2. Material and methods2.1. Experim

2. Material and methods
2.1. Experimental systems and fish

Two days-post-hatch (dph, 4.4 ± 0.28 mm) cobia larvae, derived from the same batch of eggs, were obtained from the University of Miami, Rosenstiel School of Marine and Atmospheric Science. Larvae were randomly stocked at 10 larvae L− 1 into one of two replicated systems comprising three 300 L tanks (n = 3). The design and operating characteristics of the rearing system were identical to that described previously(Salze et al., 2008). Water quality parameters (total ammonia nitrogen, NO2N, NO3N, dissolved oxygen, temperature, salinity, pH, and alkalinity) were measured as described in (Salze et al., 2011) and were all well within suitable range for cobia larvae.

2.2. Feeds and feeding

The feeding protocol followed that previously described by Salze et al. (2008). Briefly, green water (approx. 120,000 cells mL− 1Nannocloropsis sp. algal paste, Reed Mariculture, Campbell CA) and L-type rotifers (Brachionus plicatilis, 1.5-2.5 rotifer mL− 1) were fed until 8 dph at which point only Artemia was offered (1–2.5 nauplii mL− 1). The level of eicosapentaenoic acid (EPA; 20:5n-3) in the algae was 30% dry weight. Live feeds included enriched rotifers, non-enriched, small-sized (∼ 430 μm) high HUFA profile AF-Artemia nauplii (15 mg HUFA g− 1 dry weight), and enriched EG-Artemia nauplii (INVE Inc., Salt Lake City, UT). Rotifers were enriched with DC DHA Selco (INVE Inc., Salt Lake City, UT) at 0.4 g L− 1. Similarly, EG Artemia were enriched for 24 hours with DC DHA Selco at 0.6 g L− 1. Live prey was offered every 6 h following complete clearing of the tank between feedings. Co-feeding of larvae with Otohime weaning feeds (51% crude protein, 11% lipid; manufacturer's analysis, Reed Mariculture, Campbell, CA) commenced at 15 dph, with 100% artificial diets being offered from 25 dph after a 3-day weaning period. The dry food was distributed every hour using automated shaking feeders (AF6 feeders, DFT3R8AC timer, Sweeney Feeders, Boerne, TX). The taurine-enriched live prey were delivered according to the same schedule and prepared in a similar manner: rotifers were enriched with 0.4 g L− 1 day− 1 of DHA Selco with the addition of 4 g L− 1 day− 1 of taurine, while Artemia enrichment consisted in 0.6 g L− 1 of DHA Selco and 4 g L− 1 of taurine per day.

