3. Methods3.1. Synthesis of LAAs wi

3. Methods
3.1. Synthesis of LAAs with Dde-protective group (Dde-C16 and Dde-C20)

C16 (2-amino-d,l-hexadecanoic acid) and C20 (2-amino-d,l-eicosanoic acid) were synthesised following similar methods described before.29 Sodium ethoxide solution was prepared by dissolving sodium in an ethanol solution, to which diethyl acetomidomalonate and 1-bromo-tetradecane or 1-bromo-octadecane was added to produce C16 or C20, respectively. The mixture was refluxed for 4 days and the resultant precipitate was filtered and washed with cold water. The solid was dried then dissolved in DMF and fuming 37% HCl and refluxed again for 4 days. Ammonia solution was added to yield precipitate, which was filtered and washed with cold water and acetone. The final product was dried until powdery.

Dde-OH (N-(4,4-dimethyl-2,6-dioxycyclohexylidene)ethyl alcohol) was synthesised following previously described methods. 30 Then, Dde-OH (1.1 equiv) was dissolved in ethanol, to which triethylamine (3 equiv) and C16 (1 equiv), or C20 (1 equiv), was added. The mixture was refluxed for 2 days and ethanol was evaporated. Ethyl acetate was added, and 5% HCl and brine solution were used to wash the organic phase. The organic layers were collected and filtered by manual short flash chromatography using a silica column. The solution was evaporated and stored at −20 °C to afford yellow crystals. The crystals were washed with cold MeCN, filtered, and dried until powdery. The resulting Dde-C16 and Dde-C20 were analysed by 1H NMR (300 MHz, CDCl3) to produce spectra identical with those reported previously.30

3.2. Synthesis of LCP 1 and LCP 2

LCP 1 was synthesised by coupling Dde-C16 onto pMBHA resin (0.45 mmol/g; 0.2 mmol scale) by using HBTU (4.0 equiv) and DIPEA (6.2 equiv) in DMF (2 × 1 h). Removal of the Dde-protecting group was performed by treatments with 2% hydrazine in DMF (2 × 30 min). The remaining LCP sequence was synthesised by microwave-assisted Boc-SPPS. Amino acid activation was achieved by dissolving Boc-amino acids (4.2 equiv) in 0.5 M HBTU (4.0 equiv) in DMF, followed by the addition of DIPEA (6.2 equiv). The amino acid coupling cycle consisted of Boc-deprotection with neat TFA at room temperature (2 × 1 min), 2 min DMF flow wash, followed by 10 min coupling with the pre-activated amino acid. The temperature was set at 70 °C (35 W, 10 min) for all amino acids, except for Cys and His, which were coupled at 50 °C (35 W, 10 min). N-terminal acetylation and final cleavage from resin was performed as reported previously.29 The lyophilised products were purified by RP-HPLC. The collected fractions were analysed by ESI-MS and RP-HPLC. Where appropriate, fractions were combined and lyophilised to yield pure product.

For the synthesis of LCP 2, Dde-C20 was coupled onto pMBHA resin (0.45 mmol/g; 0.2 mmol scale). The remaining procedures followed that of the synthesis of LCP 1, as mentioned above.

LCP 1 yield: 12.5%. Purity: 90%. Molecular weight: 6086.4. ESI-MS: [M+4H]4+m/z 1523.4 (calcd: 1522.6), [M+5H]5+m/z 1218.4 (calcd: 1218.3), [M+6H]6+m/z 1015.7 (calcd: 1015.3), [M+7H]7+m/z 870.6 (calcd: 870.4), [M+9H]9+m/z 677.5 (calcd: 677.3), [M+10H]10+m/z 608.8 (calcd: 609.5). Rt = 25.0 min (0–100% solvent B, 40 min, C4-column).

LCP 2 Yield: 18.5%. Purity:>99%. Molecular weight: 6198.5. ESI-MS: [M+5H]5+m/z 1241.1 (calcd: 1240.7), [M+6H]6+m/z 1034.7 (calcd: 1034.1), [M+7H]7+m/z 886.6 (calcd: 886.5), [M+9H]9+m/z 690.4 (calcd: 689.7). Rt = 29.0 min (0–100% solvent B, 40 min, C4-column).

