2.6. Chromatographic separation
Analyses were performed using Ultimate 3000 HPLC system
(Thermo Fisher Scientific, Inc., Waltham, MA, USA) equipped with
quaternary pump, autosampler, column heater and diode array
detector. The analytes were separated by YMC C30 Carotenoid
Column (150 mm 3.0 mm, S-3 lm, YMC, Wilmington, USA). The
operating conditions were as follows: flow rate 0.6 ml/min;
column temperature 25 C; autosampler temperature 10 C; injection
volume 10 ll; detection at k = 445 nm (spectral acquisition
300–700 nm); total run time 33 min. Mobile phases consisted of
methanol (A), water (B) and tert-butyl methyl ether (C). The gradient
elution consisted of: initial conditions of 90% A, 10% B and 0% C
were kept constant for 1 min, then increasing gradually to 90% A, 0% B and 10% C at 6 min, reaching 40% A, 0% B and 60% C at
22 min following column flush and re-equilibration for 11 min.
Example chromatograms are presented in Fig. 1A and B.
2.6 แยกโครมา
วิเคราะห์ได้ดำเนินการโดยใช้ที่ดีที่สุด 3000 ระบบ HPLC
(Thermo Fisher Scientific, Inc. Waltham, MA, USA) พร้อมกับ
ปั๊มสี่, autosampler, เครื่องทำคอลัมน์และไดโอดอาร์เรย์
เครื่องตรวจจับ วิเคราะห์ถูกแยกจากกันโดย YMC C30 carotenoid
คอลัมน์ (150 มม? 3.0 มม S-3 LM, YMC, วิลมิง, สหรัฐอเมริกา)
สภาพการดำเนินงานได้ดังนี้อัตราการไหล 0.6 มล. / นาที;
? อุณหภูมิ 25 C คอลัมน์; อุณหภูมิ autosampler 10 C; ฉีด
ปริมาณ 10 LL; การตรวจสอบที่ K = 445 นาโนเมตร (สเปกตรัมการเข้าซื้อกิจการ
300-700 นาโนเมตร); เวลาทำงานรวม 33 นาที ขั้นตอนมือถือประกอบด้วย
เมทานอล (A), น้ำ (B) และ tert-butyl เมธิลอีเธอร์ (C) ลาด
ชะประกอบด้วย: เงื่อนไขเริ่มต้นเป็น 90%, 10% บีและ 0% C
จะถูกเก็บไว้อย่างต่อเนื่องเป็นเวลา 1 นาทีแล้วค่อยๆเพิ่มขึ้นถึง 90% A, 0% B และ 10% C ที่ 6 นาทีถึง 40% ใน 0% B 60% และ C ที่
22 นาทีต่อไปล้างและคอลัมน์ใหม่สมดุลสำหรับ 11 นาที.
chromatograms ตัวอย่างจะถูกนำเสนอในรูป 1A และ B
การแปล กรุณารอสักครู่..