Biotechnology Group, School of Appl

Biotechnology Group, School of Applied Biological and Chemical Sciences, University of Ulster, Coleraine, Co. Londonderry, Northern Ireland
A thermotolerant yeast strain, Kluyveromyces marxianus IMB3, has previously been shown to be capable of ethanol production following growth on lactose-containing media at 45°C. Here, we demonstrate that the organism is capable of producing inducible P-galactosidase activity in the presence of lactose. The majority of the activiw appears to be cell associated. Enzyme, isolated following disruption of the cells, has been partially characterized and shown to have a K,,, of 5 mM for the substrate o-nitrophenyl-P-o-galactoside, whereas thatfor lactose was found to be 40 mM. The activity was shown to have an optimal operating temperature of 50°C. although the half-life of the enzyme was shown to be 37”C. It has been suggested that the use of whey concentrates would be expected to overcome problems associated with low con- centrations of lactose2; however, this causes problems as- sociated with lactose intolerance of previously used strains of Kluyveromyces marxianus.3 Hence, there is a require- ment for yeast strains capable of functioning at elevated temperatures. As a result of continuous ethanol recovery from whey fermentations at elevated temperatures, the re- quirement for concentration of whey preparations would be negated. A series of thermotolerant strains of K. marxianus have been isolated,4 and one of those strains, IMB3, has been reported to be capable of ethanol production at 45°C during growth on glucose, cellobiose,5 sucrose,6 and lactose- containing media.’ With respect to growth on lactose-

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

กลุ่มเทคโนโลยีชีวภาพ โรงเรียนของใช้ และชีวภาพเคมี วิทยา มหาวิทยาลัยอัลสเตอร์ Coleraine รี่จำกัด ไอร์แลนด์เหนือ
แสดงต้องใช้ยีสต์ thermotolerant, Kluyveromyces marxianus IMB3 สามารถผลิตเอทานอลต่อเกษตรกรรมประกอบด้วยแล็กโทสก่อนหน้านี้สื่อที่ 45 องศาเซลเซียส ที่นี่ เราแสดงให้เห็นว่า สิ่งมีชีวิตที่มีความสามารถในการผลิตกิจกรรม P-galactosidase inducible ในต่อหน้าของแล็กโทส ส่วนใหญ่ของ activiw ดูเหมือนจะ เป็นเซลล์ที่เกี่ยวข้อง เอนไซม์ แยกต่างหากต่อทรัพยเซลล์ มีบางส่วนลักษณะ และแสดงให้ K, 5 มม.สำหรับพื้นผิว o-nitrophenyl-P-o-galactoside ในขณะที่ thatfor แล็กโทสพบเป็น 40 มม. กิจกรรมที่แสดงให้ได้ 50 องศาเซลเซียสอุณหภูมิทำงานเหมาะสม แม้ว่า half-life ของเอนไซม์ถูกแสดงจะ < 5 นาทีที่อุณหภูมิการ Half-life ของเอนไซม์แยกที่ 4S "C ยีสต์ fermenting อุณหภูมิสูงสุดที่แสดงเป็น 15 นาที เอนไซม์มีเสถียรภาพที่ 30° C สำหรับน้อย 8 h 7.5 pH เหมาะสมได้ เมื่อเราวิเคราะห์ผลใช้ electrophoresis เจลไล่ระดับ nondenaturing polyactyl amide ร่วมกับ zymogram ย้อมสี ด้วย methylumbelltferyl-P-o-galactoside เป็นพื้นผิว รูปแบบแตกต่างกันสองกิจกรรมถูกบ่มนาน observedfollowing กับพื้นผิว ผลการแนะนำที่แม้ว่ายีสต์นี้จะสามารถผลิตเอทานอลที่ 4S "C thermotolerance ไม่ได้ถูกสะท้อนในเอนไซม์ที่เกี่ยวข้องกับผสมกลมกลืนของแล็กโทส
คำสำคัญ: Kluyveromyces marxianus thermotolerant เอทานอล แล็กโทส P-galactosidase
แนะนำ
เวลา แล็กโทสในเวย์ได้ถูกรู้จักว่าเป็นพื้นผิวเหมาะสำหรับการผลิตเชื้อเพลิงและดื่มเอทานอลผ่านการหมัก ' แปลงที่มีประสิทธิภาพและออกแบบกระบวนการได้ถูกผู้ที่ขัดขวาง โดยข้อเท็จจริงว่า concentra-สเตรชันของแล็กโทสในเวย์ค่อนข้างต่ำ และ yeasts fermenting ค่อนข้างน้อยความสามารถในการย่อยแลคโตสใช้ประโยชน์ เพิ่มทางเลือกทั่วไปโดยใช้สายพันธุ์ดั้งเดิมของ Saccharomyces cerevisiae ร่วมกับ exogenously
ที่อยู่พิมพ์คำขอการดร. McHale เทคโนโลยีชีวภาพ โรงเรียนของใช้ชีวภาพและสารเคมีวิทยาศาสตร์ มหาวิทยาลัยรี่อัลสเตอร์ โคล raine, BT52 ISA บริษัท ไอร์แลนด์เหนือได้รับ 29 1994 กรกฎาคม ปรับปรุง 8 1994 พฤศจิกายน ยอมรับ 18 พฤศจิกายน ปี 1994
เอนไซม์รวมสายพันธุ์ของ Kluyveromyces ถึงแม้ว่าเหล่านี้จะไม่สามารถทำงานที่อุณหภูมิ > 37 " c มันได้ถูกแนะนำว่า จะต้องใช้เวย์มุ่งเพื่อเอาชนะปัญหาที่เกี่ยวข้องกับคอน centrations ต่ำของ lactose2 อย่างไรก็ตาม นี้ทำให้เกิดปัญหาเป็น sociated กับแล็กโทสของสายพันธุ์ก่อนหน้านี้ใช้ของ Kluyveromyces marxianus.3 ดังนั้น มีการใช้ติดขัดสำหรับยีสต์ที่สามารถทำงานได้ที่อุณหภูมิสูง จากเอทานอลอย่างต่อเนื่องฟื้นจากการหมักแหนมเวย์ที่อุณหภูมิ quirement ใหม่สำหรับความเข้มข้นของเวย์เตรียมจะเป็น negated ชุดของสายพันธุ์ thermotolerant ของคุณ marxianus ได้แยก 4 และหนึ่งในบรรดาสายพันธุ์ IMB3 มีรายงานว่า สามารถผลิตเอทานอลที่ 45° C ในระหว่างการเจริญเติบโตในกลูโคส cellobiose ซูโครส 56 และแล็กโทสประกอบด้วยสื่อ ' เกี่ยวกับการเจริญเติบโตบนย่อยแลคโตส--

