mortality in most tropical and subtropical regions of the world. The disease is endemic in Asia, the Pacific, Americas, Africa and Middle East (Gubler. 2002; Kraemer et al., 2015).
All four serotypes of DENV cause human disease with varied of severity. Most patients have asymptomatic infection. Some patients will have symptoms and development of symptoms to dengue fever (DF), dengue hemorrhagic fever (DHF) and dengue shock syndrome (DSS), respectively. The clinical symptoms of the patient generally such as fever, headache, myalgia, arthralgia and rash. The characteristics symptoms of DHF consist of high fever float with hemorrhagic enlarged liver, which if plasma leaks out to more patients with cardiogenic shock occurs is called DSS, a leakage of plasma, which is unique dengue disease (Bokisch et al., 1973; WHO. 1997).
Primary DENV infection in human is an infection of nature by infected humans will have lifelong immunity to the infecting serotype but short-term cross-protection against heterotypic serotypes. Secondary infection with another DENV serotype, individuals are at a greater risk of severe disease than during a primary infection. Secondary heterotypic DENV infection sometime causes the Antibody-Dependent Enhancement (ADE) phenomenon (Halstead et al., 1970). ADE occurs when antibody-virus complexes are into cells via Fcγ receptor (FcγR)-mediated endocytosis which has three main human Fcγs (FcγRI, FcγRIIa and FcγRIIb) that expresses the roles associated with ADE of DENV. (Littaua et al., 1990; Rodrigo et al., 2006; Watanabe et al., 2015). Antibodies to the structural precursor-membrane protein (prM) when partial cleavage of prM from the viral surface reduces the density of antigen available for viral neutralization, leaving dengue viruses susceptible to ADE by antibody to prM (Dejnirattisai et al., 2010).
The production of neutralizing antibodies (NAbs) is a correlate vaccine against flavivirus. NAbs directed mostly to E protein inhibit viral attachment and replication within the cell. This E-specific antibody is mediated homologous protection against dengue reinfection (Guzman and Vazquez, 2010). Plaque reduction neutralization test (PRNT) using live viruses is currently the “gold standard” for measuring neutralizing or enhancing antibodies, which measures the inhibition of viral infectivity (neutralization) as a reduction of plaque formation on a cell monolayer (Russal and Nisalak. 1967; Akihigo and Junko. 2013). These assays lack standardize format, generating a low sample throughput, using labor-intensive and time-consuming to detect antibodies.
The current assay for ADE activity can be studied either in vitro or in vivo. In vivo study has clinical relevance by utilizing various sources of virus-specific antibody such as anti-sera and mouse monoclonal antibodies (Goncalvez et al., 2007; Alwis et al., 2014). ADE assay have been developed for in vitro study to quantitative enhancing antibody. This assay increases the yield of viral progeny from cells exposed to virus-antibody mixture (Halstead and O'Rourke. 1977). ADE assay are conducted by first exposing the virus of interest to antibody at different levels of concentration or to an appropriate antibody-serum. After an appropriate period of incubation, progeny virus yield or number of infected cells are determined and compared. (Olsen et al., 1992). Although ADE assay can detect enhancing antibody, but it cannot be used to measure the amount of enhancing antibody exact number because it requires the cells to check for enhancing antibody and viral load appropriate for the detection of enhancing antibody. therefore, this method procedure is complex and very long time to detect.
