3.6 rmation สาย Con ของการรวมตัวกัน

3.6 rmation สาย Con ของการรวมตัวกันของยีน อาณานิคมเปลี่ยนได้รับการดูแลมานานกว่า 16 เดือน กับการโอนต่อเนื่องเป็นระยะ ๆ และแทรกมั่นคงของ mutat- เอ็ดปอนด์ได้รับการตรวจสอบโดยการขยายระยะเวลาของการเพาะปลูกทั้งใน AB- รู้สึกและการปรากฏตัวของ norflurazon ข้อมูล PDS เบิ้และถูกขยายโดย PCR ภูมิภาคและบางส่วนของปอนด์รวมทั้งเว็บไซต์การกลายพันธุ์และเป็นเบิ้ล ภายใต้การลำดับดีเอ็นเอ (ดูมะเดื่อ. 3 และ 5 สำหรับตัวแทนใหม่ ไส) ทั้งหมดอาณานิคมเปลี่ยนทน norflurazon เปิดเผย ลำดับดีเอ็นเอของพลาสมิดของผู้บริจาคที่ได้รับจาก pPlat- ปอนด์ จุด การกลายพันธุ์หารือ norflurazon ต้านทานที่ถูกระบุในทรานส์ทั้งหมด ที่เกิดขึ้นอาณานิคม (GC แทน TG 5185-5186 ในตำแหน่ง mutat- เอ็ด PDS) ( รูป 5 A) แทรกดีเอ็นเอต่างประเทศนอกจากนี้ยังได้รับการยืนยันจาก การปรากฏตัวของความหลากหลายใน introns ของปอนด์ที่ ลำดับ PDS ใน PDS pPlat- ได้มาจากเอช สายพันธุ์ pluvialis NIES-144 [37] ในขณะที่สายพันธุ์ PDS เปลี่ยนลำดับแสดงให้เห็นว่าคล้ายกับว่า ข้อมูล PDS pPlat-, สายพันธุ์ WT (1844 em. Wille K-0084 (SCCAP)) ปอนด์ (หมายเลขภาคยานุวัติ GenBank: KP826910) และที่เกิดขึ้นเอง สายพันธุ์ที่ทน norflurazon แสดงให้เห็นลำดับที่แตกต่างกัน ( รูป 5 B) นอกจากนี้ยังมีการจัดลำดับของ psad บางส่วน 5 'UTR, CDS เบิ้เต็มรูปแบบและ 3' UTR ของ psad การยืนยันการแทรกของเทป PsaD- เบิ้ในอาณานิคมทดสอบทั้งหมด (ไม่ได้แสดงข้อมูล) นอกจากนี้การวิเคราะห์ blot ภาคใต้ใช้เฉพาะเบิ้ล
หน้า 1
วิธีการขั้นสูงสำหรับงานวิศวกรรมทางพันธุกรรมของ Haematococcus pluvialis (Chlorophyceae, Volvocales) Revital ชารอน-Gojman เอโดะ Maimon สเตฟาน Leu, Aliza Zarka แซมมี่ Boussiba ⁎ เทคโนโลยีชีวภาพสาหร่ายห้องปฏิบัติการแอสโซซิฝรั่งเศส, อัลเบิร์แคทซ์กรม Dryland วิทยาการที่จาค็อบ Blaustein สถาบันสำหรับทะเลทรายวิจัยเบนกูเรียนมหาวิทยาลัย Negev, Sede Boker วิทยาเขต 84,990 อิสราเอล นามธรรม articleinfo ประวัติศาสตร์บทความ: ที่ได้รับ 23 กันยายน 2014 ที่ได้รับการแก้ไขในรูปแบบ 8 มีนาคม 2015 ได้รับการยืนยัน 28 มีนาคม 2015 ออนไลน์ที่มีอยู่ 11 เมษายน 2015 คำสำคัญ: พันธุวิศวกรรม การเปลี่ยนแปลง Haematococcus pluvialis Phytoene desaturase ขั้นสูงรถรับส่งเวกเตอร์สำหรับการเปลี่ยนแปลงนิวเคลียร์ที่มีประสิทธิภาพและพันธุวิศวกรรมของ Haematococcus pluvialis ได้รับการพัฒนาและทดสอบโดยการแทรกการเชื่อมโยงทรานส์ยีน desaturase phytoene (PDS) MU- ยีน tated ใน codon สำหรับกรดอะมิโนที่ตำแหน่ง 504 (จาก leucine เพื่อ arginine) อัตราผลตอบแทนเอนไซม์ทนต่อการที่ สารกำจัดวัชพืช norflurazon และใช้เป็นเครื่องหมายภายนอกเลือกสำหรับการเปลี่ยนแปลงของเอช pluvialis นวนิยาย โคลนเวกเตอร์ที่ช่วยให้การแทรกของยีนที่เพิ่มขึ้นทั้งใน 5 'และ 