2. Materials and methods 2.1. Proce

2. Materials and methods
2.1. Processing of ESL milk and microbial analyses during storage at different temperatures
Three batches of ESL milk samples A, B, C (3.8% fat matter) and their precursor products raw milk and microfiltered milk (MF) were obtained from a German dairy over a period of 4 months. Milk was treated by the Bactocatch procedure. Raw milk was degreased to avoid blocking of the ceramic membranes by fat globules. Skimmed milk was microfiltered through ceramic membranes with a nominal pore size of 1.4 μm (Tami, France) and then pasteurized at 77 °C for 30 s. Cream was heated separately at 125 °C for 4 s and reverted to the pasteurized skimmed milk. Two raw milk samples, two MF samples and 2 carton packages (1.5 l) of ESL milk from each batch were analyzed at the day of production and a total of 51 carton packages were stored at 4 °C, 8 °C and 10 °C, respectively, for up to 29 days. Two packages were periodically analyzed after 7, 14, 16, 18, 20 and 29 days while after 22 days (end of shelf life), five packages of each storage temperature and each batch were analyzed. Milk was diluted with Ringer solution (Merck) and plated on Plate Count Agar supplemented with 0.1% skim milk powder (PC+MM, Merck) according to IDF standards and German legislation. Plates were incubated aerobically at 30 °C for 5 days and the total aerobic counts were determined. For analyzing the raw milk biodiversity, 100 isolates were randomly chosen. Due to the low microbial loads expected for the MF and ESL milk samples directly after production, an additional enrichment procedure was performed for these samples of each batch to ensure accurate cell count determination and a sufficiently high number of isolates for identification. 100 mL of milk were therefore divided into 1 mL aliquots, enriched with 9 mL of PC+MM broth and incubated at 30 °C for 5 days. After enrichment, one loopful of each sample was plated on PC+MM agar and plates were incubated at 30 °C for 120 h. Finally, all bacterial colonies grown in 100 mL enriched milk sample were chosen for species determination. For batch C, which had higher cell counts in the freshly produced ESL milk, 200 colonies were randomly selected and isolated from PC+MM agar after direct plating and due to their high spoilage potential additionally all spore formers were chosen from the enriched aliquots. From the refrigerated samples after 22 days of storage, representative colonies of each of the distinct morphologies were isolated from the agar plates. Additionally, during storage, representative colonies of B. cereus and spore formers dominating the microbiota were isolated and identified.

