Healthy and witches’ broom diseased

Healthy and witches’ broom diseased lime (Citrus aurantifolia
Christm) plants were collected from key lime
gardens of Jiroft in the south of Iran.
Single node shoots were excised from mother plans
and surface-sterilized by soaking in a solution containing
6% bleach and 1% tween 20 for 20 min. The explants
were rinsed tree times in sterile distilled water Sterile explants were placed on agar-solidified MT
medium (Murashige and Tucker, 1969) supplemented
with 2.2 mg/L N6-benzyladenine, 1 mg/L indole-3-
butyric acid and 3% sucrose. The pH was adjusted to
5.8 prior to autoclaving at 121ºC for 15 min. All explants
were maintained at a temperature 24±2ºC under
16 h photopriod with light intensity of 3,000 lux.
Plantlets were subcultured to fresh medium at intervals
of 4 to 8 weeks for 10 months dividing the shoots into
1-cm-long segments.
WBDL phytoplasma was detected using polymerase
chain reaction (PCR). Total DNA was extracted from
leaves using cetyl trimethyl ammonium bromide
(CTAB) extraction method (Zhang et al., 1998). Two
primer pairs P3/P7 and P1/P7 were used to amplify
part of the 16S rRNA gene, the 16S–23S spacer region,
and a portion of the 5-end region of the 23S
rRNA gene from phytoplasmas.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

Healthy และไม้กวาดของแม่มดตัวมะนาว (ส้ม aurantifoliaพืช Christm) ได้รวบรวมจากมะนาวสวนของ Jiroft ในภาคใต้ของประเทศอิหร่านถ่ายภาพโหนเดียวถูกสรรพสามิตจากแผนแม่และฆ่า เชื้อพื้นผิว โดยการแช่ในการแก้ปัญหาที่ประกอบด้วย6% ฟอกขาวและ 1% แต่ 20 นาที 20 ใน explantsถูกเวลากลั้วต้นหมันน้ำกลั่นปลอดเชื้อ explants ถูกวางบน MT ละลายอาหารขนาดกลาง (Murashige และ Tucker, 1969) เสริมมี 2.2 mg/L N6-benzyladenine, 1 mg/L อินโดล-3 -ซูโครสกรดบิวทีริกและ 3% ปรับค่า pH5.8 ก่อน autoclaving ที่ 121ºC 15 นาที ทั้งหมด explantsยังคงไว้ที่อุณหภูมิ 24±2ºC ภายใต้photopriod 16 ชม.กับความเข้มแสงของ 3,000 ลักซ์Plantlets ถูก subcultured สดปานกลางในช่วงเวลา4 ถึง 8 สัปดาห์ 10 เดือนแบ่งหน่อเป็นส่วนยาว 1 ซม.WBDL phytoplasma ตรวจพบโดยใช้พอลิเมอเรสปฏิกิริยาลูกโซ่ (PCR) ดีเอ็นเอทั้งหมดถูกสกัดจากใบใช้ cetyl trimethyl แอมโมเนียโบรไมด์วิธีการสกัด (CTAB) (Zhang et al. 1998) สองใช้รองพื้นคู่ P3/P7 และ P1/P7 ขยายส่วนของยีน 16S rRNA ภูมิภาคแผ่นรอง 16S – 23Sและส่วนภูมิภาค 5 สิ้นสุดของการ 23Sยีนใน rRNA จาก phytoplasmas

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

มีสุขภาพดีและไม้กวาดของมะนาวโรค (Citrus Aurantifolia
Christm) พืชที่ถูกเก็บรวบรวมจากมะนาวที่สำคัญ
สวนของ Jiroft ในภาคใต้ของอิหร่าน.
โหนดหน่อเดี่ยวถูกตัดจากแผนแม่
และพื้นผิวที่ผ่านการฆ่าเชื้อโดยการแช่ในสารละลายที่มี
สารฟอกขาว 6% และ 1 % Tween 20 สำหรับ 20 นาที ชิ้น
ได้รับการล้างครั้งต้นไม้ในการฆ่าเชื้อน้ำกลั่นชิ้นหมันถูกวางไว้บนมอนแทนาวุ้นผลึก
กลาง (Murashige และ Tucker, 1969) เสริม
ด้วย 2.2 มิลลิกรัม / ลิตร N6-benzyladenine 1 มิลลิกรัม / ลิตร indole-3-
butyric กรดและ 3% ซูโครส ค่าพีเอชได้รับการปรับให้
5.8 ก่อนที่จะนึ่งฆ่าเชื้อที่121ºCนาน 15 นาที ชิ้นส่วนทั้งหมด
ถูกเก็บรักษาที่อุณหภูมิ 24 ±2ºCภายใต้
16 ชั่วโมง photopriod กับความเข้มแสง 3,000 ลักซ์.
ต้นกล้าที่ได้เลี้ยงกลางสดในช่วงเวลา
ของ 4-8 สัปดาห์ที่ผ่านมา 10 เดือนแบ่งหน่อออกเป็น
กลุ่ม 1 ซม. ยาว.
WBDL phytoplasma ตรวจพบการใช้โพลิเมอร์
ปฏิกิริยาลูกโซ่ (PCR) ดีเอ็นเอทั้งหมดถูกสกัดจาก
ใบใช้ cetyl ไตรเมทิลแอมโมเนียมโบรไมด์
(CTAB) วิธีการสกัด (Zhang et al., 1998) สอง
ไพรเมอร์คู่ P3 / P7 และ P1 / P7 ถูกนำมาใช้เพื่อขยาย
ส่วนหนึ่งของยีน 16S rRNA ที่ 16S-23S spacer ภูมิภาค
และเป็นส่วนหนึ่งของภูมิภาค 5 จุดสิ้นสุดของ 23S
ยีน rRNA จากไฟโตพลาสมา