3.3. Synthesis of alkyne derivative 9

The synthesis of alkyne derivative 9 was performed with manual Fmoc-SPPS (Scheme 1). Dde-C16 was coupled onto rink amide MBHA resin (0.2 mmol scale) by using HATU (4.0 equiv) and DIPEA (4.2 equiv) in DMF (2 × 1 h). The Dde-protecting group was removed by treatment with 2% hydrazine in DMF (8 × 30 min). Two serine moieties and a lysine residue were incorporated using standard Fmoc-SPPS. Amino acid activation was achieved by dissolving Fmoc-amino acids (4.2 equiv) in 0.5 M HATU (4.0 equiv) in DMF, followed by the addition of DIPEA (4.2 equiv) The coupling cycle consisted of Fmoc deprotection with 20% piperidine in DMF (twice, 10 min and 20 min), a 1 min DMF flow-wash, followed by couplings with preactivated Fmoc-amino acids (2 × 1 h). Pentynoic acid (4.2 equiv) was coupled to the N-terminus of the sequence by using HATU (4 equiv) and DIPEA (4.2 equiv) at room temperature (2 × 1 h), followed by washing with DMF, DCM, MeOH, and drying under vacuum. The peptide was cleaved from the resin in a solution of neat TFA triisopropylsilane/water (95:2.5:2.5) for 4 h. The cleaved peptide was precipitated, filtered, and washed with ice-cold Et2O, dissolved in acetonitrile/water 90:10 and lyophilised. The resulting crude product (9) was purified by RP-HPLC.

Synthesis of alkyne derivative 9.
Scheme 1.
Synthesis of alkyne derivative 9.
Figure options
Peptide 9 yield: 24%. Purity: >95%. Molecular weight: 906.3. ESI-MS

3. Methods
3.1. Synthesis of LAAs with Dde-protective group (Dde-C16 and Dde-C20)

C16 (2-amino-d,l-hexadecanoic acid) and C20 (2-amino-d,l-eicosanoic acid) were synthesised following similar methods described before.29 Sodium ethoxide solution was prepared by dissolving sodium in an ethanol solution, to which diethyl acetomidomalonate and 1-bromo-tetradecane or 1-bromo-octadecane was added to produce C16 or C20, respectively. The mixture was refluxed for 4 days and the resultant precipitate was filtered and washed with cold water. The solid was dried then dissolved in DMF and fuming 37% HCl and refluxed again for 4 days. Ammonia solution was added to yield precipitate, which was filtered and washed with cold water and acetone. The final product was dried until powdery.

Dde-OH (N-(4,4-dimethyl-2,6-dioxycyclohexylidene)ethyl alcohol) was synthesised following previously described methods. 30 Then, Dde-OH (1.1 equiv) was dissolved in ethanol, to which triethylamine (3 equiv) and C16 (1 equiv), or C20 (1 equiv), was added. The mixture was refluxed for 2 days and ethanol was evaporated. Ethyl acetate was added, and 5% HCl and brine solution were used to wash the organic phase. The organic layers were collected and filtered by manual short flash chromatography using a silica column. The solution was evaporated and stored at −20 °C to afford yellow crystals. The crystals were washed with cold MeCN, filtered, and dried until powdery. The resulting Dde-C16 and Dde-C20 were analysed by 1H NMR (300 MHz, CDCl3) to produce spectra identical with those reported previously.30

3.2. Synthesis of LCP 1 and LCP 2

LCP 1 was synthesised by coupling Dde-C16 onto pMBHA resin (0.45 mmol/g; 0.2 mmol scale) by using HBTU (4.0 equiv) and DIPEA (6.2 equiv) in DMF (2 × 1 h). Removal of the Dde-protecting group was performed by treatments with 2% hydrazine in DMF (2 × 30 min). The remaining LCP sequence was synthesised by microwave-assisted Boc-SPPS. Amino acid activation was achieved by dissolving Boc-amino acids (4.2 equiv) in 0.5 M HBTU (4.0 equiv) in DMF, followed by the addition of DIPEA (6.2 equiv). The amino acid coupling cycle consisted of Boc-deprotection with neat TFA at room temperature (2 × 1 min), 2 min DMF flow wash, followed by 10 min coupling with the pre-activated amino acid. The temperature was set at 70 °C (35 W, 10 min) for all amino acids, except for Cys and His, which were coupled at 50 °C (35 W, 10 min). N-terminal acetylation and final cleavage from resin was performed as reported previously.29 The lyophilised products were purified by RP-HPLC. The collected fractions were analysed by ESI-MS and RP-HPLC. Where appropriate, fractions were combined and lyophilised to yield pure product.

