Determination of MIC and MBC
The minimum inhibitory concentration (MIC) of the exrtracts was estimated for each of the test organisms in triplicates. To 0.5ml of varying concentrations of the extracts (20.0, 18.0, 15.0, 10.0, 8.0, 5.0, 1.0 0.5, 0.05 and 0.005mg/ml), 2ml of nutrient broth was added and then a loopful of the test organism previously diluted to 0.5 McFarland turbidity standard for (bacterial isolates) and 106 cfu/ml (for fungal isolates) was introduced to the tubes.
The procedure was repeated on the test organisms using the standard antibiotics (ciprofloxacin and cotrimoxazole for bacteria and nystatin and amphoteracin B for fungal isolates).
A tube containing nutrient broth only was seeded with the test organisms as described above to serve as control. Tubes containing bacterial cultures were then incubated at 37o C for 24 h while tubes containing fungal spore cultures were incubated for 48 h at room temperature (30 – 32o C).
After incubation the tubes were then examined for microbial growth by observing for turbidity. To determine the MBC, for each set of test tubes in the MIC determination, a loopful of broth was collected from those tubes which did not show any growth and inoculated on sterile nutrient agar (for bacteria) and saboraud dextrose agar (for fungi) by streaking.
Nutrient agar and saboraud agar only were streaked with the test organisms respectively to serve as control.
Plates inoculated with bacteria were then incubated at 37o C for 24 hours while those inoculated with fungi were incubated at room temperature (30 – 32o C) for 48 h. After incubation the concentration at which no visible growth was seen was noted as the minimum bactericidal concentration.
เรื่องของไมค์และช่อง MBC ต่ำสุดลิปกลอสไขความเข้มข้น (MIC) ของ exrtracts ถูกประเมินสำหรับแต่ละสิ่งมีชีวิตที่ทดสอบใน triplicates ให้ 0.5ml ของความเข้มข้นแตกต่างกันของการแยก (20.0, 18.0, 15.0, 10.0, 8.0, 5.0, 1.0 0.5, 0.05 และ 0.005 mg/ml), 2 ml ของซุปธาตุอาหารเข้ามาแล้ว loopful ของสิ่งมีชีวิตของทดสอบก่อนหน้านี้ ยกเว้น 0.5 McFarland ความขุ่นมาตรฐาน (แยกแบคทีเรีย) และ 106 cfu/ml (สำหรับแยกเชื้อรา) ถูกนำมาใช้กับหลอด ขั้นตอนที่ซ้ำในชีวิตทดสอบใช้ยามาตรฐาน (ciprofloxacin และ cotrimoxazole amphoteracin B สำหรับแยกเชื้อราแบคทีเรีย และ nystatin) หลอดที่ประกอบด้วยเฉพาะธาตุอาหารซุปถูก seeded กับชีวิตทดสอบตามที่อธิบายไว้ข้างต้นเป็นตัวควบคุม หลอดที่ประกอบด้วยวัฒนธรรมเชื้อแบคทีเรียได้แล้ว incubated ที่ 37o C ใน 24 ชมในขณะที่หลอดที่ประกอบด้วยสปอร์เชื้อราวัฒนธรรมถูก incubated สำหรับ 48 h ที่อุณหภูมิห้อง (30 – 32o C) หลังจากบ่ม หลอดได้แล้วตรวจสอบการเจริญเติบโตของจุลินทรีย์ โดยการสังเกตสำหรับความขุ่น กำหนดช่อง MBC สำหรับแต่ละชุดของหลอดทดสอบในเรื่องไมค์ loopful ของซุปรวบรวมจากท่อเหล่านั้นซึ่งไม่ได้แสดงการเจริญเติบโต และ inoculated agar ใส่ธาตุอาหารสำหรับแบคทีเรีย) และ saboraud agar ขึ้น (สำหรับเชื้อรา) โดย streaking ธาตุอาหาร agar และ saboraud agar เท่ามีลายกับชีวิตทดสอบตามลำดับเพื่อใช้เป็นตัวควบคุม Plates inoculated with bacteria were then incubated at 37o C for 24 hours while those inoculated with fungi were incubated at room temperature (30 – 32o C) for 48 h. After incubation the concentration at which no visible growth was seen was noted as the minimum bactericidal concentration.
การแปล กรุณารอสักครู่..
