2.7. Mutagenesis by N-methyl-N-nitr

2.7. Mutagenesis by N-methyl-N-nitro-N-nitrosoguanidine
(NTG)
The wide type cell grown in CMC medium at 50 C for 24 h
was harvested at logarithmic phase by centrifugation
(10,000g, 20 min) at 4 C and washed twice with McIlvaine’s
buffer (containing 0.1 M citric acid and 0.2 M phosphate buffer)
pH 5.0. The cell was resuspended in buffer at a concentration
of 5.8 · 108 cell/ml. and NTG (1 mg/ml) was added into
the cell suspension. After incubation for 1 h at 37 C in incubation
shaker at 100 rpm, the cell was centrifuged and washed
immediately with buffer. The treated sample was transferred
into CMC plates (Xu et al., 2011) and incubated at 50 C for
48 h. The cellulolytic activity was assayed

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.7. mutagenesis โดย N-methyl-N-nitro-N-nitrosoguanidine(NTG)เซลล์หลากหลายชนิดที่ปลูกใน CMC ปานกลาง 50 c เป็นเวลา 24 ชมคือการเก็บเกี่ยวที่ระยะลอการิทึม โดยหมุนเหวี่ยง(10, 000 กรัม 20 นาที) ที่ 4 C และล้างสองครั้ง ด้วยของ McIlvaineบัฟเฟอร์ (ประกอบด้วยกรดซิตริก 0.1 M และบัฟเฟอร์ฟอสเฟต 0.2 M)pH 5.0 เซลล์ถูก resuspended ในบัฟเฟอร์ที่ความเข้มข้นของ 5.8 · 108 เซลล์ / มล.และ NTG (1 มิลลิกรัม/มิลลิลิตร) ถูกเพิ่มลงในระงับเซลล์ หลังจากบ่มสำหรับ h 1 ที่ 37 C ในช่วงกกไข่ผลิตภัณฑ์ และล้างปั่นที่ 100 rpm เซลล์ทันที ด้วยบัฟเฟอร์ ตัวอย่างปฏิบัติการโอนย้ายใน CMC แผ่น (Xu et al. 2011) และรับการกก 50 c เป็นเวลา48 ชั่วโมง กิจกรรม cellulolytic ถูก assayed

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.7 กลายพันธุ์จาก N-methyl-N-Nitro-N-nitrosoguanidine
(NTG)
เซลล์ชนิดกว้างเติบโตในระดับปานกลาง CMC ที่ 50 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 24 ชั่วโมง
เก็บเกี่ยวในระยะลอการิทึมโดยการหมุนเหวี่ยง
(10,000g 20 นาที) วันที่ 4 องศาเซลเซียสและ ล้างครั้งที่สองกับ McIlvaine ของ
บัฟเฟอร์ (ที่มี 0.1 M กรดซิตริกและ 0.2 M ฟอสเฟตบัฟเฟอร์)
ค่า pH 5.0 เซลล์ที่ถูก resuspended ในบัฟเฟอร์ที่ความเข้มข้น
5.8 · 108 เซลล์ / มิลลิลิตร และ NTG (1 mg / ml) ถูกเพิ่มเข้าไปใน
การระงับเซลล์ หลังจากการบ่มเป็นเวลา 1 ชั่วโมงที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียสในการบ่ม
เครื่องปั่นที่ 100 รอบต่อนาทีเซลล์ที่ถูกปั่นและล้าง
ทันทีด้วยบัฟเฟอร์ กลุ่มตัวอย่างที่ได้รับการรักษาที่ถูกย้าย
เข้าไปในแผ่น CMC (Xu et al. 2011) และบ่มที่อุณหภูมิ 50 องศาเซลเซียสเป็นเวลา
48 ชั่วโมง กิจกรรมเซลลูโลสได้รับการวิเคราะห์

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.7 . n-methyl-n-nitro-n-nitrosoguanidine การกลายพันธุ์โดย( NTG )เซลล์ชนิด ปลูกในที่กว้าง CMC ขนาดกลาง 50 องศาเซลเซียส เป็นเวลา 24 ชม.เก็บเกี่ยวในลอการิทึมเฟสโดยการปั่นเหวี่ยง( 10000g 20 นาที ) ที่ 4 องศาเซลเซียส และล้างด้วย mcilvaine เป็นสองครั้งบัฟเฟอร์ ( ที่มีความเข้มข้น 0.1 M citric acid และ 0.2 M ฟอสเฟตบัฟเฟอร์ )pH 5.0 . เซลล์ resuspended ในบัฟเฟอร์ที่ความเข้มข้น5.8 ด้วย 108 เซลล์ / มิลลิลิตรและ NTG ( 1 mg / ml ) คือเพิ่มเซลล์แขวนลอย . หลังจากบ่มที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียส เป็นเวลา 1 ชั่วโมง ในการบ่มเพาะเครื่องปั่นที่ 100 รอบต่อนาที , เซลล์ไฟฟ้า และล้างทันทีด้วยบัฟเฟอร์ ตัวอย่างการโอนเป็น CMC แผ่น ( Xu et al . , 2011 ) และบ่มที่อุณหภูมิ 50 C สำหรับ48 ชั่วโมง ทดลองกิจกรรมซีรั่ม