For the synthesis of LCP 2, Dde-C20 was coupled onto pMBHA resin (0.45 mmol/g; 0.2 mmol scale). The remaining procedures followed that of the synthesis of LCP 1, as mentioned above.

LCP 1 yield: 12.5%. Purity: 90%. Molecular weight: 6086.4. ESI-MS: [M+4H]4+m/z 1523.4 (calcd: 1522.6), [M+5H]5+m/z 1218.4 (calcd: 1218.3), [M+6H]6+m/z 1015.7 (calcd: 1015.3), [M+7H]7+m/z 870.6 (calcd: 870.4), [M+9H]9+m/z 677.5 (calcd: 677.3), [M+10H]10+m/z 608.8 (calcd: 609.5). Rt = 25.0 min (0–100% solvent B, 40 min, C4-column).

LCP 2 Yield: 18.5%. Purity:>99%. Molecular weight: 6198.5. ESI-MS: [M+5H]5+m/z 1241.1 (calcd: 1240.7), [M+6H]6+m/z 1034.7 (calcd: 1034.1), [M+7H]7+m/z 886.6 (calcd: 886.5), [M+9H]9+m/z 690.4 (calcd: 689.7). Rt = 29.0 min (0–100% solvent B, 40 min, C4-column).

3.3. Synthesis of alkyne derivative 9

The synthesis of alkyne derivative 9 was performed with manual Fmoc-SPPS (Scheme 1). Dde-C16 was coupled onto rink amide MBHA resin (0.2 mmol scale) by using HATU (4.0 equiv) and DIPEA (4.2 equiv) in DMF (2 × 1 h). The Dde-protecting group was removed by treatment with 2% hydrazine in DMF (8 × 30 min). Two serine moieties and a lysine residue were incorporated using standard Fmoc-SPPS. Amino acid activation was achieved by dissolving Fmoc-amino acids (4.2 equiv) in 0.5 M HATU (4.0 equiv) in DMF, followed by the addition of DIPEA (4.2 equiv) The coupling cycle consisted of Fmoc deprotection with 20% piperidine in DMF (twice, 10 min and 20 min), a 1 min DMF flow-wash, followed by couplings with preactivated Fmoc-amino acids (2 × 1 h). Pentynoic acid (4.2 equiv) was coupled to the N-terminus of the sequence by using HATU (4 equiv) and DIPEA (4.2 equiv) at room temperature (2 × 1 h), followed by washing with DMF, DCM, MeOH, and drying under vacuum. The peptide was cleaved from the resin in a solution of neat TFA triisopropylsilane/water (95:2.5:2.5) for 4 h. The cleaved peptide was precipitated, filtered, and washed with ice-cold Et2O, dissolved in acetonitrile/water 90:10 and lyophilised. The resulting crude product (9) was purified by RP-HPLC.

Synthesis of alkyne derivative 9.
Scheme 1. 
Synthesis of alkyne derivative 9.
Figure options
Peptide 9 yield: 24%. Purity: >95%. Molecular weight: 906.3. ESI-MS

0/5000

จาก: -

เป็น: -

ผลลัพธ์ (ไทย) 1: [สำเนา]

คัดลอก!

