Bacterial strains and cultureBacter

Bacterial strains and culture
Bacterial strain E. coli JM109 and plasmid pUC19 were obtained
from Sangon Biotech (Shanghai, China). Plasmid vector pUC19 has
one ampR gene (ampicillin resistance gene) which encodes TEM-1
β-lactamase. A single colony of E. coli JM109 or ampicillin-resistant
JM109/pUC19 on a solid Luria-Bertani (LB) (10 g tryptone, 5 g yeast
extract, and 15 g agar per liter) agar plate was transferred to a
2 mL liquid LB culture medium without or with 100 μg/mL carbenicillin, respectively. The bacterial samples were cultured overnight in an incubator shaker at 37 °C and 220 rpm. Then 150 μL E.
coli JM109 or E. coli JM19/pUC109 were inoculated in 15 mL fresh
LB medium without or with 100 μg/mL carbenicillin, respectively.
The samples were grown at 37 °C and 220 rpm until the extinction
at 600 nm (OD600) reached 0.8–1.0 (∼3.5 h) to the mid log phase.
The E. coli samples were harvested by centrifugation at 10,000 rpm
for 5 min, resuspended in PBS with OD600 adjusted to 1.2
(concentration ∼1  109 cells/mL). The harvested bacterial samples
were stored at 4 °C and analyzed on the HSFCM within 24 h.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

สายพันธุ์แบคทีเรียและวัฒนธรรมสายพันธุ์แบคทีเรีย E. coli JM109 และ plasmid pUC19 รับจากเทคโนโลยีชีวภาพ Sangon (เซี่ยงไฮ้ จีน) มี plasmid เวกเตอร์ pUC19หนึ่ง ampR ยีน (ยีนต้านทานแอมพิซิลลิน) ซึ่งจแมป TEM-1Β-lactamase อาณานิคมเดียว ของ E. coli JM109 หรือแอมพิซิลลินทนJM109/pUC19 บนแข็ง Luria-Bertani (ปอนด์) (tryptone 10 กรัม ยีสต์ 5 กรัมสารสกัด และอาหาร 15 กรัมต่อลิตร) อาหารจานถูกย้ายไปของเหลว 2 mL LB วัฒนธรรมกลางโดยไม่มี หรือ 100 ไมโครกรัม/มล. carbenicillin ตามลำดับ ตัวอย่างแบคทีเรียเพาะเลี้ยงค้างคืนในการปั่นตู้อบที่ 37 ° C และ 220 รอบต่อนาที แล้วอี μL 150coli JM109 หรือไล JM19/pUC109 ได้ inoculated ในสด 15 mLLB ปานกลางโดยไม่ หรือ 100 ไมโครกรัม/มล. carbenicillin ตามลำดับตัวอย่างถูกปลูกที่ 37 ° C และ 220 รอบต่อนาทีจนถึงการสูญพันธุ์ที่ 600 nm (OD600) ถึง 0.8 – 1.0 (∼3.5 h) บันทึกระยะกลางตัวอย่าง E. coli ถูกเก็บเกี่ยว โดยการหมุนเหวี่ยงที่ 10,000 รอบต่อนาที5 นาที resuspended ใน PBS กับ OD600 ปรับ 1.2(ความเข้มข้น ∼1 109 เซลล์/มิลลิลิตร) ตัวอย่างแบคทีเรียที่เก็บเกี่ยวเก็บที่ 4 ° C และวิเคราะห์บน HSFCM ภายใน 24 ชม

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

แบคทีเรียและวัฒนธรรม
ของสายพันธุ์แบคทีเรีย E. coli JM109 และพลาสมิด pUC19 ที่ได้รับ
จาก Sangon ไบโอเทค (เซี่ยงไฮ้ประเทศจีน) เวคเตอร์ pUC19 มี
ยีน ampR (ampicillin ยีนต้านทาน) ซึ่ง encodes TEM-1
β-lactamase อาณานิคมเดียวของเชื้อ E. coli JM109 หรือ ampicillin ทน
JM109 / pUC19 บนของแข็ง Luria-Bertani (ปอนด์) (10 กรัม Tryptone ยีสต์ 5 กรัม
สารสกัดและ 15 กรัมวุ้นต่อลิตร) จานเลี้ยงเชื้อถูกโอนไปยัง
2 มลของเหลว อาหารเลี้ยงเชื้อ LB โดยไม่ต้องหรือ 100 ไมโครกรัม / มิลลิลิตร carbenicillin ตามลำดับ กลุ่มตัวอย่างโดยการเพาะเชื้อแบคทีเรียในชั่วข้ามคืนในเครื่องปั่นศูนย์บ่มเพาะที่ 37 องศาเซลเซียสและ 220 รอบต่อนาที แล้ว 150 ไมโครลิตร E.
coli JM109 หรือเชื้อ E. coli JM19 / pUC109 ถูกเชื้อใน 15 มลสด
ขนาดกลางโดยไม่ต้อง LB หรือ 100 ไมโครกรัม / มิลลิลิตร carbenicillin ตามลำดับ.
กลุ่มตัวอย่างที่มีปลูกอยู่ที่ 37 องศาเซลเซียสและ 220 รอบต่อนาทีจนสูญพันธุ์
ที่ 600 นาโนเมตร (OD600) ถึง 0.8-1.0 (~3.5 เอช) ถึงกลางระยะ log.
ตัวอย่างเชื้อ E. coli ถูกเก็บเกี่ยวโดยการหมุนเหวี่ยงที่ 10,000 รอบต่อนาที
เป็นเวลา 5 นาที, resuspended ในพีบีเอสที่มีการปรับเพื่อ OD600? 1.2
(ความเข้มข้น ~1? 109 เซลล์ / มิลลิลิตร) เก็บเกี่ยวตัวอย่างแบคทีเรีย
ที่ถูกเก็บไว้ที่ 4 องศาเซลเซียสและวิเคราะห์ใน HSFCM ภายใน 24 ชั่วโมง