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2. วัสดุและวิธีการ
2.1 การประมวลผลของนม ESL
และวิเคราะห์จุลินทรีย์ระหว่างการเก็บรักษาที่อุณหภูมิที่แตกต่างกันสามสำหรับกระบวนการของตัวอย่างนมESL A, B, C (3.8% เรื่องไขมัน) และผลิตภัณฑ์สารตั้งต้นของพวกเขาน้ำนมดิบและนม microfiltered (MF) ที่ได้รับจากนมเยอรมันในช่วง 4 เดือน นมได้รับการรักษาโดยขั้นตอน Bactocatch น้ำนมดิบถูก degreased เพื่อหลีกเลี่ยงการปิดกั้นของเยื่อเซรามิกโดยข้นไขมัน นมไขมันต่ำได้ microfiltered ผ่านเยื่อเซรามิกที่มีขนาดรูขุมขนเล็กน้อยจาก 1.4 ไมครอน (Tami ฝรั่งเศส) และพาสเจอร์ไรส์แล้วที่ 77 ° C เป็นเวลา 30 วินาที ครีมถูกความร้อนแยกที่ 125 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 4 และหวนกลับไปพาสเจอร์ไรส์นมไขมันต่ำ สองตัวอย่างน้ำนมดิบสองตัวอย่าง MF และ 2 แพคเกจกล่อง (1.5 ลิตร) ของนม ESL จากแต่ละชุดถูกนำมาวิเคราะห์ในวันที่ของการผลิตและการรวมเป็น 51 แพคเกจกล่องถูกเก็บไว้ที่ 4 องศาเซลเซียส, 8 องศาเซลเซียสและ 10 องศาเซลเซียส ตามลำดับได้นานถึง 29 วัน วิเคราะห์สองแพคเกจได้รับเป็นระยะ ๆ หลังจากที่ 7, 14, 16, 18, ​​20 และ 29 วันในขณะที่หลังจาก 22 วัน (ในตอนท้ายของอายุการเก็บรักษา) ห้าแพคเกจของอุณหภูมิการเก็บรักษาในแต่ละครั้งและแต่ละชุดถูกนำมาวิเคราะห์ นมถูกเจือจางด้วยสารละลาย (Ringer เมอร์ค) และเคลือบบนแผ่นวุ้นนับเสริมด้วย 0.1% นมผงพร่องมันเนย (PC + เอ็มเอ็มเมอร์) ตามมาตรฐาน IDF และการออกกฎหมายเยอรมัน แผ่นถูกบ่มออกซิเจนที่อุณหภูมิ 30 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 5 วันและนับรวมแอโรบิกได้รับการพิจารณา สำหรับการวิเคราะห์ความหลากหลายทางชีวภาพน้ำนมดิบ 100 สายพันธุ์ที่ได้รับการสุ่มเลือก เนื่องจากการโหลดจุลินทรีย์ต่ำที่คาดไว้สำหรับ MF และ ESL ตัวอย่างนมโดยตรงหลังจากการผลิตขั้นตอนการตกแต่งเพิ่มเติมได้ดำเนินการสำหรับกลุ่มตัวอย่างเหล่านี้แต่ละชุดเพื่อให้แน่ใจว่าการกำหนดจำนวนเซลล์ที่ถูกต้องและเป็นจำนวนที่สูงพอสมควรของเชื้อสำหรับประชาชน 100 มิลลิลิตรของนมจึงถูกแบ่งออกเป็น aliquots 1 มิลลิลิตรอุดมไปด้วย 9 มิลลิลิตร PC + น้ำซุป MM และบ่มที่อุณหภูมิ 30 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 5 วัน หลังจากที่เพิ่มคุณค่าหนึ่ง loopful ของกลุ่มตัวอย่างแต่ละคนถูกชุบบน PC + วุ้น MM และแผ่นถูกบ่มที่อุณหภูมิ 30 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 120 ชั่วโมง สุดท้ายอาณานิคมของแบคทีเรียทั้งหมดที่ปลูกใน 100 มลตัวอย่างนมอุดมได้รับเลือกสำหรับการกำหนดสายพันธุ์ สำหรับชุดซีซึ่งมีจำนวนเซลล์ที่สูงขึ้นในการผลิตนมสด ESL 200 โคโลนีที่ได้รับการคัดเลือกแบบสุ่มและแยกได้จาก PC + วุ้น MM หลังจากชุบโดยตรงและเนื่องจากการที่มีศักยภาพการเน่าเสียของพวกเขาสูงนอกจากนี้ formers สปอร์ทั้งหมดได้รับการแต่งตั้งจาก aliquots อุดม จากตัวอย่างในตู้เย็นหลังจาก 22 วันของการจัดเก็บอาณานิคมตัวแทนของแต่ละรูปร่างลักษณะที่แตกต่างกันแยกได้จากจานอาหารเลี้ยงเชื้อ นอกจากนี้ระหว่างการเก็บรักษาอาณานิคมตัวแทนของบี formers cereus และสปอร์มีอำนาจเหนือ microbiota ถูกแยกและระบุ

