2.8. Preparation of cell free super

2.8. Preparation of cell free supernatant and well diffusion method
In order to obtain cell free supernatants (CFS), each LAB strain was cultivated in MRS broth at 37
C for 24 h with 5% CO2. CFS were obtained by centrifuging the cultures at 8078 g in the cold (4
C) for 20 min followed by exposure to chloroform for 20 min. In order to eliminate the inhibitory effects attributed to the organic acids, these fractions with biological activity were neutralized by the addition of 1 mol l1 sodium hydroxide. All strains that showed antilisterial activity were tested by the well diffusion assay. TSAwas first shown with the indicator organisms and then wells of 8mm of diameter were made. Then, 100 ml of CFS and neutralized CFS from each LAB were poured into different wells. The diameters of inhibition zones around each well were measured after incubation at 37
C for 24 h with 5% CO2. All the experiments were carried out in
duplicate (Ruíz et al., 2012).

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.8 การเตรียมเซลล์ฟรี supernatant และด้วยวิธีการแพร่เพื่อให้ได้เซลล์ฟรี supernatants (CFS), ต้องใช้ห้องปฏิบัติการแต่ละถูกปลูกในซุป MRS ที่ 37 C ใน 24 ชมกับ 5% CO2 CFS ได้รับ โดย centrifuging วัฒนธรรมที่ g 8078 ในเย็น (4 C) สำหรับ 20 นาทีตาม ด้วยการสัมผัสกับ chloroform สำหรับ 20 นาที เพื่อกำจัดผลลิปกลอสไขเกิดจากการกรดอินทรีย์ เศษเหล่านี้กับกิจกรรมชีวภาพถูก neutralized ด้านนอก 1 โมล l 1 โซเดียมไฮดรอกไซด์ สายพันธุ์ทั้งหมดที่พบกิจกรรม antilisterial ถูกทดสอบ โดยทดสอบดีแพร่ TSAwas ก่อน แสดงกับตัวบ่งชี้ ชีวิต แล้วบ่อของเส้นผ่าศูนย์กลาง 8 มม.ทำ แล้ว 100 มล CFS และ CFS neutralized จากห้องปฏิบัติการแต่ละถูก poured ไปยังบ่ออื่น ปัจจุบันโซนยับยั้งรอบดีแต่ละที่วัดหลังจากบ่มที่ 37 C ใน 24 ชมกับ 5% CO2 ทดลองทั้งหมดได้ดำเนินการซ้ำ (Ruíz et al., 2012)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.8 การเตรียมสารละลายมือถือฟรีและวิธีการแพร่กระจายอย่างดี
เพื่อให้ได้ supernatants มือถือฟรี (CFS) สายพันธุ์ LAB แต่ละคนถูกปลูกในอาหาร MRS broth ที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 24 ชั่วโมงด้วย CO2 5% CFS ที่ได้จากการปั่นแยกวัฒนธรรมที่ 8078? กรัมในเย็น (4 องศาเซลเซียส) เป็นเวลา 20 นาทีตามด้วยการสัมผัสกับคลอโรฟอร์มเป็นเวลา 20 นาที เพื่อที่จะกำจัดการยับยั้งประกอบกับกรดอินทรีย์เศษส่วนเหล่านี้กับกิจกรรมทางชีวภาพถูกลบล้างโดยนอกเหนือจาก 1 โมลต่อลิตร 1 โซดาไฟ ทุกสายพันธุ์ที่แสดงให้เห็นกิจกรรม antilisterial ถูกทดสอบด้วยวิธีการแพร่กระจายได้ดี TSAwas แสดงครั้งแรกกับชีวิตตัวบ่งชี้และจากนั้นหลุม 8mm เส้นผ่าศูนย์กลางได้ทำ จากนั้น 100 มิลลิลิตรและ CFS CFS เป็นกลางจากแต่ละ LAB ถูกเทลงไปในหลุมที่แตกต่างกัน เส้นผ่าศูนย์กลางของโซนยับยั้งรอบดีแต่ละวัดหลังจากบ่มที่อุณหภูมิ 37? C เป็นเวลา 24 ชั่วโมงด้วย CO2 5% การทดสอบทั้งหมดได้ดำเนินการใน
ที่ซ้ำกัน (Ruíz et al., 2012)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.8 . เตรียมนำมือถือฟรีและวิธีการกระจาย
เพื่อให้ได้เซลล์ supernatants ฟรี ( CFS ) แต่ละ Lab สายพันธุ์ปลูกใน MRS broth ที่ 37 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 24 ชั่วโมง
คาร์บอนไดออกไซด์ 5% โฆษณาที่ได้รับจากสารวัฒนธรรมที่ 8078  กรัมในที่เย็น ( 4
องศาเซลเซียส นาน 20 นาที ตามด้วยการเข้าไปตั้ง 20 นาที2.8 . เตรียมนำมือถือฟรีและวิธีการกระจาย
เพื่อให้ได้เซลล์ supernatants ฟรี ( CFS ) แต่ละ Lab สายพันธุ์ปลูกใน MRS broth ที่ 37 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 24 ชั่วโมง
คาร์บอนไดออกไซด์ 5% โฆษณาที่ได้รับจากสารวัฒนธรรมที่ 8078  กรัมในที่เย็น ( 4
องศาเซลเซียส นาน 20 นาที ตามด้วยการเข้าไปตั้ง 20 นาที100 มิลลิลิตรของ CFS และถอนพิษโฆษณาจากแต่ละ Lab ถูกเทลงไปในบ่อที่แตกต่างกัน ขนาดเส้นผ่านศูนย์กลางของการยับยั้งโซนแต่ละรอบก็ถูกวัดหลังจากบ่มที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียส เป็นเวลา 24 ชั่วโมง
คาร์บอนไดออกไซด์ 5% การทดลองทั้งหมดถูกกวาดออกไปใน
ซ้ำ ( RU í z et al . , 2012 )เพื่อลดผลการยับยั้งเกิดจากกรดอินทรีย์ เศษส่วนเหล่านี้กับฤทธิ์ทางชีวภาพเป็น neutralized โดยนอกเหนือจาก 1 โมล ผม  1 โซเดียม ไฮดรอกไซด์ ทุกสายพันธุ์ที่พบกิจกรรม antilisterial ทดสอบโดยดีกระจายการทดสอบ tsawas ก่อนแสดงด้วยตัวบ่งชี้สิ่งมีชีวิตแล้วบ่อขนาด 8mm ของถูกสร้างขึ้น จากนั้น