PRIMARY, SECONDARY, TERTIARY, AND Q

PRIMARY, SECONDARY, TERTIARY, AND QUATERNARY STRUCTURE.

Primary Sequence from Cloning The sequence of wild-type Aequorea GFP is given in Figure 1. Sequences of at least four other isoforms are known(19),though none of the mutations seem to be in positions known to influence protein behavior. Most cDNA constructs derived from the original sequence contain the innocuous mutation Q80R,probably resulting from a PCR error (11). Also, the gene has been resynthesized with altered codonsand improved translational initiation sequences(see section on “Promoters, Codon Usage, and Splicing”). The chromophore is a p-hydroxybenzylideneimidazolinone (10,20) formed from residues 65–67, which are Ser-Tyr-Gly in the native protein. Figure 2 shows the currently accepted mechanism (21–23) for chromophore formation. First, GFP folds into a nearly native conformation, then the imidazolinone is formed by nucleophilic attack of the amide of Gly67 on the carbonyl of residue 65, followed by dehydration. Finally, molecular oxygen dehydrogenates the α-β bond of residue 66 to put its aromatic group into conjugation with the imidazolinone. Only at this stage does the chromophore acquire visible absorbance and fluorescence. This mechanism is based on the following arguments: (a) Atmospheric oxygen is required for fluorescence to develop (21,24). (b) Fluorescence of anaerobically preformed GFP develops with a simple exponential time course after air is readmitted (21,25), which is essentially unaffected by the concentration of the GFP itself or of cellular cofactors. (c)An alogous imidazol inonesaut oxidize spontaneously(26).(d)Theproposed

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

โครงสร้างหลัก รอง ระดับมหาวิทยาลัย และ QUATERNARYลำดับหลักจากโคลนลำดับของ GFP Aequorea ป่าชนิดแสดงไว้ในรูปที่ 1 ลำดับของ isoforms น้อยสี่อื่น ๆ รู้จักกัน (19), แม้ว่าไม่มีการกลายพันธุ์ที่ดูเหมือนจะอยู่ในตำแหน่งที่เรียกว่า influence โปรตีนลักษณะการ โครงสร้าง cDNA ส่วนใหญ่ที่มาจากลำดับเดิมประกอบด้วยการ innocuous กลายพันธุ์ Q80R อาจเกิดจากความผิดพลาดของ PCR (11) ยัง ยีนได้รับ resynthesized กับ codonsand เปลี่ยนแปลงปรับปรุงเริ่มต้น translational ลำดับ (โปรดดูส่วน "ก่อ ใช้รหัสพันธุกรรม และ Splicing") Chromophore เป็นแบบ p-hydroxybenzylideneimidazolinone (10,20) เกิดจากตก 65 – 67 ซึ่ง Ser Tyr Gly ในโปรตีนดั้งเดิม รูปที่ 2 แสดงกลไกที่ยอมรับในปัจจุบัน (21-23) สำหรับก่อ chromophore ครั้งแรก GFP พับเป็น conformation ดั้งเดิมเกือบ แล้ว imidazolinone เกิดขึ้น โดยโจมตี nucleophilic ของ amide ของ Gly67 บน carbonyl ของ 65 สารตกค้างที่ตาม ด้วยการคายน้ำ สุดท้าย ออกซิเจนโมเลกุล dehydrogenates พันธะβด้วยกองทัพของตกค้าง 66 บรรจุกลุ่มของหอม conjugation ด้วย imidazolinone เฉพาะในขั้นตอนนี้ ไม่ chromophore ซื้อเห็น absorbance และ fluorescence กลไกนี้ใช้อาร์กิวเมนต์ดังต่อไปนี้: (ก) ออกซิเจนอากาศจำเป็นสำหรับ fluorescence การพัฒนา (21,24) (ข) fluorescence ของ GFP ซับ preformed anaerobically พัฒนา ด้วยหลักสูตรเวลาอย่างเอ็กซ์โพเนนเชียหลังจากอากาศ readmitted (21,25) , ซึ่งเป็นผลกระทบหลัก โดยความเข้มข้น ของ GFP เอง หรือใช้โคแฟกเตอร์โทรศัพท์มือถือ (c) การ alogous imidazol inonesaut ออก spontaneously(26) (d) Theproposed