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2 . วัสดุและวิธีการ
2.1 . แปรรูปนม ESL และวิเคราะห์จุลินทรีย์ระหว่างการเก็บรักษาที่อุณหภูมิแตกต่างกัน
สามชุดของ ESL นมตัวอย่าง A , B , C ( 3.8% เรื่องไขมัน ) และผลิตภัณฑ์สารตั้งต้นของน้ำนมดิบและนม microfiltered ( MF ) ที่ได้รับจากนม เยอรมัน ในช่วง 4 เดือน นมได้รับการรักษาตามขั้นตอน bactocatch .นมดิบ degreased เพื่อหลีกเลี่ยงการปิดกั้นของเยื่อแผ่นเซรามิคโดยเม็ดไขมัน นมเป็น microfiltered ผ่านเมมเบรนเซรามิกที่มีขนาดรูพรุนลดลง 1.4 μ M ( ทามิ ฝรั่งเศส ) และพาสเจอร์ไรซ์ที่อุณหภูมิ 77 ° C เป็นเวลา 30 วินาทีแบบแยกครีม 125 °องศาเซลเซียสเป็นเวลา 4 วินาทีและรับเพื่อพาสเจอร์ไรส์ นม . สองตัวอย่างน้ำนมดิบ , สอง MF ตัวอย่างและ 2 กล่องชุด ( 15 L ) ของ ESL นมจากแต่ละชุดมาวิเคราะห์ในวันที่ของการผลิตและรวม 51 กล่องแพ็คเกจเก็บรักษาที่อุณหภูมิ 4 องศา C , 8 ° C และ 10 ° C ตามลำดับ ถึง 29 วัน สองชุดเป็นแบบเป็นระยะเวลา 7 , 14 , 16 , 18 , 20 และ 29 วัน ในขณะที่หลัง 22 วัน ( สิ้นสุดของชีวิตชั้น ) 5 แพคเกจของแต่ละอุณหภูมิและแต่ละชุดข้อมูลนมเจือจางด้วย Ringer solution ( Merck ) และชุบบน Planetmath reference ที่เติม 0.1 % หางนมผง ( PC มม. , Merck ) ตามโครงการมาตรฐานและกฎหมายเยอรมัน จานถูกบ่ม aerobically 30 ° C ที่ 5 วัน และนับรวมแบบตัวอย่าง เพื่อวิเคราะห์ความหลากหลายทางชีวภาพของน้ำนมดิบ 100 สายพันธุ์ สุ่มเลือกเนื่องจากจุลินทรีย์ต่ำโหลดคาดว่าสำหรับ MF และ ESL ตัวอย่างนมโดยตรงหลังจากการผลิต ขั้นตอนการเสริมเพิ่มเติมสำหรับตัวอย่างเหล่านี้ของแต่ละชุด เพื่อให้กำหนดนับเซลล์ที่ถูกต้องและมีปริมาณจำนวนของสายพันธุ์ที่ระบุไว้ 100 มล. ของนมเป็นจึงแบ่งออกเป็น 1 ml เฉยๆ ,อุดมไปด้วยน้ำซุปของ PC 9 มิลลิลิตรบ่มที่ 30 มม. ° C เป็นเวลา 5 วัน หลังจากบำรุง หนึ่ง loopful ของแต่ละตัวอย่างบนพีซีและแผ่นชุบวุ้นมม. อุณหภูมิ 30 องศา C เป็นเวลา 120 ชั่วโมง ในที่สุด โคโลนีแบคทีเรียทั้งหมดในตัวอย่างนมโต 100 % อุดมได้เลือกสายพันธุ์ที่มุ่งมั่น สำหรับชุด C ซึ่งสูงกว่าเซลล์นับใน ESL สดผลิตนม200 โคโลนีสุ่มและแยกจากเครื่องคอมพิวเตอร์โดยตรงหลังจากชุบวุ้น มม. และสูงของการเน่าเสียเนื่องจากศักยภาพนอกจากนี้ Formers สปอร์ทั้งหมดได้รับเลือกจากอุดมเฉยๆ . จากตู้เย็นตัวอย่างหลังจาก 22 วันของกระเป๋า , ผู้แทนอาณานิคมของแต่ละลักษณะที่แตกต่างแยกจากอาหารแผ่น นอกจากนี้ ในระหว่างการเก็บผู้แทนอาณานิคมของ B . cereus และสปอร์สามารถแบบฟอร์มในไมโครไบโ ้าถูกแยกและระบุ