The alkylation reagent chloroacetic

The alkylation reagent chloroacetic acid cannot properly be detected by the CAD because the compound is volatile. The substance is detectable with HPLC-UV in very concentrated sample solutions at a low wavelength ( = 210 nm). The same holds true for its degradation product glycolic acid. Also, both impurities are well visible in the 1H NMR spectrum at 4.07 and 3.95 ppm (see Fig. 6) for the methylene group of chloroacetic acid and glycolic acid, respectively. By means of integration of these signals, the amount of both impurities could be calculated in comparison to maleic acid as an internal standard. The method was validated for chloroacetic acid only, because the amount of glycolic acid detected in batch samples was very low and thus of minor interest. The linearity and range were determined from 0.05 to 1.0 per cent (R2 = 0.9996). The method was found to be precise [RSD = 3.7% (n = 6) measured in a batch sample containing 0.09 per cent chloroacetic acid] and accurate (proportional systematic error 1.5% and constant systematic error 0.1 ppm). The accuracy was determined on a spiked batch sample. The spiked concentrations of 0.05, 0.10 and 0.15 per cent were measured in triplicate; the recovery rates ranged from 99 to 101%. The LOQ determined from the slope of the calibration curve according to ICH guideline Q2(R1) is 0.03 per cent (S/N was 165 at this level). However, the sample solution is unstable. The integral of the chloroacetic acid signal decreases by almost 40% within 2 h
after sample preparation while the glycolic acid signal increases.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

กรด chloroacetic รีเอเจนต์ alkylation ไม่ถูกต้องสามารถตรวจพบ โดย CAD เนื่องจากสารประกอบระเหย สารปน ด้วย HPLC UV ในการแก้ปัญหาอย่างเข้มข้นมากที่ความยาวคลื่นที่ต่ำ (= 210 nm) เดียวกันถือจริงสำหรับกรดไกลโคลิผลิตภัณฑ์ลด สิ่งสกปรกทั้งยังมองเห็นได้ดีใน 1H NMR สเปกตรัมที่ 4.07 และ 3.95 ppm (ดูรูป 6) สำหรับกลุ่มลี chloroacetic กรดและกรดไกลโคลิ ตามลำดับ โดยรวมของสัญญาณเหล่านี้ จำนวนสิ่งสกปรกทั้งสองสามารถคำนวณเปรียบเทียบกับกรด maleic เป็นมาตรฐานภายใน วิธีการที่ถูกตรวจสอบสำหรับกรด chloroacetic เท่านั้น เนื่องจากปริมาณของกรดไกลโคลิที่ตรวจพบในตัวอย่างชุดต่ำมาก และ น่าสนใจเล็กน้อย เส้นตรงและช่วงที่กำหนดจาก 0.05 ถึงร้อยละ 1.0 (R2 = 0.9996) พบวิธีที่จะแม่นยำ [RSD = 3.7% (n = 6) วัดในตัวอย่างชุดที่ประกอบด้วยร้อยละ 0.09 chloroacetic กรด] และถูกต้อง (ข้อผิดพลาดระบบสัดส่วน 1.5% และค่าคงผิดพลาดระบบ 0.1 ppm) พิจารณาความถูกต้องในตัวอย่างชุดถูกแทง เข้มข้น 0.05, 0.10 และ 0.15 เปอร์เซ็นต์ถูกแทงถูกวัดลข้อ อัตราการกู้คืนที่อยู่ในช่วงจาก 99 101% ของ LOQ ที่กำหนดจากความชันของเส้นโค้งการสอบเทียบตามแนวทาง ICH Q2(R1) เป็นร้อยละ 0.03 (S/N เดิม 165 ในระดับนี้) อย่างไรก็ตาม ปัญหาอย่างไม่เสถียร ตั้งสัญญาณ chloroacetic กรดลดลง 40% ภายใน 2 ชมหลังจากเตรียมตัวอย่างในขณะที่การเพิ่มสัญญาณลเอ

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

กรด alkylation น้ำยา chloroacetic ไม่สามารถตรวจพบได้โดย CAD เพราะสารระเหย สารนี้สามารถตรวจพบได้ด้วย HPLC-UV ในการแก้ปัญหาของกลุ่มตัวอย่างที่มีความเข้มข้นมากในความยาวคลื่นต่ำ (= 210 นาโนเมตร) เดียวกันถือเป็นจริงสำหรับกรดไกลโคลิผลิตภัณฑ์ย่อยสลายของมัน นอกจากนี้ทั้งสองสิ่งสกปรกที่จะมองเห็นได้ดีในสเปกตรัม 1H NMR ที่ 4.07 และ 3.95 ppm (ดูรูปที่. 6) สำหรับกลุ่มเมทิลีนของกรด chloroacetic และกรดไกลโคลิตามลำดับ โดยวิธีการของการรวมกลุ่มของสัญญาณเหล่านี้จำนวนของทั้งสองสิ่งสกปรกจะถูกคำนวณในการเปรียบเทียบกับอัตราส่วนกรดเป็นมาตรฐานภายใน วิธีการที่ถูกตรวจสอบกรด chloroacetic เท่านั้นเนื่องจากปริมาณของกรดไกลโคลิที่ตรวจพบในตัวอย่างชุดต่ำมากและทำให้ความสนใจของเล็ก ๆ น้อย ๆ เส้นตรงและช่วงได้รับการพิจารณาจาก 0.05 เป็นร้อยละ 1.0 (R2 = 0.9996) วิธีการที่ถูกพบว่ามีความแม่นยำ [RSD = 3.7% (n = 6) วัดในกลุ่มตัวอย่างชุดที่มี 0.09 ต่อกรดร้อย chloroacetic] และถูกต้อง (ข้อผิดพลาดระบบสัดส่วน 1.5% และระบบผิดพลาดคงที่ 0.1 ppm) ความถูกต้องถูกประเมินบนตัวอย่างชุดถูกแทง ความเข้มข้นของแหลม 0.05, 0.10 และ 0.15 เปอร์เซ็นต์อยู่ในวัดเพิ่มขึ้นสามเท่า; อัตราการฟื้นตัวตั้งแต่ 99-101% LOQ ที่กำหนดจากความลาดชันของเส้นโค้งการสอบเทียบตามแนวทาง ICH ไตรมาสที่ 2 (R1) เป็นร้อยละ 0.03 (S / N เป็น 165 ในระดับนี้) อย่างไรก็ตามวิธีการแก้ปัญหาของกลุ่มตัวอย่างไม่เสถียร ซึ่งเป็นส่วนประกอบสำคัญของสัญญาณ chloroacetic กรดลดลงเกือบ 40% ภายใน 2 ชั่วโมง
หลังจากการเตรียมสารตัวอย่างในขณะที่กรดไกลโคลิสัญญาณเพิ่มขึ้น