aPTVS177 was cultured at 37 °C for

aPTVS177 was cultured at 37 °C for 18 h on tryptic soy agar (TSA, BD
Diagnostics, Sparks MD, USA), supplemented with 80 mg/L of rifampicin
(rif, Fisher Scientific) and 1 g/L of sodium pyruvate {C3H3NaO3;(TSARP)}.
Approximately five colonies were re-suspended in 5 mL of Butterfield's
phosphate buffered saline (BPBS) (Whatman Inc. Piscataway, NJ, USA).
A total of 100 μL were spread onto TSARP and incubated for 18 h to
allow the formation of a uniform lawn of cells in early stationary
phase. Culture preparation on solid media, has been found to produce
cells with greater tolerance to acute desiccation death in model and
open environment comparisons as encountered in field conditions
(Suslow and Schroth, 1982; Wilson and Lindow, 1993; Theofel and
Harris, 2009). Cells were harvested by gently scraping the agar surface
with a sterile rubber spatula and suspended in BPBS. The resultant
bacterial suspension was centrifuged at 1500 ×g for 10 min. The pellet
waswashed twice in BPBS and re-suspended in BPBS to adjust the optical
density at 600 nm, approximately 0.750 absorbance, which corresponds
to log 9 CFU/mL. The inoculum was then diluted to the desired
concentration for field and greenhouse trials (see below). Final inoculumwas
serially diluted and plated on TSARP to determine the nominal
estimated concentration of inoculum.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

aPTVS177 เป็นอ่างที่ 37 ° C สำหรับ h 18 ในถั่วเหลือง tryptic agar (TSA, BDวินิจฉัย สปาร์ค MD สหรัฐอเมริกา), เสริม ด้วย 80 mg/L rifampicin(rif, Fisher วิทยาศาสตร์) และ 1 g/L ของโซเดียม pyruvate {C3H3NaO3;(TSARP) }ประมาณห้าอาณานิคมถูกหยุดชั่วคราวอีกครั้งใน 5 mL ของของ Butterfieldฟอสเฟต buffered น้ำเกลือ (BPBS) (Whatman Inc. ปิสกาตาเวย์ NJ สหรัฐอเมริกา)แพร่กระจายไปยัง TSARP และ incubated สำหรับ h 18 เพื่อจำนวน 100 μLทำให้การก่อตัวของสนามหญ้าเป็นรูปแบบของเซลล์ในช่วงเขียนขั้นตอนการ วัฒนธรรมเตรียมสื่อแข็ง พบในการผลิตเซลล์ มีมากกว่า desiccation เฉียบพลันตายในรูปแบบ และเปิดเปรียบเทียบสภาพแวดล้อมที่พบในเขตข้อมูลเงื่อนไข(Suslow และ Schroth, 1982 Wilson และ Lindow, 1993 Theofel และแฮริส 2009) เซลล์เก็บเกี่ยว โดยเบา ๆ scraping ผิว agarมีพายยางที่ผ่านการฆ่าเชื้อและระงับใน BPBS Resultantระงับเชื้อแบคทีเรียถูก centrifuged ที่ 1500 × g สำหรับ 10 นาที เม็ดwaswashed ใน BPBS และ BPBS ระงับอีกครั้งในการปรับแสงที่สองความหนาแน่นที่ 600 nm, absorbance ประมาณ 0.750 ซึ่งสอดคล้องระบบ 9 CFU/mL Inoculum ถูกผสมแล้วที่ต้องการความเข้มข้นสำหรับฟิลด์และเรือนกระจกทดลอง (ดูด้านล่าง) สุดท้าย inoculumwasแตกออก และชุบบน TSARP เพื่อกำหนดว่ายอม seriallyประเมินให้ความเข้มข้นของ inoculum

