Then the residues were suspended in 10% (v/v) butyl alcohol to remove fat at a sample/solution ratio of 1:10 (w/v) for 36 h with a change of solution every 12 h. After being fully washed with cold distilled water, the residues were extracted with 0.5 M acetic acid containing 0.1% (w/v) pepsin at a sample/solution ratio of 1:10 (w/v) for 3 days. The suspension was then centrifuged at 12,500g for 40 min at 4 _C using an Avanti J-E centrifuge (Beckman Coulter, Inc., Indianapolis, IN, USA), and the supernatant was salted-out by adding NaCl to a final concentration of 2.0 M. The resultant precipitate was collected by centrifugation at 12,500g for 40 min at 4 _C and then dissolved in 0.5 M acetic acid at a sample/solution ratio of 1:10 (w/v). The resulting solution was salted-out again with NaCl at a final concentration of 2.0 M, and the precipitate was collected and redissolved in 0.5 M acetic acid under the same conditions employed above. The final solution was dialysed against cold distilled water using a dialysis bag with a nominal manufacturer’s specified MW cut-off of 7 kDa (Shanghai Green Bird Science and Technology Development Co., Shanghai, China) and then lyophilized using the Labconco freeze dryer (Labconco Corp., Kansas, MO, USA). The yield was calculated on the basis of the wet weight of the fins and bones, respectively. The procedures for extraction of PSC from the scales (0.5 kg) were slightly different in that the times for decalcification was shorten to 3 days, and the step for removing fat was omitted.
แล้วตกค้างที่ถูกระงับใน 10% (v / v) butyl เครื่องดื่มแอลกอฮอล์เพื่อเอาไขมันที่อัตราตัวอย่าง / แก้ปัญหาของ 1:10 (w / v) 36 ชั่วโมงกับการเปลี่ยนแปลงของการแก้ปัญหาทุก 12 ชั่วโมง หลังจากได้รับการล้างอย่างเต็มที่ด้วยน้ำกลั่นเย็นตกค้างถูกสกัดด้วย 0.5 M กรดอะซิติกที่มี 0.1% (w / v) น้ำย่อยในอัตราส่วนตัวอย่าง / แก้ปัญหาของ 1:10 (w / v) เป็นเวลา 3 วัน ระงับถูกปั่นแล้วที่ 12,500g 40 นาทีที่ 4 _C ใช้ centrifuge Avanti JE (Beckman Coulter, Inc, อินเดียนาโพลิส, IN, USA) และสารละลายที่เค็มออกโดยการเพิ่มโซเดียมคลอไรด์ที่ความเข้มข้นสุดท้ายของ 2.0 M . ตะกอนผลลัพธ์เป็นที่เก็บรวบรวมโดยการหมุนเหวี่ยงที่ 12,500g 40 นาทีที่ 4 _C แล้วละลายใน 0.5 M กรดอะซิติกในอัตราส่วนตัวอย่าง / แก้ปัญหาของ 1:10 (w / v) การแก้ปัญหาที่เกิดขึ้นได้รับการเค็มออกอีกครั้งกับโซเดียมคลอไรด์ที่ความเข้มข้นสุดท้ายของ 2.0 M และตะกอนที่ถูกเก็บรวบรวมและ redissolved ใน 0.5 M กรดอะซิติกภายใต้เงื่อนไขเดียวกันที่ใช้ดังกล่าวข้างต้น ทางออกสุดท้ายคือไตกับน้ำกลั่นเย็นโดยใช้ถุงฟอกไตที่มีผู้ผลิตน้อยของที่ระบุเมกะวัตต์ตัดจาก 7 กิโลดาลตัน (เซี่ยงไฮ้นกสีเขียวพัฒนาวิทยาศาสตร์และเทคโนโลยี จำกัด เซี่ยงไฮ้ประเทศจีน) และจากนั้นแห้งโดยใช้ Labconco แช่แข็งเครื่องเป่า (Labconco คอร์ป, แคนซัส, MO, USA) ผลตอบแทนที่ได้รับการคำนวณบนพื้นฐานของน้ำหนักเปียกของครีบและกระดูกตามลำดับ ขั้นตอนในการสกัด PSC จากเครื่องชั่ง (0.5 กิโลกรัม) ที่แตกต่างกันเล็กน้อยในการที่เวลาของการล้างตะกรันที่ได้รับลดลงถึง 3 วันและขั้นตอนในการลบไขมันที่ละ
การแปล กรุณารอสักครู่..
แล้วดินที่แขวนลอยใน 10% ( v / v ) บิวทิลแอลกอฮอล์เพื่อเอาไขมันที่ตัวอย่าง / แก้ไขอัตราส่วน 1 : 10 ( w / v ) สำหรับ 36 ชั่วโมงกับการเปลี่ยนแปลงของสารละลายทุก 12 ชั่วโมง หลังจากได้ล้างเย็นกลั่น และสกัดด้วย 0.5 M กรดอะซิติก 0.1 ( ที่มี น้ำหนัก / ปริมาตร ) เป็นอักษรที่ใช้ / แก้ไขอัตราส่วน 1 : 10 ( w / v ) เป็นเวลา 3 วัน ถูกระงับแล้วระดับที่ 12500g สำหรับ 40 นาทีที่ 4 _c โดยใช้เครื่อง j-e AVANTI ( Beckman Coulter , อิงค์ , Indianapolis , สหรัฐอเมริกา ) และนำมันออกเค็มโดยการเพิ่มเกลือความเข้มข้นสุดท้ายของ 2.0 เมตร ซึ่งเป็นข้อมูลจากการปั่นที่ 12500g 40 นาทีที่ 4 _c แล้วละลายในกรด 0.5 เมตร ที่ตัวอย่าง / แก้ไขอัตราส่วน 1 : 10 ( w / v )ผลในสารละลายเกลือออกอีกครั้งกับเกลือที่ความเข้มข้นสุดท้าย 2.0 เมตร และที่รวบรวมและ redissolved 0.5 M กรดอะซิติกภายใต้เงื่อนไขเดียวกันในข้างต้นทางออกสุดท้ายคือ dialysed กับเย็นกลั่นโดยใช้ถุงไตกับชื่อผู้ผลิตระบุ MW cut-off 7 กิโล ( เซี่ยงไฮ้นกสีเขียวพัฒนาวิทยาศาสตร์และเทคโนโลยี จำกัด , เซี่ยงไฮ้ , จีน ) แล้วแห้งโดยใช้เครื่องเป่าแช่แข็งแล็บคอนโก้ ( แล็บคอนโก้คอร์ป , แคนซัส , โม , USA ) ผลผลิตถูกคำนวณบนพื้นฐานของน้ำหนักเปียกของครีบ และกระดูกตามลำดับ ขั้นตอนการสกัด PSC จากระดับ ( 0.5 กก. ) มีแตกต่างกันเล็กน้อยในที่ครั้งเพื่อล้างบันทึกย่อถูกตัดทอนถึง 3 วัน และขั้นตอน การเอาไขมันที่ถูกละเว้น .
การแปล กรุณารอสักครู่..