purified hypomethylated recombinant

purified hypomethylated recombinant proteins Flag-KAP1 or, as negative control, Flag-ZNF224,
which is not methylated by PRMT5 [11]. To generate hypomethylated protein extracts that are good
in vitro substrates for methyltransferases, Flag-KAP1 and Flag-ZNF224 were purified from HEK293
cells cultured in the presence of adenosine periodate oxidized (AdOx) [14], an adenosylhomocysteine
hydrolase inhibitor that causes the accumulation of intracellular adenosylhomocysteine (AdoHcy)
levels. This increase in AdoHcy levels results in feedback inhibition of most methylation reactions.
Indeed, a number of specific PRMT inhibitors recently identified have proven to be of limited use due
to their inability to enter cells or their cytotoxic effects [15].

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

บริสุทธิ์ hypomethylated recombinant โปรตีน KAP1 ธง หรือ ลบ ควบคุม ธง-ZNF224ซึ่งไม่เป็น methylated โดย PRMT5 [11] สร้าง hypomethylated สารสกัดจากโปรตีนที่ดีในพื้นผิวหลอดสำหรับ methyltransferases, KAP1 ธงชาติและธง ZNF224 ที่บริสุทธิ์จาก HEK293อ่างในต่อหน้าของอะดีเซลล์ periodate ตกแต่ง (AdOx) [14], adenosylhomocysteine การhydrolase ผลที่ทำให้เกิดการสะสมของ intracellular adenosylhomocysteine (AdoHcy)ระดับการ เพิ่มขึ้น AdoHcy ระดับผลยับยั้งผลป้อนกลับของปฏิกิริยาปรับส่วนใหญ่แน่นอน จำนวนเฉพาะ PRMT inhibitors เมื่อเร็ว ๆ นี้ ระบุได้พิสูจน์ให้เป็นของใช้จำกัดครบกำหนดจะไม่สามารถระบุเซลล์หรือผล cytotoxic ของพวกเขา [15]

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

บริสุทธิ์โปรตีน hypomethylated ธง KAP1 หรือการควบคุมการลบธง ZNF224,
ซึ่งไม่ได้ methylated โดย PRMT5 [11] ในการสร้างสารสกัดจากโปรตีน hypomethylated ที่ดี
ในหลอดทดลองพื้นผิวสำหรับ methyltransferases, ธง KAP1 และธง ZNF224 ถูกทำให้บริสุทธิ์จาก HEK293
เซลล์เพาะเลี้ยงในการแสดงตนของ adenosine periodate ออกซิไดซ์ (ADOX) [14], adenosylhomocysteine
​​ยับยั้งไฮโดรเลสที่ทำให้เกิดการสะสมของ เซลล์ adenosylhomocysteine ​​(AdoHcy)
ระดับ การเพิ่มขึ้นของระดับ AdoHcy ผลในการยับยั้งการตอบรับมากที่สุดของปฏิกิริยา methylation.
อันที่จริงจำนวนของสารยับยั้ง PRMT ระบุไว้เมื่อเร็ว ๆ นี้ได้พิสูจน์แล้วว่าการใช้งานที่ จำกัด เนื่องจาก
จะไม่สามารถที่จะเข้าสู่เซลล์หรือผลพิษของพวกเขา [15]

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

hypomethylated รีคอมบิแนนท์โปรตีนบริสุทธิ์ flag-kap1 หรือที่ควบคุม flag-znf224 ลบ
ซึ่งไม่ methylated โดย prmt5 [ 11 ] เพื่อสร้าง hypomethylated โปรตีนสกัดที่ดี
ในหลอดทดลอง จำนวน methyltransferases flag-kap1 flag-znf224 , และมีความบริสุทธิ์จาก hek293
เซลล์เพาะเลี้ยงในการปรากฏตัวของอะดีโนซีนมากกว่าออกซิไดซ์ ( adox ) [ 14 ] , adenosylhomocysteine
ไฮโดรเลสเตอร์ที่ทำให้เกิดการสะสมของเซลล์ adenosylhomocysteine ( adohcy )
ระดับ เพิ่ม adohcy ระดับผลในการยับยั้งย้อนกลับปฏิกิริยาของร่างกายมากที่สุดนี้ .
แน่นอน จำนวนของการ prmt เฉพาะระบุเมื่อเร็ว ๆนี้ได้พิสูจน์แล้วว่าเป็นประโยชน์ จํากัด เนื่องจากไม่สามารถของตนเอง
เพื่อเข้าสู่เซลล์หรือผลกระทบที่เป็นพิษ [ 15 ]