2.3. Sampling and biochemical analyses

Samples were collected after dietary change (i.e. 3, 8, 10, 13, 16, 22, and 27 dph, see Fig. 1). Larvae were randomly netted from each tank (20 larvae per tank until 16 dph, 5 larvae per tank subsequently). Larvae were rinsed with distilled water in order to remove salt, blotted dry and their length was recorded prior to storage in Eppendorf tubes which were frozen at − 80 °C until analyses. After completion of the weaning process, weanlings were counted, bulk-weighed and measured to determine final production.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2. วัสดุและวิธีการ2.1 การทดลองระบบและปลาสองวันโพสต์ฟัก (ดีพีเอช 4.4 ± 0.28 mm) ตัวอ่อนปลาช่อนทะเล มาจากชุดเดียวกันของไข่ รับจากมหาวิทยาลัยของไมอามี่ Rosenstiel โรงเรียนของทะเล และบรรยากาศวิทยาศาสตร์ ตัวอ่อนถูกสุ่มเก็บสต็อกที่อ่อน 10 L− 1 ในสองระบบที่จำลองแบบแล้วประกอบด้วยสาม 300 L รถถังอย่างใดอย่างหนึ่ง (n = 3) การออกแบบและลักษณะของระบบการเลี้ยงในการทำงานได้เหมือนกับที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ (Salze et al. 2008) พารามิเตอร์คุณภาพน้ำ (แอมโมเนียรวมไนโตรเจน NO2N, NO3N ออกซิเจนละลาย อุณหภูมิ ความเค็ม ค่า pH และสภาพด่าง) ถูกวัดตามที่อธิบายไว้ใน (Salze et al. 2011) และได้ดีในช่วงที่เหมาะสมสำหรับปลาช่อนทะเลตัวอ่อน2.2. ตัวดึงข้อมูล และการให้อาหารโพรโทคอลให้อาหารตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ โดย Salze et al. (2008) สั้น ๆ น้ำเขียว (ประมาณ 120,000 เซลล์ mL− 1Nannocloropsis เอสพีสาหร่ายวาง Reed Mariculture, Campbell CA) และประเภท L rotifers (Brachionus plicatilis, mL− โรติเฟอร์ 1.5-2.5 1) ถูกเลี้ยงดูจนกว่าดีพีเอช 8 ซึ่งชี้เฉพาะ Artemia เสนอ (1 – 2.5 ประกอบกิจการ mL− 1) ระดับของกรด eicosapentaenoic (EPA; 20:5n-3) ในสาหร่ายเป็น 30% น้ำหนักแห้ง ตัวดึงข้อมูลสดรวมอุดม rotifers ไม่ใช่อุดม ขนาดเล็ก (เดือน 430 ไมครอน) ประกอบกิจการ HUFA โปรไฟล์ AF Artemia สูง (15 มิลลิกรัม HUFA g− 1 แห้งน้ำหนัก), และประกอบกิจการ EG Artemia อุดม (INVE Inc. ซอลต์เลกซิตี UT) Rotifers ที่อุดม ด้วย DC Selco DHA (INVE Inc. ซอลต์เลกซิตี UT) ที่ 0.4 g L− 1 ในทำนองเดียวกัน EG Artemia ที่อุดมด้วย DC DHA Selco ละ 0.6 g L− 1 24 ชั่วโมง เหยื่อสดเสนอทุก 6 ชม.