การกำหนดค่า MIC และ MBC
ความเข้มข้นต่ำสุดที่ยับยั้ง (MIC) ของ exrtracts ประมาณสำหรับแต่ละสิ่งมีชีวิตในการทดสอบ triplicates เพื่อ 0.5ml ความเข้มข้นที่แตกต่างกันของสารสกัด (20.0, 18.0, 15.0, 10.0, 8.0, 5.0, 1.0 0.5, 0.05 และ 0.005mg / ml) 2ml น้ำซุปสารอาหารที่ถูกเพิ่มเข้ามาแล้ว loopful ของสิ่งมีชีวิตที่ปรับลดการทดสอบก่อนหน้านี้ 0.5 McFarland มาตรฐานความขุ่นสำหรับ (แบคทีเรีย) และ 106 cfu / ml (สำหรับแยกเชื้อรา) ได้รับการแนะนำให้รู้จักกับหลอด. ขั้นตอนซ้ำในการทดสอบสิ่งมีชีวิตโดยใช้ยาปฏิชีวนะมาตรฐาน (ciprofloxacin และ cotrimoxazole สำหรับเชื้อแบคทีเรียและ nystatin และ amphoteracin B สำหรับเชื้อรา แยก). ท่อน้ำซุปที่มีสารอาหารที่เป็นเมล็ดเพียงกับชีวิตการทดสอบตามที่อธิบายไว้ข้างต้นที่จะทำหน้าที่เป็นตัวควบคุม ท่อที่มีวัฒนธรรมแบคทีเรียถูกบ่มแล้ว 37o เซลเซียสเป็นเวลา 24 ชั่วโมงในขณะที่ท่อที่มีสปอร์ของเชื้อราวัฒนธรรมที่ถูกบ่มเป็นเวลา 48 ชั่วโมงที่อุณหภูมิห้อง. (30 - 32o C) หลังจากการบ่มหลอดมีการตรวจสอบแล้วสำหรับการเจริญเติบโตของจุลินทรีย์โดยการสังเกตสำหรับความขุ่น เพื่อตรวจสอบ MBC สำหรับชุดของหลอดทดลองในแต่ละการกำหนด MIC เป็น loopful ของน้ำซุปที่ได้จากหลอดเหล่านั้นซึ่งไม่ได้แสดงการเจริญเติบโตและเชื้อในอาหารเลี้ยงเชื้อสารอาหารที่ผ่านการฆ่าเชื้อ (แบคทีเรีย) และเดกซ์โทรส saboraud วุ้น (สำหรับเชื้อรา) โดย . พุ่งวุ้นสารอาหารและอาหารเลี้ยงเชื้อsaboraud แค่ลายกับชีวิตการทดสอบตามลำดับที่จะทำหน้าที่เป็นตัวควบคุม. แผ่นเชื้อแบคทีเรียถูกบ่มแล้ว 37o เซลเซียสเป็นเวลา 24 ชั่วโมงในขณะที่เชื้อด้วยเชื้อราถูกบ่มที่อุณหภูมิห้อง (30 - 32o C) สำหรับ 48 ชั่วโมง หลังจากการบ่มความเข้มข้นที่ไม่สามารถมองเห็นการเติบโตที่เห็นได้รับการตั้งข้อสังเกตว่ามีความเข้มข้นต่ำสุดที่ฆ่าเชื้อแบคทีเรีย
การแปล กรุณารอสักครู่..
หาไมค์และ MBC
ความเข้มข้นยับยั้งขั้นต่ำ ( MIC ) ของ exrtracts ประมาณสำหรับแต่ละการทดสอบสิ่งมีชีวิต 3 ซ้ำ . เพื่อ 0.5ml เปลี่ยนแปลงความเข้มข้นของสารสกัด ( 20.0 18.0 , 15.0 , 10.0 , 8.0 , 5.0 , 1.0 , 0.5 , 0.05 และ 0.005mg / ml ) 2ml ของซุปสารอาหารเพิ่มแล้ว loopful ของการทดสอบสิ่งมีชีวิตก่อนหน้านี้จำนวน 0มาตรฐานความขุ่น 5 แมคฟาร์แลนด์ ( แบคทีเรียไอโซเลท ) และ 106 cfu / ml ( สำหรับเชื้อราไอโซเลท ) แนะนำหลอด
ขั้นตอนการทำซ้ำการทดสอบในสิ่งมีชีวิต การใช้ยาปฏิชีวนะมาตรฐาน ( และสำหรับแบคทีเรียและนัยสะแตตินไซโปรฟลอกซาซินโคไตรม็อกซาโซล และ amphoteracin B แยกเชื้อรา
)ท่อที่มีน้ำซุปสารอาหารเพียงเมล็ดกับการทดสอบสิ่งมีชีวิตตามที่อธิบายไว้ข้างต้น เพื่อเป็นการควบคุม หลอดที่มีวัฒนธรรมแบคทีเรียแล้วบ่มที่ 37o C 24 ชั่วโมง ในขณะที่หลอดสปอร์เชื้อราที่มีวัฒนธรรมถูกบ่ม 48 ชั่วโมง ที่อุณหภูมิห้อง ( 30 ) 32o C )
หลังจากบ่มหลอดแล้วตรวจสอบจากการสังเกตสำหรับความขุ่นเพื่อตรวจสอบว่า แต่ละชุดของหลอดทดลอง ในการ loopful ของไมค์ , ซุปรวบรวมจากหลอดซึ่งไม่ได้แสดงการเจริญเติบโตของเชื้อบนอาหารวุ้นสารอาหารและฆ่าเชื้อ ( แบคทีเรีย ) และ saboraud dextrose agar ( เชื้อรา ) โดย streaking
วุ้นสารอาหารและ saboraud วุ้นเฉพาะลายกับ ทดสอบระบบ ตามลำดับ เพื่อเป็นการควบคุม
จานใส่แบคทีเรีย แล้วบ่มที่ 37o เป็นเวลา 24 ชั่วโมง ส่วนที่ใส่เชื้อราถูกบ่มที่อุณหภูมิห้อง ( 30 ( 32o C ) เป็นเวลา 48 ชั่วโมง หลังจากบ่มความเข้มข้นที่ไม่มองเห็น การเห็นก็เกิดเป็นสมาธิตามลำดับ
น้อย
การแปล กรุณารอสักครู่..