From the above limitations, the researchers have developed method for detecting dengue enhancing antibodies at a simple, rapid and more efficient using virus labeled reporter, such as the luciferase enzyme in DENV or green fluorescent protein (GFP) (dengue reporter virus) (Zou et al., 2011; Song et al., 2014). It is capable of measuring fluorescence or enzyme activity to indicate the ability to multiply

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ติดตามตรวจสอบด้วยโปรแกรมเทิร์นอิทอิน (เปิดใน) และโปรแกรมอักขราวิสุทธิ์ไวรัสไข้เลือดออก (DENV) จะประกอบด้วยตัวเดียวยืนบวก genomic อาร์เอ็นเอไวรัสขัด มันถูกจัดอยู่ใน Flavivirus ใน flaviviridae ครอบครัวกับ 4 serotypes ที่แตกต่างกัน (DENV-1, DENV 2, DENV-3 และ DENV 4) (แชมเบอร์สและ al., 1990) DENV เป็นสาเหตุของโรคไข้เลือดออกและโรคไข้เลือดออกซึ่งส่งคนโดยยุงมาก aegypti และ Ae albopictus โรคเป็นปัญหาสาธารณสุขในหลายประเทศทั่วโลกเนื่องจากโรคนี้ลุกลามกระจายอย่างกว้างขวาง และเกือบ 40% ของประชากรโลกที่เสี่ยงต่อการติดเชื้อ การประมาณ 50-100 ล้านคนติด DENV แต่ละปีและประมาณ 390 ล้านคนเสี่ยงต่อการติดเชื้อไข้เลือดออกปี (Bhatt et al., 2013 ที่ 2015) การติดเชื้อไข้เลือดออกมีสาเหตุ morbidity และตายในภูมิภาคเขตร้อน และแบบมากที่สุดของโลก โรคมียุงในเอเชีย แปซิฟิก อเมริกา แอฟริกา และตะวันออกกลาง (Gubler. 2002 Kraemer et al., 2015) Serotypes 4 ทั้งหมดของ DENV ทำให้โรคมนุษย์กับความรุนแรงที่แตกต่างกัน ผู้ป่วยส่วนใหญ่ติดเชื้อแสดงอาการได้ บางผู้ป่วยจะมีอาการและอาการโรคไข้เลือดออก (DF), ไข้เลือดออก (DHF) และอาการไข้เลือดออกช็อก (DSS), การพัฒนาตามลำดับ อาการทางคลินิกของผู้ป่วยโดยทั่วไปเช่นไข้ ปวดศีรษะ myalgia, arthralgia และผื่น อาการลักษณะของ DHF ประกอบด้วยไข้สูงลอยด้วยเลือดออกขยายตับ ซึ่งถ้าพลาสมารั่วออกไปมากผู้ป่วยช็อก cardiogenic เกิดเรียกว่า DSS การรั่วของพลาสมา ซึ่งเป็นโรคไข้เลือดออกที่ไม่ซ้ำกัน (Bokisch et al., 1973 ที่ ปี 1997) DENV หลักการติดเชื้อในมนุษย์คือการ ติดเชื้อของธรรมชาติมนุษย์ที่ติดเชื้อจะมีภูมิคุ้มกันรองกับ serotype infecting แต่ระยะสั้นระหว่างป้องกัน heterotypic serotypes ติดเชื้อรอง ด้วย serotype DENV อื่น บุคคลมีความเสี่ยงสูงของโรครุนแรงกว่าในระหว่างการติดเชื้อเป็นหลัก รอง heterotypic DENV ติดเชื้อบางครั้งทำให้เกิดปรากฏการณ์ขึ้นอยู่กับแอนติบอดีเพิ่มประสิทธิภาพ (ADE) (Halstead et al., 1970) เกิด ADE เมื่อคอมเพล็กซ์แอนติบอดีไวรัสเข้าไปในเซลล์ผ่านตัวรับ Fcγ (FcγR) -mediated endocytosis ที่มีสามหลักมนุษย์ Fcγs (FcγRI, FcγRIIa และ FcγRIIb) ที่แสดงบทบาทที่เกี่ยวข้องกับ ADE DENV (Littaua et al., 1990 Rodrigo et al., 2006 เบะ et al., 2015) แอนตี้ไปเยื่อสารตั้งต้นโครงสร้างโปรตีน (prM) เมื่อปริบางส่วนของ prM จากผิวไวรัสช่วยลดความหนาแน่นของการตรวจหาที่ว่างสำหรับปฏิกิริยาสะเทินไวรัส การปล่อยไวรัสไข้เลือดออกไวต่อการ ADE โดยแอนติบอดีการ prM (Dejnirattisai et al., 2010) การผลิตของ neutralizing แอนตี้ (อังกฤษ) เป็นวัคซีน correlate กับ flavivirus NAbs โดยตรงส่วนใหญ่จะอีโปรตีนยับยั้งไวรัสที่แนบมาและการจำลองแบบภายในเซลล์ แอนติบอดีเฉพาะอีนี้เป็น mediated homologous ป้องกันไข้เลือดออกต่อการติดเชื้อ (Guzman และ Vazquez, 2010) หินปูนลดปฏิกิริยาสะเทินทดสอบ (PRNT) ใช้ไวรัสสดอยู่ "มาตรฐานทอง" วัด neutralizing หรือเพิ่มแอนตี้ ซึ่งมาตรการยับยั้งไวรัส infectivity (ปฏิกิริยาสะเทิน) เป็นการลดการก่อตัวของหินปูนใน monolayer เซลล์ (Russal และ Nisalak. 