The cloning and functional expressi

The cloning and functional expression of the cyCav1 [11] and cyL
[10] subunits have previously been described. All clones were transcribed
using the T7 version of the mMessage mMachine kit (Ambion),
and the amount and purity of transcribed RNA were determined
by denaturation with glyoxal and gel electrophoresis. Oocytes
were injected with a constant amount of K1 RNA, combined either
with L subunit RNA or with an equivalent volume of water. RNA
was combined in a molar ratio of 1:3 K1 :L RNA in order to ensure
that the L subunit was present at saturating levels [6]. Oocytes were
incubated for 3^7 days; because levels of channel expression change
over time, recordings on any given day were made from oocytes in all
treatment groups. Two-electrode voltage clamp recordings were conducted
in a bath solution containing 40 mM Sr(OH)2, 40 mM Nmethylglucamine,
10 mM glucose, and 10 mM HEPES, adjusted to
pH 7.4 with methanesulfonic acid [12]. Sr2‡ was used as the charge
carrier due to its high permeance of the cyCav1 subunit [11]. All
oocytes were injected with 40 nl 100 mM BAPTA at least 1 h prior

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

โคลนและการแสดงออกของการทำงานของ cyCav1 [11] และ CYL
[10] หน่วยย่อยก่อนหน้านี้ได้รับการอธิบาย โคลนทั้งหมดถูกคัดลอกใช้รุ่น T7 ของชุด mMessage mMachine (Ambion) และจำนวนเงินและความบริสุทธิ์ของอาร์เอ็นเอคัดลอกได้รับการพิจารณาโดย denaturation กับ glyoxal และข่าวคราว ไข่ถูกฉีดมีจำนวนคงที่ของอาร์เอ็นเอ K1 รวมทั้งกับอาร์เอ็นเอL subunit หรือมีปริมาณเทียบเท่าน้ำ อาร์เอ็นเอได้รับการรวมกันในอัตราส่วน 1: 3 K1: L RNA เพื่อให้แน่ใจว่าsubunit L เป็นปัจจุบันอยู่ในระดับที่พอดิบพอดี [6] ไข่ถูกบ่มเป็นเวลา 3 ^ 7 วัน เพราะระดับของช่องการเปลี่ยนแปลงการแสดงออกในช่วงเวลาที่บันทึกในวันหนึ่งวันใดที่ทำจากไข่ในทุกกลุ่มการรักษา สองขั้วยึดบันทึกแรงดันไฟฟ้าได้ดำเนินการในการแก้ปัญหาที่มีห้องอาบน้ำ 40 มิลลิอาร์ (OH) 2, 40 มิลลิ Nmethylglucamine, กลูโคสมิลลิ 10 และ 10 มิลลิ HEPES, ปรับให้ค่าpH 7.4 ด้วยกรด methanesulfonic [12] sr2 ?? ถูกใช้เป็นค่าใช้จ่ายของผู้ให้บริการเนื่องจากการซึมผ่านสูงของหน่วยย่อย cyCav1 [11] ทั้งหมดไข่ถูกฉีด 40 NL 100 มิลลิ BAPTA อย่างน้อย 1 ชั่วโมงก่อน

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การโคลนและการแสดงออกของการทำงานของ cycav1 [ 11 ] และ CYL
[ 10 ] การศึกษาก่อนหน้านี้ได้รับการอธิบาย โคลนทั้งหมดถูกถ่ายทอด
ใช้รุ่น * * 3 ของ mmessage mmachine Kit ( ambion )
และปริมาณและความบริสุทธิ์ของ RNA และถูกกำหนดโดย (
ด้วยไกลออกซอลและเจล ไข่
ถูกฉีดด้วยจำนวนเงินที่คงที่ของ K1 อาร์เอ็นเอรวมทั้ง
กับผมซึ่งเป็น RNA หรือเทียบเท่ากับปริมาณน้ำ อาร์เอ็นเอ
อยู่รวมกันในอัตราส่วนโมล 1 : 3 K1 L RNA ในการสั่งซื้อเพื่อให้แน่ใจว่าชั้น 1
อยู่ในระดับสูง [ 6 ] oocyte )
3
7 วัน เพราะระดับช่องทางการแสดงออกเปลี่ยน
ตลอดเวลา บันทึกในวันหนึ่งวันใด ทำมาจากไข่ในกลุ่มทั้งหมด

สองขั้วหนีบบันทึกแรงดันจำนวน
ในอ่างสารละลายที่มี 40 มม. SR ( OH ) 2 nmethylglucamine 40 มม.
กลูโคส 10 มม. และ 10 มม.

ฮีเปสที่ปรับ pH 7.4 กับกรดมีเทนซัลโฟนิก [ 12 ] sr2 ‡ใช้เป็นค่าใช้จ่าย
ผู้ให้บริการเนื่องจาก permeance สูงของ cycav1 1 [ 11 ] ทั้งหมด
oocyte ฉีด 40 / 100 มิลลิเมตร bapta อย่างน้อย 1 ชั่วโมงก่อน