CuSO4 (6 lM), the indicated concent

CuSO4 (6 lM), the indicated concentrations of sulfur compound, ethanol (10 mM), ddH2O, MOPS (10 mM), NaCl (130 mM), and ascorbic acid (7.5 lM) at pH 7 were allowed to stand for 5 min at room temperature. Plasmid (pBSSK, 0.1 pmol in 130 mM NaCl) was added to the reaction mixture and allowed to stand for an additional 5 min. The reaction was then initiated by the addition of H2O2 (50 lM). After 30 min, EDTA (50 lM) quenched the reaction. For CuðbipyÞII2 gel electrophoresis studies, CuðbipyÞII2 (50 lM) was used in place of CuSO4, and the concentration of ascorbic acid was increased to 62.5 lM. For experiments with iron, FeSO4 (2 lM) and MES (10 mM, pH 6) was substituted for the CuSO4, ascorbic acid, and MOPS; the pH was decreased due to the insolubility of iron at pH 7. All FeII solutions were freshly prepared and used immediately as previously reported [58]. All concentrations indicated are final concentrations in a 10 lL volume. For FeII experiments with GSSG and GSH, the final MES buffer concentration was increased to 100 mM (pH 6) for 10,000 lM GSSG/GSH.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

CuSO4 (6 lM), การระบุความเข้มข้นของสารประกอบกำมะถัน เอทานอล (10 mM), ddH2O, MOPS (10 mM), NaCl (130 มิลลิเมตร), และกรดแอสคอร์บิค (7.5 lM) ที่ pH 7 ที่อนุญาตให้ยืนใน 5 นาทีที่อุณหภูมิห้อง Plasmid (pBSSK, pmol 0.1 ใน 130 มม. NaCl) ถูกเพิ่มลงในส่วนผสมของปฏิกิริยา และอนุญาตให้ยืนใน 5 นาทีเพิ่มเติม แล้วเริ่มปฏิกิริยา โดยเพิ่ม H2O2 (50 lM) หลังจาก 30 นาที EDTA (50 lM) quenched ปฏิกิริยา สำหรับ CuðbipyÞII2 เจ electrophoresis ศึกษา CuðbipyÞII2 (50 lM) ถูกใช้ CuSO4 และความเข้มข้นของกรดแอสคอร์บิคขึ้นไป 62.5 lM สำหรับการทดลองกับเหล็ก FeSO4 (2 lM) และ MES (10 mM, pH 6) ถูกแทน CuSO4 กรดแอสคอร์บิค และ MOPS pH ลดลงเนื่องจาก insolubility ของเหล็กที่ pH 7 โซลูชั่น FeII ทั้งหมดถูกลิ้ม และใช้ทันทีก่อนหน้านี้รายงาน [58] ระบุความเข้มข้นทั้งหมดมีความเข้มข้นสุดท้ายในไดรฟ์ข้อมูลจะ 10 สำหรับการทดลอง FeII GSSG กับ GSH สุดท้าย MES บัฟเฟอร์ความเข้มข้นขึ้นไป 100 มม. (pH 6) สำหรับ 10000 lM GSSG/GSH

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

CuSO 4 (6 LM) ความเข้มข้นระบุสารประกอบกำมะถันเอทานอล (10 มิลลิเมตร) ddH2O, MOPS (10 มิลลิเมตร) โซเดียมคลอไรด์ (130 มิลลิเมตร) และวิตามินซี (7.5 LM) ที่ pH 7 ได้รับอนุญาตให้ยืนเป็นเวลา 5 นาที ที่อุณหภูมิห้อง พลาสมิด (pBSSK 0.1 pmol ใน 130 มิลลิโซเดียมคลอไรด์) ได้ถูกเพิ่มเข้าไปผสมปฏิกิริยาและอนุญาตให้ยืนสำหรับอีก 5 นาที ปฏิกิริยาจากนั้นได้เริ่มขึ้นโดยการเติม H2O2 นี้ (50 LM) หลังจาก 30 นาที, EDTA (50 LM) ดับปฏิกิริยา สำหรับCuðbipyÞII2ศึกษาข่าวคราว, CuðbipyÞII2 (50 LM) ถูกนำมาใช้ในสถานที่ของ CuSO 4, และความเข้มข้นของวิตามินซีเพิ่มขึ้นเป็น 62.5 การ lm สำหรับการทดลองกับเหล็ก FeSO4 (2 LM) และ mes (10 มิลลิพีเอช 6) ถูกสับเปลี่ยนสำหรับ CuSO 4, วิตามินซีและ MOPS; ค่าพีเอชลดลงเนื่องจากการที่แก้ไม่ตกของธาตุเหล็กที่ pH 7. การแก้ปัญหาทั้งหมด FeII ถูกปรุงสดใหม่และใช้งานได้ทันทีในขณะที่รายงานก่อนหน้านี้ [58] ทุกความเข้มข้นที่ระบุมีความเข้มข้นสุดท้ายในปริมาณ LL 10 สำหรับการทดลอง FeII กับ GSSG GSH และความเข้มข้นของบัฟเฟอร์ MES สุดท้ายเพิ่มขึ้นเป็น 100 มิลลิ (pH 6) 10,000 LM GSSG / GSH

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

CuSO4 ( LM ) 6 ) , ความเข้มข้นของกำมะถันผสมเอทานอล ( 10 มม. ) , ddh2o , mops ( 10 มม. ) , เกลือ ( 130 มิลลิเมตร ) และกรดแอสคอร์บิค ( 7.5 LM ) ที่ pH 7 ได้รับอนุญาตให้ยืนสำหรับ 5 นาทีที่อุณหภูมิห้อง พลาสมิด ( pbssk 0.1 pmol ใน 130 mM NaCl ) คือการเพิ่มปฏิกิริยาผสมและอนุญาตให้ยืนสำหรับอีก 5 นาที ปฏิกิริยาก็เริ่มโดยการเพิ่มของ H2O2 ( 50 กล. )หลังจาก 30 นาที , EDTA ( 50 กล. ) ดับการเกิดปฏิกิริยา ใช้ð bipy Þ ii2 gel electrophoresis ศึกษา จุฬาฯ ð bipy Þ ii2 ( 50 กล. ) ถูกนำมาใช้ในสถานที่ของ CuSO4 และความเข้มข้นของกรดแอสคอร์บิคเพิ่มขึ้นเป็น 62.5 ไมโครเมตร สำหรับการทดลองกับเหล็ก feso4 ( LM ) และเดือน ( อืม พีเอช 6 10 ) คือแทน CuSO4 , กรดแอสคอร์บิค และ mops ; พีเอชลดลงเนื่องจากมีกรดเมตาของเหล็กที่ pH 7โซลูชั่นก็มีการเตรียมสด และใช้ทันทีเป็นก่อนหน้านี้รายงาน [ 58 ] ทั้งหมด พบมีความเข้มข้นในปริมาณความเข้มข้นสุดท้าย 10 จะ สำหรับการทดลองกับ gssg หลงและ GSH , สุดท้ายเราบัฟเฟอร์ความเข้มข้นเพิ่มขึ้นเป็น 100 mm ( pH 6 ) 10 , 000 LM gssg / 10 .