1967 Akihigo และจุงโกะ 2013) การขาด assays เหล่านี้กำหนดมาตรฐานรูปแบบ การสร้างแบบตัวอย่างต่ำสุดสามารถประมวลผลได้ ใช้เวลาตรวจหาแอนตี้ และ labor-intensive สามารถศึกษาวิเคราะห์ปัจจุบันสำหรับกิจกรรม ADE ในหลอด หรือในสัตว์ทดลอง การศึกษาในสัตว์ทดลองมีความเกี่ยวข้องทางคลินิก โดยใช้ประโยชน์จากแหล่งต่าง ๆ ของแอนติบอดีไวรัสเฉพาะเช่นนโยบายต่อต้านและเมาส์โมโนแอนตี้ (Goncalvez et al., 2007 Alwis et al., 2014) วิเคราะห์ ADE ได้รับการพัฒนาสำหรับการศึกษาในการสร้างแอนติบอดีเชิงปริมาณ ทดสอบนี้ช่วยเพิ่มผลผลิตของลูกหลานไวรัสจากเซลล์สัมผัสกับส่วนผสมแอนติบอดีไวรัส (Halstead และ O'Rourke 1977) วิเคราะห์ ADE จะดำเนินการ โดยครั้งแรกเปิดเผยไวรัสน่าสนใจแอนติบอดีในระดับต่าง ๆ ของความเข้มข้น หรือมีแอนติบอดีเซรั่มที่เหมาะสม หลังจากเป็นระยะที่เหมาะสมของคณะทันตแพทยศาสตร์ ผลผลิตไวรัสลูกหลานหรือจำนวนเซลล์ที่ติดเชื้อที่กำหนด และเปรียบเทียบ (โอลเซ็น et al., 1992) แต่ ADE วิเคราะห์สามารถตรวจพบแอนติบอดีที่สร้าง ไม่สามารถใช้วัดจำนวนเพิ่มแอนติบอดีจำนวนที่แน่นอนเนื่องจากต้องการเซลล์เพื่อตรวจหาแอนติบอดีและไวรัสโหลดที่เหมาะสมสำหรับการตรวจพบแอนติบอดีเพิ่มขึ้น ดังนั้น ขั้นตอนวิธีนี้เป็นเวลานาน และซับซ้อนสืบจากข้อจำกัดข้างต้น นักวิจัยได้พัฒนาวิธีการตรวจสอบเพิ่มแอนตี้ที่ง่าย รวดเร็ว และมีประสิทธิภาพมากขึ้นโดยใช้ชื่อโปรแกรมรายงาน เช่นเอนไซม์ luciferase DENV หรือโปรตีนเรืองแสงสีเขียว (GFP) (ไวรัสโปรแกรมรายงานไข้เลือดออก) ไวรัสไข้เลือดออก (Zou et al., 2011 เพลง et al., 2014) สามารถวัด fluorescence หรือเอนไซม์เพื่อบ่งชี้ความสามารถในการคูณ

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

(เปิดใน)
และโปรแกรมอักขราวิสุทธิ์ไวรัสเด็งกี่(DENV) เป็นไวรัสที่ห่อหุ้มที่มีบวกยืนเดียวจีโนมอาร์เอ็นเอ มันถูกจัดให้อยู่ในประเภท Flavivirus ลง flaviviridae ครอบครัวที่มี 4 สายพันธุ์ที่แตกต่างกัน (DENV-1, DENV-2, DENV-3 และ DENV-4) (Chambers et al., 1990) DENV เป็นสาเหตุของโรคไข้เลือดออกและโรคไข้เลือดออกซึ่งส่งระหว่างผู้คนโดยยุงที่เรียกว่ายุงลายและแอะ albopictus โรคที่เป็นปัญหาสุขภาพของประชาชนในหลายประเทศทั่วโลกเพราะเป็นโรคที่มีการกระจายการกระจายอย่างกว้างขวางและเกือบ 40% ของประชากรโลกที่มีความเสี่ยงของการติดเชื้อประมาณ 50-100000000 บุคคลที่ติด DENV ในแต่ละปีและประมาณ 390,000,000 คน ที่มีความเสี่ยงของการติดเชื้อไข้เลือดออกต่อปี (Bhatt, et al, 2013;. WHO, 2015) การติดเชื้อไข้เลือดออกเป็นสาเหตุของเจ็บป่วยและเสียชีวิตในเขตร้อนและกึ่งเขตร้อนมากที่สุดของโลก โรคที่เป็นโรคประจำถิ่นในเอเชียแปซิฟิก, อเมริกา, แอฟริกาและตะวันออกกลาง (Gubler 2002. Kraemer et al, 2015)..