3. วิธี3.1. การสังเคราะห์ของ LAAs กับกลุ่มป้องกัน Dde (Dde C16 และ Dde C20)C16 (2-อะมิโน-d, l hexadecanoic กรด) และ C20 (2-อะมิโน-d, l eicosanoic กรด) มีวิธีคล้าย synthesised ต่อไปนี้ที่อธิบาย before.29 โซเดียม ethoxide โซลูชันถูกเตรียมละลายโซเดียมในเอทานอล การ diethyl ซึ่ง acetomidomalonate และโบรโม-1-tetradecane หรือ 1-โบรโม-octadecane ถูกผลิต C16 หรือ C20 ตามลำดับ ส่วนผสมคือ refluxed วัน และตะกอน resultant กรอง และล้าง ด้วยน้ำเย็น ของแข็งแห้ง แล้วละลายใน DMF และฟูมิ่ง 37% HCl และ refluxed อีก 4 วัน สารละลายแอมโมเนียถูกเพิ่มเพื่อให้ตะกอน ที่กรอง และล้าง ด้วยน้ำเย็นและอะซิโตน ผลิตภัณฑ์สุดท้ายคือแห้งจนละเอียดDde-OH (N (4, 4-dimethyl-ภาชนะ 2, 6-dioxycyclohexylidene) เอทิลแอลกอฮอล์) เป็นวิธีการอธิบายไว้ก่อนหน้านี้ต่อไปนี้ synthesised 30 แล้ว Dde-OH (1.1 equiv) ละลายในเอทานอล ซึ่ง triethylamine (3 equiv) และ C16 (1 equiv), หรือ C20 (1 equiv), เพิ่ม ส่วนผสมคือ refluxed 2 วัน และมีระเหยเอทานอล เพิ่มเอทิลอะซิเตท และแก้ปัญหา 5% HCl และน้ำเกลือใช้ล้างเฟสอินทรีย์ รวบรวม และถูกกรอง โดยคู่มือ chromatography แฟลชสั้นใช้คอลัมน์ซิลิกาชั้นอินทรีย์ โซลูชันการระเหย และเก็บไว้ที่-20 ° C ถึงจ่ายผลึกสีเหลือง ผลึกถูกล้าง ด้วย MeCN เย็น กรอง และแห้งจนแป้ง ผล Dde-C16 และ Dde C20 ถูกวิเคราะห์ โดย NMR 1 ชม. (300 MHz, CDCl3) ผลิตสเปกตรัมเหมือนกับ previously.30 ที่รายงาน3.2. การสังเคราะห์ LCP 1 และทลฉ. 2LCP 1 ถูก synthesised โดยการเชื่อมต่อ Dde C16 ลงบนเรซิ pMBHA (0.45 mmol/g; 0.2 โมลสเกล) โดย HBTU (4.0 equiv) และ DIPEA (6.2 equiv) ในโหมด DMF (2 × 1 h) กำจัดกลุ่มปกป้อง Dde ถูกดำเนินการ โดยรักษาด้วยไฮดราซีนไฮเดรต 2% ในโหมด DMF (2 × 30 นาที) ลำดับ LCP ที่เหลือถูก synthesised โดยไมโครเวฟช่วย SPPS Boc กรดอะมิโนเปิดใช้งานสำเร็จ โดยการละลายกรดอะมิโน Boc (4.2 equiv) 0.5 M HBTU (4.0 equiv) ในโหมด DMF ตาม ด้วยการเพิ่ม DIPEA (6.2 equiv) กรดอะมิโนที่เชื่อมต่อวงจรประกอบด้วย deprotection Boc กับ TFA เรียบร้อยที่อุณหภูมิห้อง (2 × 1 นาที 2 นาที DMF ไหลล้าง ตาม ด้วย 10 นาทีเชื่อมต่อกับกรดอะมิโนก่อนเปิดใช้งาน อุณหภูมิถูกตั้งไว้ที่ 70 ° C (35 W, 10 นาที) สำหรับกรดอะมิโนทั้งหมด ยกเว้น Cys ของเขา ซึ่งถูกควบคู่ที่ 50 ° C (35 W, 10 นาที) ขั้ว N acetylation และสุดท้ายความแตกแยกจากเรซิ่นได้ดำเนินการตามรายงาน previously.29 ผลิตภัณฑ์ lyophilised ถูกบริสุทธิ์ โดย RP HPLC เศษส่วนที่รวบรวมได้วิเคราะห์ โดย ESI MS และ RP HPLC เหมาะสม เศษส่วนรวม และ lyophilised เพื่อผลิตผลิตภัณฑ์ที่บริสุทธิ์การสังเคราะห์ LCP 2, Dde C20 ถูกควบคู่ลงบนเรซิ pMBHA (0.45 mmol/g; 0.2 โมลสเกล) ขั้นตอนเหลือตามที่ LCP 1 การสังเคราะห์ดังกล่าวข้างต้นผลผลิต LCP 1:12.5% ความบริสุทธิ์: 90% น้ำหนักโมเลกุล: 6086.4 ESI-MS: [M + 4H] 4 + m/z 1523.4 (คำนวณ: 1522.6), [M + 5H] 5 + m/z 1218.4 (คำนวณ: 1218.3), [M + 6H] 6 + m/z 1015.7 (คำนวณ: 1015.3), [M + 7H] 7 + m/z 870.6 (คำนวณ: 870.4), [M + 9H] 9 + m/z 677.5 (คำนวณ: 677.3), [M + 10H] 10 + m/z 608.8 (คำนวณ: 609.5) Rt = 25.0 นาที (0 – 100% ตัวทำละลาย B, 40 นาที คอลัมน์ C4)LCP 2 ผลผลิต: 18.5% ความบริสุทธิ์: > 99% น้ำหนักโมเลกุล: 6198.5 ESI-MS: [M + 5H] 5 + m/z 1241.1 (คำนวณ: 1240.7), [M + 6H] 6 + m/z 1034.7 (คำนวณ: 1034.1), [M + 7H] 7 + m/z 886.6 (คำนวณ: 886.5), [M + 9H] 9 + m/z 690.4 (คำนวณ: 689.7) Rt =นาที 29.0 (0 – 100% ตัวทำละลาย B, 40 นาที คอลัมน์ C4)3.3 การสังเคราะห์อนุพันธ์แอลไคน์ 9การสังเคราะห์อนุพันธ์แอลไคน์ 9 ดำเนินการ ด้วยตนเอง Fmoc-SPPS (แผน 1) Dde C16 ถูกควบคู่ไปบนลานสเก็ต amide MBHA เรซิน (0.2 โมลสเกล) โดย HATU (4.0 equiv) และ DIPEA (4.2 equiv) ในโหมด DMF (2 × 1 h) กลุ่มปกป้อง Dde ถูกเอาออก โดยการรักษาด้วยไฮดราซีนไฮเดรต 2% ในโหมด DMF (8 × 30 นาที) Moieties สองรอบเส้นใยประสาทและสารตกค้างเป็นไลซีนถูกรวมโดยใช้มาตรฐาน Fmoc-SPPS กรดอะมิโนเปิดใช้งานสำเร็จ โดยการละลายกรดอะมิโน Fmoc (4.2 equiv) 0.5 M HATU (4.0 equiv) ใน DMF ตาม ด้วยการเพิ่ม DIPEA (4.2 equiv) รอบข้อต่อประกอบด้วย Fmoc deprotection กับ piperidine 20% ในโหมด DMF (สองครั้ง 10 นาทีและ 20 นาที), 1 นาที DMF ไหล-ล้าง ตาม ด้วยข้อต่อกับกรดอะมิโน Fmoc preactivated (2 × 1 h) กรด Pentynoic (4.2 equiv) ถูกควบคู่กับ terminus N ของลำดับ โดยใช้ HATU (4 equiv) และ DIPEA (4.2 equiv) ที่อุณหภูมิห้อง (2 × 1 h), ตาม ด้วยล้าง ด้วย DMF, DCM เมธานอล และการอบแห้งภายใต้สุญญากาศ เปปไทด์ถูกแบ่งออกจากเรซิ่นในการแก้ไขปัญหาเรียบร้อย TFA triisopropylsilane น้ำ (95:2.5:2.5) สำหรับ 4 h เปปไทด์ cleaved ตกตะกอน กรอง และล้าง ด้วย Et2O ฉ่ำ ละลายในน้ำ acetonitrile 90:10 และ lyophilised น้ำมันดิบผลิตภัณฑ์ (9) บริสุทธิ์ โดย RP HPLCการสังเคราะห์อนุพันธ์แอลไคน์ 9แผนงานที่ 1 การสังเคราะห์อนุพันธ์แอลไคน์ 9ตัวเลือกรูปผลผลิตเปปไทด์ 9:24% ความบริสุทธิ์: > 95% น้ำหนักโมเลกุล: 906.3 ESI MS

