MicroorganismThe conidiospore suspe

Microorganism
The conidiospore suspension of A. oryzae RIB 128 was prepared by washing a slant with 0.9% NaCl solution, as described previously (8). The suspension was then added to the wheat bran moistened by distilled water (50%, w/w) and incubated at 30 °C with 95% humidity for 4 days.

Purification of enzymes
A crude extract from an A. oryzae solid culture was prepared as follows. Five hundred ml of 40 mM acetate buffer (pH 5.0) containing 150 mM NaCl was added to the solid-state culture and kept at 4 °C overnight. The mixture was filtered with the cheesecloth and centrifuged at 8000 rpm for 20 min. The supernatant was filtered with a membrane (45 μm) and concentrated by ultrafiltration. The extract was applied to a HiPrep-DEAE column (16 × 100 mm) equilibrated with 40 mM acetate buffer (pH 5.0). The column was eluted with a linear gradient of NaCl (0–1 M) in the same buffer. The eluate was monitored by the absorbance at 280 nm and the xylanase activity, and the active fraction was pooled. After concentrated by ultrafiltration, the active fraction was applied to TSKgel Phenyl-5PW column (21.5 × 150 mm) equilibrated with 40 mM acetate buffer (pH 5.0) containing 0.5 M (NH4)2SO4. The column was eluted with a linear gradient of (NH4)2SO4 (0–0.5 M).

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

จุลินทรีย์ทุเลา conidiospore แห้งระดับต่าง ๆ อ. 128 ซี่โครงถูกเตรียม โดยการซักผ้าการเอียง ด้วย 0.9% NaCl โซลูชั่น อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ (8) การระงับถูกเพิ่มไปโป่ง moistened ด้วยน้ำกลั่น (50%, w/w) และ incubated ที่ 30 ° C ความชื้น 95% กับ 4 วันทำให้บริสุทธิ์ของเอนไซม์เตรียมสารสกัดหยาบจากวัฒนธรรมแข็งแห้งระดับต่าง ๆ อ.ดังนี้ 500 ml 40 มม. acetate บัฟเฟอร์ (pH 5.0) ประกอบด้วย NaCl 150 มม.เพิ่มวัฒนธรรมโซลิดสเตต และเก็บที่ 4 ° C ค้างคืน ส่วนผสมมีการ cheesecloth และ centrifuged ที่ 8000 รอบต่อนาทีสำหรับ 20 นาที Supernatant ที่มีเมมเบรน (45 μm) และเข้มข้น โดย ultrafiltration สารสกัดที่ใช้คอลัมน์ HiPrep DEAE (16 × 100 มม.) equilibrated กับบัฟเฟอร์ acetate 40 มม. (pH 5.0) คอลัมน์ถูก eluted กับการไล่ระดับสีแบบเส้นตรงของ NaCl (0-1 M) ในบัฟเฟอร์เดียวกัน Eluate ถูกตรวจสอบ โดย absorbance ที่ 280 nm และกิจกรรมไซลาเนส และเศษส่วนใช้งานถูกทางถูกพู หลังจากที่เข้มข้น โดย ultrafiltration เศษส่วนใช้งานอยู่ใช้คอลัมน์ TSKgel Phenyl 5PW (21.5 × 150 mm) equilibrated กับ 40 มม. acetate บัฟเฟอร์ (pH 5.0) ที่มี 0.5 M (NH4) 2SO4 คอลัมน์ถูก eluted กับ 2SO4 ไล่ระดับของ (NH4) แบบเชิงเส้น (0-0.5 M)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