ทั้งสี่สายพันธุ์ของ DENV ก่อให้เกิดโรคที่แตกต่างกันของมนุษย์ที่มีความรุนแรง ผู้ป่วยส่วนใหญ่มีการติดเชื้อที่ไม่มีอาการ ผู้ป่วยบางรายจะมีอาการและการพัฒนาของอาการโรคไข้เลือดออก (DF) โรคไข้เลือดออก (DHF) และกลุ่มอาการของโรคไข้เลือดออกช็อก (DSS) ตามลำดับ อาการทางคลินิกของผู้ป่วยโดยทั่วไปเช่นมีไข้ปวดศีรษะปวดกล้ามเนื้อปวดข้อและผื่น อาการลักษณะของโรคไข้เลือดออกประกอบด้วยลอยไข้สูงที่มีตับโตโรคซึ่งถ้าการรั่วไหลของพลาสม่าออกให้แก่ผู้ป่วยมากขึ้นด้วยการช็อต cardiogenic เกิดขึ้นเรียกว่า DSS การรั่วไหลของพลาสม่าซึ่งเป็นโรคไข้เลือดออกที่ไม่ซ้ำกัน (Bokisch et al, 1973;. WHO . 1997).
ประถมเชื้อ DENV ในมนุษย์มีการติดเชื้อของธรรมชาติโดยมนุษย์ที่ติดเชื้อจะมีภูมิคุ้มกันตลอดชีวิตที่จะติดไวรัส serotype แต่ระยะสั้นป้องกันข้ามสายพันธุ์กับ heterotypic การติดเชื้อรองกับ serotype DENV อีกบุคคลที่มีความเสี่ยงมากขึ้นของการเกิดโรคที่รุนแรงกว่าในช่วงการติดเชื้อหลัก รอง heterotypic เชื้อ DENV บางครั้งทำให้เกิดการส่งเสริมแอนติบอดีขึ้นกับ (ADE) ปรากฏการณ์ (สคีด et al., 1970) ADE เกิดขึ้นเมื่อคอมเพล็กซ์แอนติบอดีไวรัสเข้าสู่เซลล์ผ่านรับFcγ (FcγR) -mediated endocytosis ซึ่งจะมีสามหลักของมนุษย์Fcγs (FcγRI, FcγRIIaและFcγRIIb) ที่แสดงออกถึงบทบาทที่เกี่ยวข้องกับอาคารของ DENV (Littaua, et al, 1990;. โรดริโก, et al, 2006. วาตานาเบะ et al, 2015). แอนติบอดีต่อโปรตีนสารตั้งต้นเมมเบรนที่มีโครงสร้าง (PRM) เมื่อความแตกแยกบางส่วนของ PRM จากพื้นผิวของไวรัสจะช่วยลดความหนาแน่นของแอนติเจนใช้ได้สำหรับการวางตัวเป็นกลางของไวรัสออกจากไวรัสไข้เลือดออกไวต่อการ ADE โดยแอนติบอดีที่จะ PRM (Dejnirattisai et al., 2010).
