3). Error
bars, SEM. Statistical analyses performed using Student t test, *P < 0.05. (D)
Lanes from TLC plate exhibiting lipid extracts from lysophosphatidic acid
acyltransferase activity assay reactions using oleoyl-CoA and lysophosphatidic
acid as substrates. TLC plate was stained with primuline and analyzed
under UV. Activity is demonstrated by production of phosphatidic acid (PA).
Reactions consisted of 1, substrates with lysates of E. coli expressingdecreased growth with significantly slower doubling times and
decreased cell density during stationary phase (Fig. 2A). We used
the inducible promoter of strain 3C2’s RNAi construct to determine
that the decrease in growth in this strain is derived from
expression of the construct, as the growth rate and cell density of
3C2 in repressive media are not appreciably different from WT
(Fig. S5). However, the growth defects of 3C2 and 3D6 do not
correlate to the degree of Thaps3_264297 knockdown (Fig. S3 B
and C), indicating that secondary effects of integration, expression,
or processing of the RNAi construct may be occurring in these
strains—a phenomenon found in plant transformations (29). We
also investigated the growth of 1A6 and 1B1 under a 12 h:12 h light:
dark regime for 116 h. Strains 1A6 and 1B1 grew comparably to
WT under light:dark conditions (Fig. 2B), demonstrating similar
growth rates to WT during both the light and dark periods (Fig. 2C)
recombinant Thaps3_264297; 2, lysates with no substrate; 3, substrates with
lysates of E. coli expressing an empty control vector; 4, control lysates with
no substrates; and 5, substrates with no lysates. Standard PA is shown in 6,
cospotted in 7, with extracts from reaction 1 to show comigration, and
cospotted in 8, with extracts from reaction 3 to show comigration.
3 ) ข้อผิดพลาดบาร์ , SEM ผลการศึกษาวิเคราะห์ข้อมูลโดยใช้การทดสอบนักเรียน T * P < 0.05 ( D )ถนนหนทางจาก TLC plate ซึ่งสกัดจากกรดไขมัน lysophosphatidicacyltransferase กิจกรรมการทดสอบปฏิกิริยาและใช้ COA oleoyl lysophosphatidicกรดเป็นท แผ่น TLC เปื้อน primuline และวิเคราะห์ภายใต้แสงยูวี กิจกรรมสาธิตการผลิต phosphatidic กรด ( PA )ปฏิกิริยาจำนวน 1 , พื้นผิวที่มี lysates ของ E . coli expressingdecreased การเจริญเติบโตด้วยอย่างช้าลงสองเท่าครั้งลดความหนาแน่นเซลล์ในช่วง stationary phase ( รูปที่ 2A ) เราใช้การ inducible โปรโมเตอร์ของสายพันธุ์ของ 3c2 RNAi เพื่อสร้างกำหนดที่ลดลงในการเจริญเติบโตในสายพันธุ์นี้ ได้มาจากการแสดงออกของการสร้างการเติบโตและอัตราความหนาแน่นเซลล์ของ3c2 ในปราบปรามสื่อไม่ได้แตกต่างจาก WT( ภาพเปิด ) อย่างไรก็ตาม การเติบโตของ 3c2 3d6 ข้อบกพร่องและไม่ได้สัมพันธ์กับระดับของ thaps3_264297 S3 B ( รูปน็อคดาวน์และ C ) แสดงว่าระดับผลการรวม , การแสดงออกหรือการประมวลผลของ RNAi สร้างอาจจะเกิดขึ้นเหล่านี้strains-a ปรากฏการณ์ที่พบในแปลงปลูก ( 29 ) เราศึกษาการเจริญเติบโตของ 1a6 และ 1b1 ภายใต้ 12 H : 12 H แสง :116 . ระบอบการปกครองที่มืดและสายพันธุ์ 1a6 1b1 เติบโตปานกันกับWT ภายใต้แสง : มืด ( รูปที่ 2B ) แสดงให้เห็นคล้ายกันอัตราการเจริญเติบโต เพื่อเติมในช่วงระยะเวลาทั้งแสงและความมืด ( ภาพที่ 2 )รีคอมบิแนนท์ thaps3_264297 ; 2 , lysates กับพื้นผิวที่มีพื้นผิว ; 3lysates ของ E . coli แสดงการควบคุมเวกเตอร์ที่ว่างเปล่า ; 4 , การควบคุม lysates กับไม่มีพื้นผิว และ 5 , พื้นผิวที่ไม่มี lysates . โดยมาตรฐานจะเป็น 6cospotted ใน 7 , ด้วยสารสกัดจากปฏิกิริยา 1 แสดง comigration , และcospotted 8 , ด้วยสารสกัดจากปฏิกิริยาที่ 3 แสดง comigration .
การแปล กรุณารอสักครู่..