3' ในตอนท้ายของ PDS กลายพันธุ์ได้ รับการออกแบบโดยการใส่เครื่องหมายเลือกลงในโคลนเวกเตอร์ pBluescript ครั้งที่สองเอสเค (-) เพื่อให้ pBS- PDS fea- ทัวริง PDS กลายพันธุ์รวมทั้งจีโนม 2000 bp ของโปรโมเตอร์ของมัน ในรุ่นที่สอง pBS- PDS สั้นเป็น creat- เอ็ดโดยการร่นระยะลำดับโปรโมเตอร์ 1000 bp เว็บไซต์ที่ไม่ซ้ำข้อ จำกัด 5 'และ 3' ของเครื่องหมายการเลือก ได้รับการสงวนไว้สำหรับการแทรกและการเปลี่ยนแปลงพร้อมกันกับสอง transgenes การเปลี่ยนแปลง efficien- cy อย่างมีนัยสำคัญดีกว่ารายงานก่อนหน้านี้ประสบความสำเร็จในการเปลี่ยนแปลงของความถี่ 2 × 10 -5 ทั้งที่มี โปรโมเตอร์ยาวและระยะสั้นเช่นเดียวกับโครงสร้างเชิงเส้น เทปแสดงออกเบิ้ลที่ได้มาจากเวกเตอร์ pGenD- เบิ้ถูกใส่เข้าไปใน PDS pBS- ทั้ง 5 'หรือ 3 ของปอนด์และประสบความสำเร็จในการเปลี่ยนเอช pluvialis, ส่งผลให้สายพันธุ์วิศวกรรมที่ไม่ค่อยแสดงความ mRNA เบิ้ขับเคลื่อนด้วย Chlamydomonas reinhardtii psad โปรโมเตอร์ ทั้งพลาสมิดวงกลมเช่นเดียวกับดีเอ็นเอเชิงเส้นเท่านั้นประกอบด้วยเทปเบิ้หลอมละลายไป เครื่องหมายเลือก PDS ถูกนำมาใช้ประสบความสำเร็จกับวิศวกรเอช pluvialis เป็นผู้ก่อสร้างพลาสมิดที่นำเสนอ ที่นี่เช่นเดียวกับการใช้เครื่องหมายเลือกที่โดดเด่นภายนอกที่เป็นตัวแทนของพิมพ์เขียวสำหรับอนาคตเร็จ การผลิตครบปลอดภัย, สาหร่ายดัดแปลงพันธุกรรมสำหรับการผลิตเป็นไปได้ของผลิตภัณฑ์ที่มีมูลค่าสูง เชื้อเพลิงชีวภาพ © 2015 Elsevier BV สงวนลิขสิทธิ์ 1. บทนำ สาหร่ายมีผลผลิตชีวมวลขนหัวลุกสูงและสามารถสะสมต่อเนื่องจาก ความเข้มข้นอย่างมีนัยสำคัญในช่วงปลายของผลิตภัณฑ์ที่มีมูลค่าสูงหรือกว่า 50% ของ น้ำหนักแห้งน้ำมันในรูปแบบของ triacylglycerol (TAG) ภายใต้เพียงพอ เงื่อนไข [30,31,33,41] . ความเหมาะสมของสาหร่ายเป็นที่มีศักยภาพ แหล่งที่มาของเชื้อเพลิงชีวภาพได้ดึงดูดความสนใจที่เพิ่มขึ้นในสาหร่าย biotech- nology [5,7,11,17,19,26,35,36,41] . สาหร่ายผลิตที่หลากหลายของ ผลิตภัณฑ์ที่มีมูลค่าสูงรวมทั้ง carotenoids และไขมันไม่อิ่มตัว กรด (PUFAs) ทั้ง constitutively อยู่ในกรอบของการเผาผลาญหลัก หรือ inductively เป็นการตอบสนองการเผาผลาญรองกับความเครียดต่างๆ [1,3,9,17] . การผลิต pharmaceutically ดังกล่าวและ nutraceutically สารเคมีที่สำคัญเป็นหนึ่งในวิธีการที่มีแนวโน้มมากที่สุดสำหรับ การใช้ประโยชน์ในเชิงพาณิชย์ของสาหร่าย แต่สายพันธุ์สาหร่ายและโปร กระบวนการ duction จำเป็นต้องมีการปรับปรุงที่สำคัญในระดับต่างๆเพื่อ การแข่งขันประสบความสำเร็จกับผลิตภัณฑ์ที่ใช้ในอาหารเครื่องสำอางเพาะ ture และการเกษตรที่มีการเตรียมการสังเคราะห์หรือสารสกัดจาก วัตถุดิบธรรมชาติอื่น ๆ โดยทั่วไปประมาณสาหร่ายราคาผลิตภัณฑ์ (เชื้อเพลิง carotenoids, PUFA โปรตีน ฯลฯ ) อยู่เหนือประมาณ 3-5 ครั้ง ราคาสำหรับตลาดผลิตภัณฑ์คู่แข่งจากแหล่งอื่น ๆ [22] ดังนั้นลายเซ็น nificant