การแปล กรุณารอสักครู่..

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:[สำเนา]

คัดลอก!

3. วิธีการ
3.1 การสังเคราะห์ LAAs กับกลุ่ม Dde ป้องกัน (Dde-C16 และ Dde-C20)

C16 (2-Amino-D, กรด L-hexadecanoic) และ C20 (2-Amino-D, กรด L-eicosanoic) ถูกสังเคราะห์ตามวิธีที่คล้ายกันอธิบาย before.29 โซเดียมแก้ปัญหา ethoxide ถูกจัดทำขึ้นโดยการละลายโซเดียมในสารละลายเอทานอลที่ acetomidomalonate diethyl และ 1-Bromo-tetradecane หรือ 1-Bromo-octadecane ถูกเพิ่มเข้ามาในการผลิตหรือ C16 C20 ตามลำดับ ส่วนผสมที่ถูก refluxed เป็นเวลา 4 วันและตะกอนผลลัพธ์ถูกกรองและล้างด้วยน้ำเย็น ของแข็งแห้งแล้วละลายใน DMF และไอ 37% HCl และ refluxed อีกครั้งเป็นเวลา 4 วัน วิธีการแก้ปัญหาแอมโมเนียถูกเพิ่มเข้ามาเพื่อให้ตะกอนซึ่งถูกกรองและล้างด้วยน้ำเย็นและอะซีโตน ผลิตภัณฑ์สุดท้ายถูกทำให้แห้งจนแป้ง.

Dde-โอไฮโอ (N- (4,4-dimethyl-2,6-dioxycyclohexylidene) เอทิลแอลกอฮอล์) ถูกสังเคราะห์วิธีการดังต่อไปนี้อธิบายไว้ก่อนหน้า 30 จากนั้น Dde โอ (1.1 equiv) ถูกละลายในเอทานอลที่ triethylamine (3 equiv) และ C16 (1 equiv) หรือ C20 (1 equiv) ถูกเพิ่มเข้ามา ส่วนผสมที่ถูก refluxed สำหรับ 2 วันและเอทานอลได้รับการระเหย Ethyl acetate ถูกเพิ่มเข้ามาและ 5% HCl และน้ำเกลือแก้ปัญหาถูกนำมาใช้ในการล้างเฟสอินทรีย์ ชั้นอินทรีย์ถูกเก็บรวบรวมและกรองโดยคู่มือแฟลชสั้นโครมาโตโดยใช้คอลัมน์ซิลิกา วิธีการแก้ปัญหาที่ถูกระเหยและเก็บไว้ที่ -20 ° C ถึงจ่ายผลึกสีเหลือง ผลึกถูกล้างด้วย MeCN เย็นกรองและแห้งจนแป้ง ส่งผลให้ Dde-C16 และ C20-Dde วิเคราะห์ 1H NMR (300 MHz, CDCl3) ในการผลิตเหมือนสเปกตรัมกับผู้รายงาน previously.30