จุลินทรีย์
ระงับ conidiospore ของ A. oryzae RIB 128 ถูกจัดทำขึ้นโดยการล้างเอียงกับ 0.9% การแก้ปัญหาโซเดียมคลอไรด์ตามที่กล่าวไว้ก่อนหน้านี้ (8) ระงับถูกเพิ่มเข้ามาแล้วจะรำข้าวสาลีชุบด้วยน้ำกลั่น (50%, W / w) และบ่มที่อุณหภูมิ 30 องศาเซลเซียสมีความชื้น 95% เป็นเวลา 4 วัน. บริสุทธิ์ของเอนไซม์สารสกัดหยาบจาก A. oryzae วัฒนธรรมของแข็งถูกจัดทำขึ้น ดังต่อไปนี้ ห้าร้อยมิลลิลิตรขนาด 40 มมอะซิเตทบัฟเฟอร์ (pH 5.0) ที่มี 150 มิลลิโซเดียมคลอไรด์ถูกบันทึกอยู่ในวัฒนธรรมของรัฐที่มั่นคงและเก็บไว้ที่อุณหภูมิ 4 องศาเซลเซียสในชั่วข้ามคืน ส่วนผสมที่ถูกกรองด้วยผ้าและหมุนเหวี่ยงที่ 8000 รอบต่อนาทีเป็นเวลา 20 นาที ใสถูกกรองด้วยเมมเบรน (45 ไมครอน) และเข้มข้นโดยกรอง สารสกัดที่ได้รับนำไปใช้กับคอลัมน์ HiPrep-DEAE (16 × 100 มิลลิเมตร) equilibrated 40 มิลลิบัฟเฟอร์อะซิเตท (pH 5.0) คอลัมน์ถูกชะด้วยลาดเชิงเส้นของโซเดียมคลอไรด์ (0-1 M) ในบัฟเฟอร์เดียวกัน eluate ได้รับการตรวจสอบโดยการดูดกลืนแสงที่ 280 นาโนเมตรและกิจกรรมไซลาเนสและส่วนที่ใช้งานได้รับการรวบรวม หลังจากที่ความเข้มข้นโดยกรอง, ส่วนที่ใช้งานถูกนำไปใช้กับคอลัมน์ TSKgel Phenyl-5PW (21.5 × 150 มิลลิเมตร) equilibrated 40 มิลลิบัฟเฟอร์อะซิเตท (pH 5.0) ที่มี 0.5 M (NH4) 2SO4 คอลัมน์ถูกชะด้วยลาดเชิงเส้นของ (NH4) 2SO4 (0-0.5 M)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

จุลินทรีย์
conidiospore ระงับ A . oryzae ซี่โครง 128 เตรียมล้างเอียงด้วยสารละลาย NaCl 0.9% , ตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ ( 8 ) ถูกระงับแล้วเพิ่มให้กับรำข้าวสาลีชุบน้ำกลั่น 50% ( w / w ) และบ่มที่อุณหภูมิ 30 องศา C 95 % ความชื้น 4 วัน


มีความบริสุทธิ์ของเอนไซม์สกัดจาก A . oryzae แข็งวัฒนธรรมเตรียมดังนี้500 มิลลิลิตร อะซิเตทบัฟเฟอร์ 40 มม. ( pH 5.0 ) ที่มีขนาด 150 มม. ที่ถูกเพิ่มเข้าไปในวัฒนธรรมของของแข็งและเก็บไว้ที่ 4 ° C ในชั่วข้ามคืน ส่วนผสมจะถูกกรองด้วยผ้าและระดับที่ 8 , 000 รอบต่อนาทีเป็นเวลา 20 นาที และน่านถูกกรองด้วยเมมเบรน ( 45 μ M ) และเข้มข้น โดยผสม .สารสกัดที่ใช้ในการทำ hiprep คอลัมน์ ( 16 × 100 มม. ) equilibrated อะซิเตทบัฟเฟอร์ 40 มม. ( pH 5.0 ) คอลัมน์ คือ ตัวอย่าง มีความลาดชันเชิงเส้นของเกลือโซเดียมคลอไรด์ ( 0 – 1 M ) ในบัฟเฟอร์เดียวกัน ในสารละลาย ( eluate ) คือการตรวจสอบโดยการดูดกลืนแสงที่ 280 nm และ ไซลาเนส และส่วนที่ใช้งานได้รวม . หลังจากที่ความเข้มข้นโดยกรอง ,ส่วนการใช้งานก็ใช้ tskgel คอลัมน์ phenyl-5pw ( 21.5 × 150 มม. ) equilibrated อะซิเตทบัฟเฟอร์ 40 มม. ( pH 5.0 ) ที่มี 0.5 m ( NH4 ) 2so4 . คอลัมน์คือตัวอย่างด้วยเส้นไล่ระดับ ( NH4 ) 2so4 ( 0 – 0.5 M )