ก้าวหน้าในชีวมวลและอัตราการสะสมสินค้าราคาถูก เทคโนโลยีการเพาะปลูกและการเก็บเกี่ยวที่ดีขึ้นและ extrac- สินค้า ขั้นตอนการที่จำเป็นสำหรับความก้าวหน้าในการแข่งขันของ ผลิตภัณฑ์สาหร่าย [11,41] หนึ่งในวิธีหลักสำหรับการปรับปรุง ผลผลิตของสาหร่ายเป็นพันธุวิศวกรรมที่ประสบความสำเร็จโดยใช้ความปลอดภัย เทคโนโลยีที่อำนวยความสะดวกในการเพาะปลูกกลางแจ้งและการตลาดผลิตภัณฑ์ เทคโนโลยีส่วนใหญ่ของการเปลี่ยนแปลงสาหร่ายได้อาศัยห sertion ของตัวบ่งชี้การใช้ยาปฏิชีวนะของเชื้อแบคทีเรียแรงหนุนจากการก่อการไวรัสหรือสาหร่าย องค์ประกอบ [2,14,21,29,39] ที่ประสบความสำเร็จการเปลี่ยนแปลงนิวเคลียร์และวิศวกรรมการเผาผลาญเพื่อให้ห่างไกล ได้รับการรายงานเฉพาะใน Chlamydomonas reinhardtii, Phaeodactylum tricornutum และ Thalassiosira pseudonana [16,27,38] . สาหร่ายสีเขียวเซลล์เดียว Haematococcus pluvialis (เอช pluvialis) เป็น ถือได้ว่าเป็นแหล่งธรรมชาติที่ดีที่สุดสำหรับมูลค่าสูงสีแดง astaxanthin, carotenoid ที่สะสมในน้ำมันข

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

3.6 rmation สายคอนของการรวมตัวกันของยีนอาณานิคมเปลี่ยนได้รับการดูแลมานานกว่า 16 เดือนกับการโอนต่อเนื่องเป็นระยะๆ และแทรกมั่นคงของ mutat เอ็ดปอนด์ได้รับการตรวจสอบโดยการขยายระยะเวลาของการเพาะปลูกทั้งใน AB รู้สึกและการปรากฏตัวของ norflurazon ข้อมูล PDS เบิ้และถูกขยายโดย PCR ภูมิภาคและบางส่วนของปอนด์รวมทั้งเว็บไซต์การกลายพันธุ์และเป็นเบิ้ลภายใต้การลำดับดีเอ็นเอ (ดูมะเดื่อ. 3 และ 5 สำหรับตัวแทนใหม่ไส) ทั้งหมดอาณานิคมเปลี่ยนทน norflurazon เปิดเผยลำดับดีเอ็นเอของพลาสมิดของผู้บริจาคที่ได้รับจาก pPlat ปอนด์จุดการกลายพันธุ์หารือ norflurazon ต้านทานที่ถูกระบุในทรานส์ทั้งหมดที่เกิดขึ้นอาณานิคม (GC แทน TG 5185-5186 ในตำแหน่ง mutat เอ็ด PDS) (รูปที่ 5 A) แทรกดีเอ็นเอต่างประเทศนอกจากนี้ยังได้รับการยืนยันจากการปรากฏตัวของความหลากหลายใน introns ของปอนด์ที่ลำดับ PDS ใน PDS pPlat ได้มาจากเอชสายพันธุ์ pluvialis NIES-144 [37] ในขณะที่สายพันธุ์ PDS เปลี่ยนลำดับแสดงให้เห็นว่าคล้ายกับว่าข้อมูล PDS pPlat- สายพันธุ์ WT (1844 em Wille K-0084 (SCCAP)) ปอนด์ (หมายเลขภาคยานุวัติ GenBank: KP826910) และที่เกิดขึ้นเองสายพันธุ์ที่ทน norflurazon แสดงให้เห็นลำดับที่แตกต่างกัน (รูปที่ 5 ข) นอกจากนี้ยังมีการจัดลำดับของ psad บางส่วน 5 ' UTR ทำลายซีดีเบิ้เต็มรูปแบบและ 3' UTR นั้น ๆ psad การยืนยันการแทรกของเทป PsaD เบิ้ในอาณานิคมทดสอบทั้งหมด (ไม่ได้แสดงข้อมูล) นอกจากนี้การวิเคราะห์ภาคใต้ใช้เฉพาะเบิ้ลหน้า 1วิธีการขั้นสูงสำหรับงานวิศวกรรมทางพันธุกรรมของ Haematococcus pluvialis (Chlorophyceae, Volvocales) Revital ชารอน Gojman เอโดะ Maimon สเตฟานลัว แซมมี่ Aliza Zarka Boussiba ⁎เทคโนโลยีชีวภาพสาหร่ายห้องปฏิบัติการแอสโซซิฝรั่งเศส