3.2 การสังเคราะห์ LCP ที่ 1 และ LCP 2

LCP 1 ถูกสังเคราะห์โดยการแต่งงาน Dde-C16 บนเรซิน pMBHA (0.45 มิลลิโมล / g; 0.2 มิลลิโมลโย) โดยใช้ HBTU (4.0 equiv) และ DIPEA (6.2 equiv) ในกรมเชื้อเพลิงธรรมชาติ (2 × 1 ชั่วโมง) . การกำจัดของกลุ่ม Dde ปกป้องได้ดำเนินการโดยการรักษาด้วย 2% ไฮดราซีนในกรมเชื้อเพลิงธรรมชาติ (2 × 30 นาที) ลำดับ LCP ที่เหลือถูกสังเคราะห์โดยไมโครเวฟช่วย Boc-SPPS เปิดใช้กรดอะมิโนก็ประสบความสำเร็จโดยการละลาย Boc-กรดอะมิโน (4.2 equiv) ใน 0.5 M HBTU (4.0 equiv) ในกรมเชื้อเพลิงธรรมชาติ, ตามด้วยนอกเหนือจาก DIPEA นี้ (6.2 equiv) วงจรกรดอะมิโนมีเพศสัมพันธ์ประกอบด้วย Boc-deprotection กับเรียบร้อย TFA ที่อุณหภูมิห้อง (2 × 1 นาที) 2 นาทีล้างไหล DMF ตามด้วย 10 นาทีมีเพศสัมพันธ์กับกรดอะมิโนก่อนเปิดใช้งาน อุณหภูมิอยู่ที่ 70 ° C (35 วัตต์, 10 นาที) สำหรับกรดอะมิโนทั้งหมดยกเว้นสำหรับ Cys และของเขาซึ่งเป็นคู่ที่ 50 ° C (35 วัตต์, 10 นาที) N-ขั้ว acetylation และความแตกแยกครั้งสุดท้ายจากเรซินได้ดำเนินการตามรายงาน previously.29 ผลิตภัณฑ์ lyophilised ถูกทำให้บริสุทธิ์โดย RP-HPLC เศษส่วนวิเคราะห์โดย ESI-MS และ RP-HPLC ที่เหมาะสมเศษส่วนมารวมกันและ lyophilised ให้ผลผลิตสินค้าบริสุทธิ์.

สำหรับการสังเคราะห์ LCP 2, Dde-C20 เป็นคู่ลงบน pMBHA เรซิน (0.45 มิลลิโมล / g; 0.2 มิลลิโมลโย) ขั้นตอนที่เหลือตามมาของการสังเคราะห์ของ LCP ที่ 1 ดังกล่าวข้างต้น.

LCP 1 Yield: 12.5% ความบริสุทธิ์: 90% น้ำหนักโมเลกุล: 6,086.4 ESI-MS: [M + 4H] 4 + m / z 1523.4 (calcd: 1,522.6) [M + 5H] 5 + m / z 1218.4 (calcd: 1,218.3) [M + 6H] 6 + m / z 1015.7 ( calcd: 1,015.3) [M + 7H] 7 + m / z 870.6 (calcd: 870.4) [M + 9H] 9 + m / z 677.5 (calcd: 677.3) [M + 10H] 10 + m / z 608.8 (calcd: 609.5) Rt = 25.0 นาที (0-100% ตัวทำละลาย B, 40 นาที, C4 คอลัมน์).

LCP 2 อัตราผลตอบแทน 18.5% ความบริสุทธิ์:> 99% น้ำหนักโมเลกุล: 6,198.5 ESI-MS: [M + 5H] 5 + m / z 1241.1 (calcd: 1,240.7) [M + 6H] 6 + m / z 1034.7 (calcd: 1,034.1) [M + 7H] 7 + m / z 886.6 ( calcd: 886.5) [M + 9H] 9 + m / z 690.4 (calcd: 689.7) Rt = 29.0 นาที (0-100% ตัวทำละลาย B, 40 นาที, C4 คอลัมน์).