ต่อสำนักหักบัญชีที่สมบูรณ์ของรถถังระหว่าง feedings ร่วมให้อาหารของตัวอ่อนกับ Otohime ถอดตัวดึงข้อมูล (51% โปรตีน ไขมัน 11% การวิเคราะห์ของผู้ผลิต Reed Mariculture, Campbell, CA) เริ่มที่ 15 ดีพีเอช ด้วยอาหารเทียม 100% ที่มีการเสนอจากดีพีเอช 25 หลังจากถอดระยะเวลา 3 วัน อาหารแห้งมีกระจายทุกชั่วโมงที่ใช้อัตโนมัติสั่นชาม (ชาม AF6 จับเวลา DFT3R8AC, Boerne, TX ชาม Sweeney) ส่งตามกำหนดเวลาเดียวกัน และจัดทำในลักษณะคล้ายเหยื่อสดอุดม taurine: rotifers ที่อุดม ด้วย 0.4 g L− 1 day− 1 Selco DHA จาก 4 g L− 1 day− 1 ของ taurine ขณะ Artemia ตกแต่งประกอบใน L− 1 DHA Selco 0.6 g และ 4 g L− 1 ของ taurine ต่อวัน2.3 วิเคราะห์ตัวอย่าง และชีวเคมีตัวอย่างที่ถูกเก็บรวบรวมหลังจากการเปลี่ยนอาหาร (เช่น 3, 8, 10, 13, 16, 22 และดีพี เอช 27 ดูรูปที่ 1) ตัวอ่อนจะถูกสุ่มยิงจากแต่ละถัง (20 ตัวต่อถังจนถึง 16 ดีพีเอช) ตัวอ่อน 5 ต่อถังต่อมา ตัวอ่อนจะถูกล้าง ด้วยน้ำกลั่นเพื่อที่จะเอาแห้งเกลือ blotted และความยาวถูกบันทึกก่อนเก็บในหลอด Eppendorf ซึ่งถูกแช่แข็งที่− 80 ° C จนกว่าจะวิเคราะห์ หลังจากเสร็จสิ้นกระบวนการถอด weanlings นับ ชั่ง น้ำหนักจำนวนมาก และวัดเพื่อตรวจสอบการผลิตขั้นสุดท้าย

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2. วัสดุและวิธีการ
2.1 ระบบการทดลองและปลาสองวันหลังฟัก (DPH 4.4 ± 0.28 มิลลิเมตร) ตัวอ่อนปลาช่อนทะเลมาจากชุดเดียวกันของไข่ที่ได้รับจากมหาวิทยาลัยไมอามี่, Rosenstiel โรงเรียนทางทะเลและบรรยากาศวิทยาศาสตร์ การเก็บรักษาตัวอ่อนที่ถูกสุ่ม 10 ตัวอ่อน L- 1 เป็นหนึ่งในสองระบบจำลองแบบประกอบไปด้วยสามถัง 300 ลิตร (n = 3) การออกแบบและการดำเนินงานในลักษณะของระบบการเลี้ยงที่ถูกเหมือนกับที่อธิบายไว้ก่อนหน้า (Salze et al., 2008) พารามิเตอร์ที่มีคุณภาพน้ำ (แอมโมเนียไนโตรเจนรวม NO2N, NO3N ออกซิเจนละลายอุณหภูมิความเค็ม pH และด่าง) วัดตามที่อธิบายไว้ใน (Salze et al., 2011) และมีความดีอยู่ในช่วงที่เหมาะสมสำหรับตัวอ่อนของปลาช่อนทะเล. 2.2 ฟีดและการให้อาหารโปรโตคอลการให้อาหารตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้โดย Salze et al, (2008) สั้น ๆ , น้ำสีเขียว. (ประมาณ 120,000 เซลล์ mL- 1Nannocloropsis Sp. วางสาหร่ายกก Mariculture แคมป์เบล CA) และ L-type โรติเฟอร์ (Brachionus plicatilis, 1.5-2.5 โรติเฟอร์ mL- 1) ได้รับการเลี้ยงดูจนถึงวันที่ 8 DPH จุดที่อาร์ทีเมียเท่านั้น ถูกเสนอ (1-2.5 ทีเมีย mL- 1) ระดับของกรด eicosapentaenoic (EPA; 20: 