อัลเบิร์แคทซ์กรม Negev สถาบันสำหรับทะเลทรายวิจัยเบนกูเรียนมหาวิทยาลัย Dryland วิทยาการที่จาค็อบ Blaustein, Sede Boker วิทยาเขต 84,990 อิสราเอลนามธรรม articleinfo ประวัติศาสตร์บทความ: ที่ได้รับ 23 กันยายน 2014 ที่ได้รับการแก้ไขในรูปแบบ 8 มีนาคม 2015 ได้รับการยืนยัน 28 มีนาคม 2015 ออนไลน์ที่มีอยู่ 11 เมษายน 2015 คำสำคัญ: พันธุวิศวกCod รรมการเปลี่ยนแปลง Haematococcus pluvialis Phytoene desaturase ขั้นสูงรถรับส่งเวกเตอร์สำหรับการเปลี่ยนแปลงนิวเคลียร์ที่มีประสิทธิภาพและพันธุวิศวกรรมของ Haematococcus pluvialis ได้รับการพัฒนาและทดสอบโดยการแทรกการเชื่อมโยงทรานส์ยีน desaturase phytoene (PDS) ในหมู่ยีน tatedในสำหรับกรดอะมิโนที่ตำแหน่ง 504 (จาก leucine เพื่ออาร์จินีน) อัตราผลตอบแทนเอนไซม์ทนต่อการที่สารกำจัดวัชพืช norflurazon และใช้เป็นเครื่องหมายภายนอกเลือกสำหรับการเปลี่ยนแปลงของเอช pluvialis นวนิยายโคลนเวกเตอร์ที่ช่วยให้การแทรกของยีนที่เพิ่มขึ้นทั้งใน 5 ' และ 3' ในตอนท้ายของ PDS กลายพันธุ์ได้รับการออกแบบโดยการใส่เครื่องหมายเลือกลงในโคลนเวกเตอร์ pBluescript ครั้งที่สองเอสเค (-) เพื่อให้ pBS PDS fea ทัวริง PDS กลายพันธุ์รวมทั้งจีโนม 2000 bp ของโปรโมเตอร์ของมันในรุ่นที่สอง pBS PDS สั้นเป็น creat-เอ็ดโดยการร่นระยะลำดับโปรโมเตอร์ 1000 bp เว็บไซต์ที่ไม่ซ้ำข้อจำกัด 5 ' และ 3' ของเครื่องหมายการเลือกได้รับการสงวนไว้สำหรับการแทรกและการเปลี่ยนแปลงพร้อมกันกับสอง transgenes การเปลี่ยนแปลง efficien cy อย่างมีนัยสำคัญดีกว่ารายงานก่อนหน้านี้ประสบความสำเร็จในการเปลี่ยนแปลงของความถี่ 2 × 10 -5 ทั้งที่มีโปรโมเตอร์ยาวและระยะสั้นเช่นเดียวกับโครงสร้างเชิงเส้นเทปแสดงออกเบิ้ลที่ได้มาจากเวกเตอร์ pGenD เบิ้ถูกใส่เข้าไปใน PDS pBS-ทั้ง 5 ' หรือ 3 ของปอนด์และประสบความสำเร็จในการเปลี่ยนเอช pluvialis ส่งผลให้สายพันธุ์วิศวกรรมที่ไม่ค่อยแสดงความ mRNA เบิ้ขับเคลื่อนด้วย Chlamydomonas reinhardtii psad โปรโมเตอร์ทั้งพลาสมิดวงกลมเช่นเดียวกับดีเอ็นเอเชิงเส้นเท่านั้นประกอบด้วยเทปเบิ้หลอมละลายไปเครื่องหมายเลือก PDS ถูกนำมาใช้ประสบความสำเร็จกับวิศวกรเอช pluvialis เป็นผู้ก่อสร้างพลาสมิดที่นำเสนอที่นี่เช่นเดียวกับการใช้เครื่องหมายเลือกที่โดดเด่นภายนอกที่เป็นตัวแทนของพิมพ์เขียวสำหรับอนาคตเร็จการผลิตครบปลอดภัย สาหร่ายดัดแปลงพันธุกรรมสำหรับการผลิตเป็นไปได้ของผลิตภัณฑ์ที่มีมูลค่าสูงเชื้อเพลิงชีวภาพ © 2015 Elsevier BV สงวนลิขสิทธิ์ 1 บทนำสาหร่ายมีผลผลิตชีวมวลขนหัวลุกสูงและสามารถสะสมต่อเนื่องจากความเข้มข้นอย่างมีนัยสำคัญในช่วงปลายของผลิตภัณฑ์ที่มีมูลค่าสูงหรือกว่า 50% นั้น ๆ น้ำหนักแห้งน้ำมันในรูปแบบของ triacylglycerol (แท็ก) ภายใต้เพียงพอเงื่อนไข [30,31,33,41] ความเหมาะสมของสาหร่ายเป็นที่มีศักยภาพแหล่งที่มาของเชื้อเพลิงชีวภาพได้ดึงดูดความสนใจที่เพิ่มขึ้นในสาหร่ายเทคโนโลยีชีวภาพ-nology [5,7,11,17,19,26,35,36,41] ทั้งกรด (PUFAs) carotenoids ของผลิตภัณฑ์ที่มีมูลค่าสูงรวมทั้งสาหร่ายผลิตที่หลากหลายของและไขมันไม่อิ่มตัว constitutively อยู่ในกรอบของการเผาผลาญหลักหรือเป็นการตอบสนองการเผาผลาญรองกับความเครียดต่าง ๆ ท่าน [1,3,9,17] การผลิต pharmaceutically ดังกล่าวและ nutraceutically สารเคมีที่สำคัญเป็นหนึ่งในวิธีการที่มีแนวโน้มมากที่สุดสำหรับการใช้ประโยชน์ในเชิงพาณิชย์ของสาหร่ายแต่สายพันธุ์สาหร่ายและโปรกระบวนการ duction จำเป็นต้องมีการปรับปรุงที่สำคัญในระดับต่างๆเพื่อการแข่งขันประสบความสำเร็จกับผลิตภัณฑ์ที่ใช้ในอาหารเครื่องสำอางเพาะ ture และการเกษตรที่มีการเตรียมการสังเคราะห์หรือสารสกัดจากวัตถุดิบธรรมชาติอื่นๆ โดยทั่วไปประมาณสาหร่ายราคาผลิตภัณฑ์ (เชื้อเพลิง carotenoids, PUFA โปรตีนฯลฯ) อยู่เหนือประมาณ 3-5 ครั้งราคาสำหรับตลาดผลิตภัณฑ์คู่แข่งจากแหล่งอื่นๆ [22] ดังนั้นลายเซ็น nificant ก้าวหน้าในชีวมวลและอัตราการสะสมสินค้าราคาถูกเทคโนโลยีการเพาะปลูกและการเก็บเกี่ยวที่ดีขึ้นและ extrac สินค้าขั้นตอนการที่จำเป็นสำหรับความก้าวหน้าในการแข่งขันของผลิตภัณฑ์สาหร่าย [11,41] หนึ่งในวิธีหลักสำหรับการปรับปรุงผลผลิตของสาหร่ายเป็นพันธุวิศวกรรมที่ประสบความสำเร็จโดยใช้ความปลอดภัยเทคโนโลยีที่อำนวยความสะดวกในการเพาะปลูกกลางแจ้งและการตลาดผลิตภัณฑ์เทคโนโลยีส่วนใหญ่ของการเปลี่ยนแปลงสาหร่ายได้อาศัยห sertion ที่ประสบความสำเร็จกของตัวบ่งชี้การใช้ยาปฏิชีวนะของเชื้อแบคทีเรียแรงหนุนจากการก่อการไวรัสหรือสาหร่ายองค์ประกอบ [2,14,21,29,39]ารเปลี่ยนแปลงนิวเคลียร์และวิศวกรรมการเผาผลาญเพื่อให้ห่างไกลได้รับการรายงานเฉพาะใน Chlamydomonas reinhardtii, Phaeodactylum tricornutum และ Thalassiosira pseudonana [16,27,38] สาหร่ายสีเขียวเซลล์เดียว astaxanthin ถือได้ว่าเป็นแหล่งธรรมชาติที่ดีที่สุดสำหรับมูลค่าสูงสีแดง Haematococcus pluvialis (เอช pluvialis) เป็น carotenoid ที่สะสมในน้ำมันข

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

3.6 rmation สาย Con ของการรวมตัวกันของยีน 16 เดือนกับการโอนต่อเนื่องเป็นระยะ ๆ และแทรกมั่นคงของ mutat- AB- รู้สึกและการปรากฏตัวของ norflurazon ข้อมูล PDS เบิ้และถูกขยายโดยวิธี PCR ภายใต้การลำดับดีเอ็นเอ (ดูมะเดื่อ. 3 และ 5 สำหรับตัวแทนใหม่ไส) ​​ทั้งหมดอาณานิคมเปลี่ยนทน norflurazon เปิดเผย pPlat- ปอนด์จุดการกลายพันธุ์หารือ norflurazon ต้านทานที่ถูกระบุในทรานส์ทั้งหมดที่เกิดขึ้นอาณานิคม (GC แทน TG 5185-5186 ในตำแหน่ง mutat- เอ็ด PDS) (รูปที่ 5) การปรากฏตัวของความหลากหลายใน introns ของปอนด์ที่ลำดับใน PDS PDS pPlat- ได้มาจากเอชสายพันธุ์ pluvialis NIES-144 [37] ในขณะที่สายพันธุ์ PDS ข้อมูล PDS pPlat-, สายพันธุ์ WT (. 1844 em Wille K-0084 (SCCAP)) ปอนด์ (หมายเลขภาคยานุวัติ GenBank: KP826910) และที่เกิดขึ้นเองสายพันธุ์ที่ทน norflurazon แสดงให้เห็นลำดับที่แตกต่างกัน (รูปที่ 5 B ) นอกจากนี้ยังมีการจัดลำดับของ psad บางส่วน 5 'UTR, CDS เบิ้เต็มรูปแบบและ 3' UTR ของ psad การยืนยันการแทรกของเทป PsaD- เบิ้ในอาณานิคมทดสอบทั้งหมด (ไม่ได้แสดงข้อมูล) นอกจากนี้การวิเคราะห์ blot