3.3 การสังเคราะห์อนุพันธ์ alkyne 9

การสังเคราะห์ alkyne อนุพันธ์ 9 ได้ดำเนินการกับคู่มือ Fmoc-SPPS (โครงการ 1) DDE-C16 เป็นคู่ลงบนลานสเก็ตเอไมด์ MBHA เรซิน (0.2 มิลลิโมลโย) โดยใช้ Hatu (4.0 equiv) และ DIPEA (4.2 equiv) ในกรมเชื้อเพลิงธรรมชาติ (2 × 1 ชั่วโมง) กลุ่ม Dde ปกป้องถูกลบออกโดยการรักษาด้วย 2% ไฮดราซีนในกรมเชื้อเพลิงธรรมชาติ (8 × 30 นาที) สอง moieties ซีรีนและไลซีนตกค้างถูกรวมโดยใช้มาตรฐาน Fmoc-SPPS เปิดใช้กรดอะมิโนก็ประสบความสำเร็จโดยการละลายกรด Fmoc อะมิโน (4.2 equiv) ใน 0.5 M Hatu (4.0 equiv) ในกรมเชื้อเพลิงธรรมชาติ, ตามด้วยนอกเหนือจาก DIPEA (4.2 equiv) ที่รอบแต่งงานกันประกอบด้วย Fmoc deprotection กับ 20% piperidine ในกรมเชื้อเพลิงธรรมชาติ ( สองครั้งเป็นเวลา 10 นาทีและ 20 นาที) ซึ่งเป็น 1 นาที DMF ไหลล้างตามด้วยข้อต่อที่มีกรดอะมิโน Fmoc Preactivated (2 × 1 ชั่วโมง) กรด Pentynoic (4.2 equiv) เป็นคู่กับ N-ปลายทางของลำดับโดยใช้ Hatu (4 equiv) และ DIPEA (4.2 equiv) ที่อุณหภูมิห้อง (2 × 1 ชั่วโมง) ตามด้วยการล้างด้วย DMF, DCM, เมธานอลและ การอบแห้งภายใต้สูญญากาศ เปปไทด์ที่ถูกตัดจากเรซินในการแก้ปัญหาของเรียบร้อย TFA triisopropylsilane / น้ำ (95: 2.5: 2.5) เป็นเวลา 4 ชั่วโมง เปปไทด์ cleaved ถูกตกตะกอนกรองและล้างด้วย Et2O เย็น, ละลายใน acetonitrile / น้ำ 90:10 และ lyophilised ผลิตภัณฑ์ที่น้ำมันดิบ (9) บริสุทธิ์โดย RP-HPLC.

การสังเคราะห์อนุพันธ์ alkyne 9.
โครงการ 1.
การสังเคราะห์อนุพันธ์ alkyne 9.
ตัวเลือกรูปที่
เปปไทด์ 9 อัตราผลตอบแทนที่: 24% ความบริสุทธิ์:> 95% น้ำหนักโมเลกุล: 906.3 ESI-MS

การแปล กรุณารอสักครู่..

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:[สำเนา]

คัดลอก!

การแปล กรุณารอสักครู่..

ภาษาอื่น ๆ

การสนับสนุนเครื่องมือแปลภาษา: กรีก, กันนาดา, กาลิเชียน, คลิงออน, คอร์สิกา, คาซัค, คาตาลัน, คินยารวันดา, คีร์กิซ, คุชราต, จอร์เจีย, จีน, จีนดั้งเดิม, ชวา, ชิเชวา, ซามัว, ซีบัวโน, ซุนดา, ซูลู, ญี่ปุ่น, ดัตช์, ตรวจหาภาษา, ตุรกี, ทมิฬ, ทาจิก, ทาทาร์, นอร์เวย์, บอสเนีย, บัลแกเรีย, บาสก์, ปัญจาป, ฝรั่งเศส, พาชตู, ฟริเชียน, ฟินแลนด์, ฟิลิปปินส์, ภาษาอินโดนีเซี, มองโกเลีย, มัลทีส, มาซีโดเนีย, มาราฐี, มาลากาซี, มาลายาลัม, มาเลย์, ม้ง, ยิดดิช, ยูเครน, รัสเซีย, ละติน, ลักเซมเบิร์ก, ลัตเวีย, ลาว, ลิทัวเนีย, สวาฮิลี, สวีเดน, สิงหล, สินธี, สเปน, สโลวัก, สโลวีเนีย, อังกฤษ, อัมฮาริก, อาร์เซอร์ไบจัน, อาร์เมเนีย, อาหรับ, อิกโบ, อิตาลี, อุยกูร์, อุสเบกิสถาน, อูรดู, ฮังการี, ฮัวซา, ฮาวาย, ฮินดี, ฮีบรู, เกลิกสกอต, เกาหลี, เขมร, เคิร์ด, เช็ก, เซอร์เบียน, เซโซโท, เดนมาร์ก, เตลูกู, เติร์กเมน, เนปาล, เบงกอล, เบลารุส, เปอร์เซีย, เมารี, เมียนมา (พม่า), เยอรมัน, เวลส์, เวียดนาม, เอสเปอแรนโต, เอสโทเนีย, เฮติครีโอล, แอฟริกา, แอลเบเนีย, โคซา, โครเอเชีย, โชนา, โซมาลี, โปรตุเกส, โปแลนด์, โยรูบา, โรมาเนีย, โอเดีย (โอริยา), ไทย, ไอซ์แลนด์, ไอร์แลนด์, การแปลภาษา.