5n-3) ในสาหร่ายเป็นน้ำหนักแห้ง 30% ฟีดข้อมูลสดรวมถึงโรติเฟอร์อุดม, ไม่ใช่ผสานขนาดเล็ก (~ 430 ไมครอน) รายละเอียด HUFA สูง AF-อาร์ทีเมียทีเมีย (15 มิลลิกรัม HUFA G- น้ำหนักแห้ง 1) และอุดม EG-อาร์ทีเมียทีเมีย (Inve อิงค์, ซอลต์เลกซิตี , ยูทาห์) โรติเฟอร์ถูกอุดมไปด้วยซี DHA Selco (Inve อิงค์ Salt Lake City, UT) ที่ 0.4 กรัม L- 1. ในทำนองเดียวกัน, EG อาร์ทีเมียอุดมตลอด 24 ชั่วโมงพร้อม DC DHA Selco ที่ 0.6 กรัม L- 1. เหยื่อสดถูกนำเสนอทุก 6 ชั่วโมงต่อไปนี้การล้างสมบูรณ์ของถังระหว่างการให้นม ร่วมกินอาหารของตัวอ่อนกับ Otohime หย่านมฟีด (โปรตีน 51%, 11% ไขมันวิเคราะห์ผู้ผลิตกก Mariculture แคมป์เบล, CA) เริ่มที่ 15 DPH กับอาหารเทียม 100% ถูกนำเสนอจาก 25 DPH หลังจากหย่านม 3 วัน ระยะเวลา อาหารแห้งกระจายทุกชั่วโมงโดยใช้เครื่องให้อาหารอัตโนมัติสั่น (ป้อน AF6 จับเวลา DFT3R8AC สวีนีย์พ้อ, โบเออเน, เท็กซัส) ทอรีนที่อุดมด้วยเหยื่อสดถูกส่งตามตารางเวลาเดียวกันและจัดทำในลักษณะที่คล้ายกัน: โรติเฟอร์ถูกอุดมไปด้วย 0.4 กรัม 1 L- day- 1 ของ DHA Selco ด้วยนอกเหนือจาก 4 กรัม L- 1 day- 1 ของทอรีนที่ ในขณะที่การเพิ่มปริมาณอาร์ทีเมียประกอบด้วย 0.6 กรัม L- 1 ของ DHA Selco และ 4 กรัม L- 1 ของทอรีนต่อวัน. 2.3 การสุ่มตัวอย่างและการวิเคราะห์ทางชีวเคมีเก็บตัวอย่างหลังการเปลี่ยนแปลงการบริโภคอาหาร (เช่น 3, 8, 10, 13, 16, 22, และ 27 DPH ดูรูป. 1) ตัวอ่อนถูกตาข่ายสุ่มจากแต่ละถัง (20 ตัวอ่อนต่อถังจนถึงวันที่ 16 DPH 5 ตัวอ่อนต่อถังต่อมา) ตัวอ่อนถูกล้างด้วยน้ำกลั่นเพื่อที่จะเอาเกลือเปื้อนแห้งและยาวของพวกเขาถูกบันทึกไว้ก่อนที่จะมีการจัดเก็บในหลอด Eppendorf ซึ่งถูกแช่แข็งที่ - 80 ° C จนการวิเคราะห์ หลังจากเสร็จสิ้นขั้นตอนการหย่าที่ weanlings นับเป็นกลุ่มชั่งน้ำหนักและวัดเพื่อตรวจสอบการผลิตขั้นสุดท้าย

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2 . วัสดุและวิธีการ2.1 . ระบบทดลองและปลาสองวันหลังฟัก ( Inc 4.4 รึเปล่า ±  0.28 มม. ) ปลาช่อนทะเลตัวอ่อน ได้มาจากชุดเดียวกันของไข่ที่ได้จากมหาวิทยาลัยไมอามี่ โรเซินสติลโรงเรียนวิทยาศาสตร์ทางทะเลและอากาศ หนอนสุ่ม stocked ที่ 10 ( L −  1 เป็นหนึ่งในสองแบบ ระบบประกอบด้วยสาม 300 รึเปล่าฉันรถถัง ( รึเปล่า = ครั้งที่ 3 ) การออกแบบและคุณลักษณะการทำงานของระบบการเลี้ยงได้เหมือนกับที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ ( salze et al . , 2008 ) พารามิเตอร์คุณภาพน้ำ ( ไนโตรเจน แอมโมเนียรวม no2n no3n , ออกซิเจน , อุณหภูมิ , ความเค็ม ความเป็นกรดและด่าง ) และวัดตามที่อธิบายไว้ใน ( salze et al . , 2011 ) และเป็นอย่างดีเหมาะสำหรับปลาช่อนทะเลในช่วงตัวอ่อน2.2 . อาหารและการให้อาหารสัตว์การให้อาหารตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้า โดยพิธีสาร salze et al . ( 2008 ) สั้น ๆ , น้ำเขียว ( ประมาณ 120 , 000    ml −  1nannocloropsis sp . TISTR เซลล์วาง รีด การเลี้ยงสัตว์ทะเลแคมป์เบล , CA ) และ l-type โรติเฟอร์ ( น้ํา plicatilis 89 ,  โรติเฟอร์ไหม−  1 มิลลิลิตร ) ได้รับถึง 8 Inc ซึ่งเป็นจุดเดียวคือ ให้อาร์ทีเมีย ( 1 – 2.5 รึเปล่า nauplii รึเปล่า−  1 มิลลิลิตร ) ระดับของกรด eicosapentaenoic ( EPA ; 20:5n-3 ) ในสาหร่ายมีน้ำหนัก 30% รวมภาพสดอุดมด้วยโรติเฟอร์ , ไม่อุดมสมบูรณ์ , ขนาดเล็ก ( ∼  430  μ M ) nauplii HUFA สูงโปรไฟล์ AF อาร์ทีเมีย ( 15 มิลลิกรัมต่อ−  HUFA ไหมไหมไหมน้ำหนักแห้ง ) และอุดมสมบูรณ์ เช่น อาร์ทีเมีย nauplii ( ที่ปรึกษาด้านอิงค์ , Salt Lake City , ยูทาห์ ) โรติเฟอร์เป็นอุดมไปด้วย DHA selco DC ( ที่ปรึกษาด้านอิงค์ , Salt Lake City , ยูทาห์ ) 0.4 กรัมรึเปล่าผม− ครั้งที่ 1 ในทำนองเดียวกัน เช่น อาร์ทีเมียเป็นอุดมเป็นเวลา 24 ชั่วโมงกับ DC DHA selco ที่ 0.6  กรัมรึเปล่าผม−  1 เหยื่อสดเสนอทุก H ไหม 6 ต่อไปนี้การสมบูรณ์ของถังระหว่าง feedings . อาหารของหนอนกับโอโตะฮิเมะโคระยะหลังหย่านม ( 51 % โปรตีน 11 % ไขมัน การวิเคราะห์ รีด การเลี้ยงสัตว์ทะเลแคมป์เบล , CA , Inc ผู้ผลิต ) เริ่มต้นที่ 15 , 100 % ประดิษฐ์อาหารถูกเสนอเมื่อ 25 Inc หลังจาก 3 วันหย่านม . อาหารบริการกระจายอยู่ทุกชั่วโมงโดยอัตโนมัติสั่น feeders ( เพลงรวม dft3r8ac feeders , จับเวลา , สวีนีย์ feeders , โบเออเน , TX ) ที่ไม่อุดมสดยิงถูกส่งตามตารางเดียวกันและที่เตรียมไว้ในลักษณะที่คล้ายกัน : โรติเฟอร์เป็นอุดมด้วย 0.4 กรัมรึเปล่าผม−  1   วัน−  1 ของ DHA selco ด้วยนอกเหนือจาก 4  กรัมรึเปล่าผม−  1 รึเปล่า วัน−  1 ของเทารีน ในขณะที่จำนวน 0.6 กรัม อาร์ทีเมียเสริมใน  ผม−  1 selco DHA และ 4  กรัมรึเปล่าผม−  1 นต่อวัน2.3 การสุ่มตัวอย่างและการวิเคราะห์ทางชีวเคมีตัวอย่างหลังจากเปลี่ยนใยอาหาร ( เช่น 3 , 8 , 10 , 13 , 16 , 22 และ 27 Inc , เห็นรูปไหม ( 1 ) หนอนสุ่มตาข่ายจากแต่ละถัง ( 20 ตัวต่อถังจนกว่า 16 Inc , 5 ตัวต่อถังภายหลัง ) ตัวอ่อนที่ถูกล้างด้วยน้ำกลั่นเพื่อเอาเกลือเปื้อนแห้งและความยาวของพวกเขาถูกบันทึกไว้ก่อนที่จะจัดเก็บในเพนดอร์ฟหลอดซึ่งถูกแช่แข็งที่−  80  ° C จนวิเคราะห์ข้อมูล หลังจากเสร็จจากหย่านมกระบวนการ weanlings ถูกนับกลุ่มชั่งน้ำหนักและวัดเพื่อตรวจสอบการผลิตขั้นสุดท้าย