ใต้ใช้ภาคเฉพาะเบิ้ลลหน้า
Haematococcus pluvialis (Chlorophyceae, Volvocales) Revital ชารอน -Gojman เอโดะ Maimon สเตฟาน Leu, Aliza Zarka แซมมี่ Boussiba ⁎ อัลเบิร์แคทซ์กรม Dryland วิทยาการที่จาค็อบ Blaustein Negev, Sede Boker วิทยาเขต 84,990 อิสราเอลนามธรรม articleinfo ประวัติศาสตร์บทความ: ที่ได้รับ 23 กันยายน 2014 ที่ได้รับการแก้ไขในรูปแบบ 8 มีนาคม 2015 ได้รับการยืนยันวันที่ 28 มีนาคม 2015 ออนไลน์ที่มีอยู่ 11 เมษายน 2015 คำสำคัญ: พันธุวิศวกรรมการเปลี่ยนแปลง Haematococcus pluvialis Phytoene desaturase Haematococcus pluvialis desaturase phytoene (PDS) MU- ยีน tated ใน codon สำหรับกรดอะมิโนที่ตำแหน่ง 504 (จาก leucine เพื่อ arginine) อัตราผลตอบแทนเอนไซม์ทนต่อการที่สารกำจัดวัชพืช norflurazon pluvialis นวนิยาย 5 'และ 3' ในตอนท้ายของ PDS กลายพันธุ์ได้ pBluescript ครั้งที่สองเอสเค (-) เพื่อให้ pBS- PDS fea- ทัวริง PDS กลายพันธุ์รวมทั้งจีโนม 2000 bp ของโปรโมเตอร์ของมันในรุ่นที่สอง pBS- PDS สั้นเป็น creat- เอ็ดโดยการร่น ระยะลำดับโปรโมเตอร์ 1000 bp เว็บไซต์ที่ไม่ซ้ำข้อ จำกัด 5 'และ 3' ของเครื่องหมายการเลือก transgenes การเปลี่ยนแปลง efficien- cy 2 × 10 -5 ทั้งที่มี pGenD- เบิ้ถูกใส่เข้าไปใน PDS pBS- ทั้ง 5 'หรือ 3 pluvialis, mRNA เบิ้ขับเคลื่อนด้วย Chlamydomonas reinhardtii psad โปรโมเตอร์ เครื่องหมายเลือก PDS pluvialis เป็นผู้ก่อสร้างพลาสมิดที่นำเสนอ การผลิตครบปลอดภัย, เชื้อเพลิงชีวภาพ© 2015 Elsevier BV สงวนลิขสิทธิ์ 1. บทนำ 50% ของน้ำหนักแห้งน้ำมันในรูปแบบของ triacylglycerol (TAG) ภายใต้เพียงพอเงื่อนไข [30,31,33,41] nology biotech- [5,7,11,17,19,26,35,36,41] สาหร่ายผลิตที่หลากหลายของผลิตภัณฑ์ที่มีมูลค่าสูงรวมทั้ง carotenoids และไขมันไม่อิ่มตัวกรด (PUFAs) ทั้ง constitutively อยู่ในกรอบของการเผาผลาญหลักหรือ inductively [1,3,9,17] การผลิต pharmaceutically ดังกล่าวและ nutraceutically แต่สายพันธุ์สาหร่ายและโปรกระบวนการ duction ture วัตถุดิบธรรมชาติอื่น ๆ (เชื้อเพลิง carotenoids, PUFA โปรตีน ฯลฯ ) อยู่เหนือประมาณ 3-5 ครั้ง ๆ [22] ดังนั้นลายเซ็น nificant extrac- สินค้า ผลิตภัณฑ์สาหร่าย [11,41] หนึ่งในวิธีหลักสำหรับการปรับปรุง sertion องค์ประกอบ [2,14,21,29,39] ได้รับการรายงานเฉพาะใน Chlamydomonas reinhardtii, Phaeodactylum tricornutum และ Thalassiosira pseudonana [16,27,38] สาหร่ายสีเขียวเซลล์เดียว Haematococcus pluvialis (เอช pluvialis) เป็น astaxanthin, carotenoid ที่สะสมในน้ำมันข