การผลิตของ neutralizing แอนติบอดี (NAbs) เป็นวัคซีนที่มีความสัมพันธ์กับ flavivirus NAbs กำกับส่วนใหญ่จะยับยั้งโปรตีน E สิ่งที่แนบไวรัสและการจำลองแบบภายในเซลล์ แอนติบอดีนี้ E-เฉพาะเป็นผู้ไกล่เกลี่ยคล้ายคลึงกันกับการป้องกันการติดเชื้อไข้เลือดออก (Guzman และ Vazquez, 2010) ลดคราบจุลินทรีย์ทดสอบการวางตัวเป็นกลาง (prnt) โดยใช้ไวรัสที่มีชีวิตอยู่ในปัจจุบันคือ "มาตรฐานทองคำ" สำหรับการวัด neutralizing หรือการเสริมสร้างภูมิคุ้มกันซึ่งมาตรการยับยั้งการติดเชื้อไวรัส (วางตัวเป็นกลาง) ในขณะที่การลดลงของการสะสมคราบจุลินทรีย์บน monolayer เซลล์ (Russal และ Nisalak. 1967 ; Akihigo และจุนโกะ 2013). การตรวจเหล่านี้ขาดมาตรฐานรูปแบบการสร้างผ่านตัวอย่างต่ำใช้แรงงานมากและใช้เวลานานในการตรวจสอบแอนติบอดี.
การวิเคราะห์ปัจจุบันสำหรับกิจกรรม ADE สามารถศึกษาทั้งในหลอดทดลองหรือในร่างกาย ในการศึกษาร่างกายมีความเกี่ยวข้องทางคลินิกโดยใช้แหล่งต่างๆแอนติบอดีไวรัสที่เฉพาะเจาะจงเช่นการต่อต้านซีรั่มและโคลนอลแอนติบอดีเมาส์ (Goncalvez et al, 2007;. Alwis et al, 2014). ทดสอบ ADE ได้รับการพัฒนาสำหรับในหลอดทดลองการศึกษาเพื่อเสริมสร้างแอนติบอดีเชิงปริมาณ การทดสอบนี้จะเพิ่มผลผลิตของลูกหลานไวรัสจากเซลล์สัมผัสกับส่วนผสมไวรัสแอนติบอดี (สคีดและโรคส์. 1977) ทดสอบ ADE จะดำเนินการโดยเปิดเผยเป็นครั้งแรกไวรัสที่สนใจของแอนติบอดีในระดับที่แตกต่างกันของความเข้มข้นหรือแอนติบอดีในซีรั่มที่เหมาะสม- หลังจากระยะเวลาที่เหมาะสมของการบ่มผลผลิตไวรัสลูกหลานหรือจำนวนของเซลล์ที่ติดเชื้อจะถูกกำหนดและเมื่อเทียบกับ (โอลเซ่น et al., 1992) ถึงแม้ว่าการทดสอบ ADE สามารถตรวจจับการเสริมสร้างแอนติบอดี แต่มันไม่สามารถใช้ในการวัดปริมาณของการเสริมสร้างแอนติบอดีจำนวนที่แน่นอนเพราะต้องใช้เซลล์เพื่อตรวจสอบสำหรับการเสริมสร้างแอนติบอดีและเหมาะสมปริมาณไวรัสในการตรวจหาแอนติบอดีการเสริมสร้าง ดังนั้นขั้นตอนวิธีการนี้เป็นเวลาที่ซับซ้อนและนานมากในการตรวจสอบ.
จากข้อ จำกัด ดังกล่าวข้างต้นนักวิจัยได้มีการพัฒนาวิธีการตรวจหาโรคไข้เลือดออกเสริมสร้างแอนติบอดี้ที่เรียบง่ายได้อย่างรวดเร็วและมีประสิทธิภาพมากขึ้นโดยใช้นักข่าวที่มีข้อความไวรัสเช่นเอนไซม์ luciferase ใน DENV หรือ โปรตีนเรืองแสงสีเขียว (GFP) (นักข่าวไวรัสไข้เลือดออก) (Zou et al, 2011;.. เพลง et al, 2014) มันมีความสามารถในการวัดกิจกรรมการเรืองแสงหรือเอนไซม์เพื่อแสดงให้เห็นความสามารถในการคูณ