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ประถมมัธยมตติยและ Quaternary โครงสร้าง. ลำดับหลักจากโคลนลำดับของป่าประเภท Aequorea GFP จะได้รับในรูปที่ 1 ลำดับอย่างน้อยสี่ไอโซฟอร์มอื่น ๆ ที่เป็นที่รู้จักกัน (19) แต่ไม่มีการกลายพันธุ์ดูเหมือนจะอยู่ใน ตำแหน่งที่รู้จักกันในพฤติกรรมของโปรตีน uence ชั้น ส่วนใหญ่สร้างยีนที่ได้จากลำดับเดิมมี Q80R กลายพันธุ์อันตรายที่อาจเกิดจากข้อผิดพลาด PCR (11) นอกจากนี้ยีนที่ได้รับการ resynthesized กับการเปลี่ยนแปลงที่ดีขึ้น codonsand ลำดับเริ่มต้นแปล (ดูหัวข้อ "การส่งเสริมการใช้งาน Codon และ Splicing") chromophore เป็นพี hydroxybenzylideneimidazolinone (10,20) เกิดขึ้นจากสารตกค้างที่ 65-67 ซึ่งเป็น Ser-เทอร์-Gly ในโปรตีนพื้นเมือง รูปที่ 2 แสดงให้เห็นว่ากลไกที่ยอมรับในปัจจุบัน (21-23) สำหรับ chromophore ก่อ ครั้งแรก GFP พับเป็นโครงสร้างพื้นเมืองเกือบแล้ว imidazolinone จะเกิดขึ้นจากการโจมตี nucleophilic ของเอไมด์ของ Gly67 ในคาร์บอนิลของสารตกค้างที่ 65 ตามด้วยการคายน้ำ สุดท้ายโมเลกุลออกซิเจน dehydrogenates พันธบัตรαβ-66 ที่เหลือจะนำกลุ่มที่มีกลิ่นหอมของมันเข้าไปผันกับ imidazolinone เฉพาะในขั้นตอนนี้ไม่ได้รับการดูดกลืนแสง chromophore ที่มองเห็นและ uorescence ชั้น กลไกนี้จะขึ้นอยู่กับข้อโต้แย้งดังต่อไปนี้ (ก) บรรยากาศออกซิเจนเป็นสิ่งจำเป็นสำหรับ uorescence ชั้นในการพัฒนา (21,24) (ข) การเรืองแสงของ preformed แบบไม่ใช้อากาศ GFP พัฒนากับเวลาที่แน่นอนชี้แจงง่ายหลังจากที่อากาศสิ่งสมควร (21,25) ซึ่งได้รับผลกระทบหลักโดยความเข้มข้นของ GFP ตัวเองหรือของปัจจัยโทรศัพท์มือถือ (ค) ความ imidazol alogous inonesaut ออกซิไดซ์เป็นธรรมชาติ (26). (ง) Theproposed

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ประถมศึกษา มัธยมศึกษา อุดมศึกษา และโครงสร้าง quaternary

หลักลำดับจากการลำดับของ aequorea GFP จะได้รับในรูปที่ 1 ลําดับอย่างน้อย 4 ไอโซฟอร์มอื่นๆที่เป็นที่รู้จัก ( 19 ) แม้ว่าจะไม่มีของการกลายพันธุ์ที่ดูเหมือนจะอยู่ในตำแหน่งที่รู้จักกันในfl uence โปรตีนพฤติกรรม โครงสร้างยีนส่วนใหญ่มาจากลำดับต้นมี q80r การกลายพันธุ์ไม่อันตรายอาจเป็นผลจาก PCR ข้อผิดพลาด ( 11 ) ทั้งนี้ จีนได้เริ่มต้นขึ้นด้วยการเปลี่ยนแปลง resynthesized codonsand แปลลำดับ ( ดูส่วน " โปรโมเตอร์ , การใช้งาน codon และ splicing " ) ส่วนที่มีสีเป็น p-hydroxybenzylideneimidazolinone ( , ) เกิดขึ้นจากสารตกค้าง 65 – 67 ซึ่งเป็นเซอร์ tyr GLY ในโปรตีนพื้นเมืองรูปที่ 2 แสดงการยอมรับกลไกในปัจจุบัน ( 21 – 23 ) สำหรับการพัฒนาที่มีสี แรก , GFP พับเป็นโครงสร้างดั้งเดิมเกือบแล้ว imidazolinone เกิดจากการโจมตี nucleophilic ของเอไมด์ของ gly67 กับคาร์บอนิลของกาก 65 , ตามด้วยการขาดน้ำ ในที่สุดโมเลกุลออกซิเจน dehydrogenates ที่แอลฟาบีตาพันธบัตรของกาก 66 ใส่หอมของมันเข้าไปในกลุ่ม ) กับ imidazolinone . แต่ในขั้นตอนนี้จะได้รับค่าflที่มีสีที่มองเห็นและ uorescence . กลไกนี้จะขึ้นอยู่กับเหตุผลดังต่อไปนี้ ( ก ) บรรยากาศมีออกซิเจนเป็นสิ่งจำเป็นสำหรับfl uorescence พัฒนา ( 21,24 )( ข ) การเรืองแสงของ GFP พ preformed พัฒนากับหลักสูตรเวลาแบบเลขชี้กำลังง่ายหลังจากที่อากาศคือการผูกประโยค ( 21,25 ) ซึ่งเป็นหลักไม่ได้รับผลกระทบ โดยความเข้มข้นของ GFP เองหรือปัจจัยของเซลล์ ( C ) inonesaut imidazol alogous ออกซิไดซ์เอง ( 26 ) ( D ) จริง