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

aPTVS177 เป็นที่เพาะเลี้ยงที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 18 ชั่วโมงในถั่วเหลือง tryptic วุ้น (TSA, BD
วินิจฉัยประกาย MD, USA) เสริมด้วย 80 มก. / ลิตร rifampicin
(Rif ฟิชเชอร์ทางวิทยาศาสตร์) และ 1 กรัม / ลิตรของไพรูโซเดียม {C3H3NaO3 . (TSARP)}
ประมาณห้าอาณานิคมเป็นอีกครั้งที่ลอยอยู่ใน 5 มิลลิลิตรฟีลด์ของ
น้ำเกลือฟอสเฟตบัฟเฟอร์ (BPBS) (Whatman อิงค์ Piscataway, NJ, สหรัฐอเมริกา).
รวม 100 ไมโครลิตรกระจายอยู่บน TSARP และบ่มเป็นเวลา 18 ชั่วโมงเพื่อ
อนุญาตให้มีการก่อตัวของสนามหญ้าเครื่องแบบของเซลล์ในช่วงต้นนิ่ง
เฟส เตรียมวัฒนธรรมในสื่อที่เป็นของแข็งมีการค้นพบในการผลิต
เซลล์ที่มีความอดทนมากขึ้นในการตายเฉียบพลันผึ่งให้แห้งในรูปแบบและ
การเปรียบเทียบสภาพแวดล้อมที่เปิดเป็นที่พบในสภาพสนาม
(Suslow และ Schroth 1982; วิลสันและ Lindow 1993; Theofel และ
แฮร์ริส 2009) เซลล์ที่ถูกเก็บเกี่ยวโดยค่อยๆขูดพื้นผิววุ้น
ด้วยไม้พายยางผ่านการฆ่าเชื้อและระงับใน BPBS ผล
การระงับแบคทีเรียถูกหมุนเหวี่ยงที่ 1500 ×กรัมเป็นเวลา 10 นาที เม็ด
waswashed สองครั้งใน BPBS และอีกครั้งที่ลอยอยู่ใน BPBS เพื่อปรับแสง
ความหนาแน่นที่ 600 นาโนเมตรโดยประมาณ 0.750 ดูดกลืนแสงซึ่งสอดคล้อง
เข้าสู่ระบบ 9 CFU / มิลลิลิตร เชื้อถูกเจือจางแล้วที่ต้องการ
ความเข้มข้นของสนามและการทดลองเรือนกระจก (ดูด้านล่าง) inoculumwas รอบชิงชนะเลิศ
ลำดับและปรับลดชุบ TSARP ในการกำหนดที่ระบุ
ความเข้มข้นประมาณของเชื้อ

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

aptvs177 เลี้ยงที่อุณหภูมิ 37 องศา C เป็นเวลา 18 ชั่วโมงบนอาหารวุ้นถั่วเหลืองอาหาร ( TSA BD
วินิจฉัย ประกายไฟแมรี่แลนด์ สหรัฐอเมริกา ) เสริมด้วย 80 มิลลิกรัมต่อลิตรของไรแฟมปิซิน
( Rif ฟิชเชอร์ทางวิทยาศาสตร์ ) และ 1 กรัม / ลิตรโซเดียมไพรูเวท { c3h3nao3 ; ( tsarp ) } .
ประมาณห้าอาณานิคมได้อีกครั้งแขวนลอยใน 5 มิลลิลิตรของกรดเกลือฟอสเฟต Butterfield
( bpbs ) ( whatman อิงค์ Piscataway , NJ , USA ) .
รวม 100 μผมถูกกระจายลงบน tsarp บ่ม 18 H
อนุญาตการก่อตัวของสนามหญ้าชุดของเซลล์ในช่วงต้นเครื่องเขียน
เฟส การเตรียมสื่อวัฒนธรรมแข็ง พบเพื่อผลิต
เซลล์ที่มีมากกว่าความอดทนตายส่วนเฉียบพลันในรูปแบบและสภาพแวดล้อมที่พบในการเปิด

( suslow สภาพสนามและ ชรอท , 1982 ; วิลสันและลินโดว์ , 1993 ;และ theofel
แฮร์ริส , 2009 ) เซลล์ที่ถูกเก็บเกี่ยวโดยค่อย ๆ ขูดผิววุ้น
ด้วยไม้พายยางปลอดเชื้อและแขวนลอยใน bpbs . ซึ่งเป็นระดับที่
bacterial suspension 1500 ×กรัมต่อ 10 นาทีเม็ด
waswashed สองครั้งใน bpbs และแขวนลอยใน bpbs ปรับแสง
ความหนาแน่นที่ 600 nm ประมาณ 0.750 ดูดกลืนซึ่งตรงกับ
ล็อก 9 CFU / มิลลิลิตรเชื้อก็เพื่อลดปริมาณที่ต้องการ
สนามและเรือนกระจกการทดลอง ( ดูด้านล่าง ) inoculumwas สุดท้าย
เป็นเจือจาง และชุบบน tsarp เพื่อตรวจสอบชื่อ
ประมาณความเข้มข้นของเชื้อ .