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

3 .6 สาย rmation con ของการรวมตัวกันของยีนอาณานิคมเปลี่ยนได้รับการดูแลมานานกว่า 16 เดือนกับการโอนต่อเนื่องเป็นระยะจะและแทรกมั่นคงของ mutat - เอ็ดปอนด์ได้รับการตรวจสอบโดยการขยายระยะเวลาของการเพาะปลูกทั้งใน AB -norflurazon ข้อมูล PDS เบิ้และถูกขยายโดย PCR ภูมิภาคและบางส่วนของปอนด์รวมทั้งเว็บไซต์การกลายพันธุ์และเป็นเบิ้ลภายใต้การลำดับดีเอ็นเอ ( ดูมะเดื่อ .3 และ 5 สำหรับตัวแทนใหม่ไส ) ทั้งหมดอาณานิคมเปลี่ยนทน norflurazon เปิดเผยลำดับดีเอ็นเอของพลาสมิดของผู้บริจาคที่ได้รับจาก pplat - ปอนด์จุดการกลายพันธุ์หารือ norflurazon ต้านทานที่ถูกระบุในทรานส์ทั้งหมด( GC แทน TG 5185-5186 ในตำแหน่ง mutat - เอ็ด PDS ) ( รูป 5 ) แทรกดีเอ็นเอต่างประเทศนอกจากนี้ยังได้รับการยืนยันจากการปรากฏตัวของความหลากหลายใน introns ของปอนด์ที่ลำดับ PDS the PDS pplat - ได้มาจากเอชสายพันธุ์สีเขียว Haematococcus pluvialis [ 37 ]PDS เปลี่ยนลำดับแสดงให้เห็นว่าคล้ายกับว่าข้อมูล PDS pplat - ,สายพันธุ์ WT ( 1844 เอ็ม วิลลี่ k-0084 ( sccap ) ปอนด์ ( หมายเลขภาคยานุวัติขนาด : kp826910 ) และที่เกิดขึ้นเองสายพันธุ์ที่ทน norflurazon แสดงให้เห็นลำดับที่แตกต่างกัน ( รูป 5 B ) นอกจากนี้ยังมีการจัดลำดับของ psad บางส่วน 5 ' UTR ,ซีดีเบิ้เต็มรูปแบบและ 3 ' UTR ของ psad การยืนยันการแทรกของเทป psad - เบิ้ในอาณานิคมทดสอบทั้งหมด ( ไม่ได้แสดงข้อมูล ) นอกจากนี้การวิเคราะห์เปรอะเปื้อนภาคใต้ใช้เฉพาะเบิ้ล

หน้า 1วิธีการขั้นสูงสำหรับงานวิศวกรรมทางพันธุกรรมของสาหร่ายสีเขียว ( วิธีการ รีไวทัล - , ชารอน volvocales ) gojman เอโดะ maimon สเตฟานลู , Aliza ซาร์กาแซมมี่ boussiba เทคโนโลยีชีวภาพสาหร่ายห้องปฏิบัติการแอสโซซิฝรั่งเศส⁎ ,อัลเบิร์แคทซ์กรม dryland วิทยาการที่จาค็อบบลาวสไตน์สถาบันสำหรับทะเลทรายวิจัยเบนกูเรียนมหาวิทยาลัย Negev sede โบเคอร์ , วิทยาเขต 84990 อิสราเอลนามธรรม articleinfo ประวัติศาสตร์บทความ :23 ที่ได้รับกันยายน 2014 ที่ได้รับการแก้ไขในรูปแบบ 8 มีนาคม 2015 28 ได้รับการยืนยันมีนาคม 2015 ออนไลน์ที่มีอยู่ 11 เมษายน 2015 คำสำคัญ :พันธุวิศวกรรมการเปลี่ยนแปลงสาหร่ายสีเขียวสาหร่ายสีเขียวที่มีขั้นสูงรถรับส่งเวกเตอร์สำหรับการเปลี่ยนแปลงนิวเคลียร์ที่มีประสิทธิภาพและพันธุวิศวกรรมของไฟโทอีนที่มีไฟโทอีน ( PDS ) มู - ยีน tated the codon สำหรับกรดอะมิโนที่ตำแหน่ง 504 ( จากลูซีนเพื่ออาร์ ) อัตราผลตอบแทนเอนไซม์ทนต่อการที่สารกำจัดวัชพืช norflurazon และใช้เป็นเครื่องหมายภายนอกเลือกสำหรับการเปลี่ยนแปลงของเอชนวนิยายสีเขียวและ 5 ' 3 ' ในตอนท้ายของ PDS กลายพันธุ์ได้รับการออกแบบโดยการใส่เครื่องหมายเลือกลงในโคลนเวกเตอร์ ) ครั้งที่สองเอสเค ( - ) เพื่อให้พีบีเอส - PDS FEA - ทัวริง PDS กลายพันธุ์รวมทั้งจีโนม 2000 BP ของโปรโมเตอร์ของมันในรุ่นที่สองพีบีเอส - โปรดักชั่นขาย - เอ็ดโดยการร่นระยะลำดับโปรโมเตอร์ 1000 BP เว็บไซต์ที่ไม่ซ้ำข้อจำกัดและ 5 ' 3 ' ของเครื่องหมายการเลือกได้รับการสงวนไว้สำหรับการแทรกและการเปลี่ยนแปลงพร้อมกันกับสอง transgenes การเปลี่ยนแปลงปรากฎ - ไซ2 × 10 - 5 ทั้งที่มีโปรโมเตอร์ยาวและระยะสั้นเช่นเดียวกับโครงสร้างเชิงเส้นเทปแสดงออกเบิ้ลที่ได้มาจากเวกเตอร์ pgend - เบิ้ถูกใส่เข้าไปใน PDS พีบีเอส - ทั้ง 5 ' 3 ของปอนด์และประสบความสำเร็จในการเปลี่ยนเอชสีเขียวค็อค ,ส่งผลให้สายพันธุ์วิศวกรรมที่ไม่ค่อยแสดงความ mRNA เบิ้ขับเคลื่อนด้วย reinhardtii psad โปรโมเตอร์ทั้งพลาสมิดวงกลมเช่นเดียวกับดีเอ็นเอเชิงเส้นเท่านั้นประกอบด้วยเทปเบิ้หลอมละลายไปเครื่องหมายเลือก PDS คลาไมโดโมแนสสีเขียวเป็นผู้ก่อสร้างพลาสมิดที่นำเสนอการผลิตครบปลอดภัยที่นี่เช่นเดียวกับการใช้เครื่องหมายเลือกที่โดดเด่นภายนอกที่เป็นตัวแทนของพิมพ์เขียวสำหรับอนาคตเร็จ ,สาหร่ายดัดแปลงพันธุกรรมสำหรับการผลิตเป็นไปได้ของผลิตภัณฑ์ที่มีมูลค่าสูงเชื้อเพลิงชีวภาพสงวนลิขสิทธิ์ 2015 จาก BV สงวนลิขสิทธิ์ 1บทนำสาหร่ายมีผลผลิตชีวมวลขนหัวลุกสูงและสามารถสะสมต่อเนื่องจากความเข้มข้นอย่างมีนัยสำคัญในช่วงปลายของผลิตภัณฑ์ที่มีมูลค่าสูงหรือกว่า 50% ของน้ำหนักแห้งน้ำมันในรูปแบบของ triacylglycerol ( แท็ก ) ภายใต้เพียงพอ[ 3031,33,41 ] ความเหมาะสมของสาหร่ายเป็นที่มีศักยภาพแหล่งที่มาของเชื้อเพลิงชีวภาพได้ดึงดูดความสนใจที่เพิ่มขึ้นในสาหร่ายเทคโนโลยีชีวภาพ - nology [ 5,7,11,17,19,26,35,36,41 ]สาหร่ายผลิตที่หลากหลายของผลิตภัณฑ์ที่มีมูลค่าสูงรวมทั้งแคโรทีนอยด์และไขมันไม่อิ่มตัวกรด ( ปลา ) ทั้ง constitutively อยู่ในกรอบของการเผาผลาญหลักค็อคอุปนัยเป็นการตอบสนองการเผาผลาญรองกับความเครียดต่างๆ [ 1,3,9,17 ]การผลิตอย่างเภสัชกรรมดังกล่าวและ nutraceutically สารเคมีที่สำคัญเป็นหนึ่งในวิธีการที่มีแนวโน้มมากที่สุดสำหรับการใช้ประโยชน์ในเชิงพาณิชย์ของสาหร่ายแต่สายพันธุ์สาหร่ายและโปรกระบวนการ ductionการแข่งขันประสบความสำเร็จกับผลิตภัณฑ์ที่ใช้ในอาหารเครื่องสำอางเพาะ ture และการเกษตรที่มีการเตรียมการสังเคราะห์หรือสารสกัดจากวัตถุดิบธรรมชาติอื่นจะโดยทั่วไปประมาณสาหร่ายราคาผลิตภัณฑ์ ( เชื้อเพลิง carotenoids ,ภูฟ้าโปรตีนฯลฯ ) อยู่เหนือประมาณ 3-5 ครั้งจะราคาสำหรับตลาดผลิตภัณฑ์คู่แข่งจากแหล่งอื่น [ 22 ] ดังนั้นลายเซ็น nificant ก้าวหน้าในชีวมวลและอัตราการสะสมสินค้าราคาถูกเทคโนโลยีการเพาะปลูกและการเก็บเกี่ยวที่ดีขึ้นและสกัด -ขั้นตอนการที่จำเป็นสำหรับความก้าวหน้าในการแข่งขันของผลิตภัณฑ์สาหร่าย [ 1141 ] หนึ่งในวิธีหลักสำหรับการปรับปรุงผลผลิตของสาหร่ายเป็นพันธุวิศวกรรมที่ประสบความสำเร็จโดยใช้ความปลอดภัยเทคโนโลยีที่อำนวยความสะดวกในการเพาะปลูกกลางแจ้งและการตลาดผลิตภัณฑ์