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

เทคโนโลยีชีวภาพกลุ่มโรงเรียนที่ประยุกต์ทางชีวภาพและเคมีวิทยาศาสตร์มหาวิทยาลัยคลุม Coleraine, จำกัด ลอนดอน, ไอร์แลนด์เหนือ
สายพันธุ์ยีสต์ทนร้อน, Kluyveromyces marxianus IMB3 ได้ก่อนหน้านี้แสดงให้เห็นว่ามีความสามารถในการผลิตเอทานอลต่อไปนี้การเจริญเติบโตในสื่อที่มีแลคโตสที่ 45 ° C ที่นี่เราแสดงให้เห็นว่าสิ่งมีชีวิตที่มีความสามารถในการผลิตกิจกรรม P-galactosidase กระตุ้นในการปรากฏตัวของแลคโตส ส่วนใหญ่ของ activiw ดูเหมือนจะเป็นมือถือที่เกี่ยวข้อง เอนไซม์หยุดชะงักต่อไปนี้แยกของเซลล์ที่ได้รับโดดเด่นบางส่วนและการแสดงที่มี K,, จาก 5 มิลลิสำหรับพื้นผิว o-Nitrophenyl-po-galactoside ขณะ thatfor แลคโตสพบว่ามี 40 มิลลิ กิจกรรมที่ได้รับการแสดงที่มีอุณหภูมิในการทำงานที่ดีที่สุดของ 50 ° C แม้ว่าครึ่งชีวิตของเอนไซม์ที่แสดงให้เห็นว่า <5 นาทีที่อุณหภูมิที่ ครึ่งชีวิตของเอนไซม์ที่แยก 4S "C, อุณหภูมิที่เหมาะสมของการหมักยีสต์ได้รับการแสดงให้เห็นว่า 15 นาที เอนไซม์มีเสถียรภาพที่ 30 ° C เป็นเวลาอย่างน้อย 8 ชั่วโมง ค่า pH ที่เหมาะสมที่สุดคือ 7.5 เมื่อเราวิเคราะห์ผลโดยใช้ nondenaturing polyactyl-amide เจลลาดอิร่วมกับการย้อมสีด้วย zymogram methylumbelltferyl-po-galactoside เป็นสารตั้งต้นทั้งสองรูปแบบที่แตกต่างของกิจกรรมที่ได้รับการบ่มเพาะเป็นเวลานาน observedfollowing ด้วยพื้นผิว ผลลัพธ์ที่แสดงให้เห็นว่าแม้ว่ายีสต์นี้มีความสามารถในการผลิตเอทานอลที่ 4S "C, thermotolerance ไม่ได้สะท้อนให้เห็นในการทำงานของเอนไซม์ที่เกี่ยวข้องกับการดูดซึมของแลคโตส
คำสำคัญ: Kluyveromyces marxianus; ทนร้อน; เอทานอล; แลคโตส; P-galactosidase
บทนำ
บางเวลา แลคโตสในนมได้รับการยอมรับในฐานะที่เป็นพื้นผิวที่เหมาะสำหรับการผลิตทั้งน้ำมันเชื้อเพลิงและเอทานอลผ่านการหมักดื่ม 'การแปลงที่มีประสิทธิภาพและการออกแบบกระบวนการที่ได้รับการขัดขวางโดยข้อเท็จจริงที่เข้มข้น-tion ของแลคโตสในนมค่อนข้างต่ำและยีสต์หมักค่อนข้างน้อยมีความสามารถในการใช้แลคโตส ทางเลือกที่พบมากที่สุดในการใช้สายพันธุ์ดั้งเดิมของ Saccharomyces cerevisiae พร้อมกับเข้ามาจากภายนอก
การร้องขอการพิมพ์ที่อยู่ ดร. แมคเทคโนโลยีชีวภาพกลุ่มโรงเรียนที่ประยุกต์ทางชีวภาพและเคมีวิทยาศาสตร์มหาวิทยาลัยของเสื้อคลุมโคล-raine, BT52 อิ จำกัด ลอนดอนเหนือ ไอร์แลนด์ได้รับ 29 กรกฎาคม 1994; แก้ไข 8 พฤศจิกายน 1994; ยอมรับ 18 พฤศจิกายน 1994
เอนไซม์รวมถึงสายพันธุ์ของ Kluyveromyces แม้ว่าเหล่านี้มีความสามารถในการทำงานที่อุณหภูมิ> 37 "C. จะได้รับการชี้ให้เห็นว่าการใช้งานของเวย์โปรตีนเข้มข้นจะได้รับการคาดหวังว่าจะเอาชนะปัญหาที่เกี่ยวข้องกับต่ำ con centrations ของ lactose2; แต่นี้ทำให้เกิดปัญหาตามที่ sociated ด้วยแพ้แลคโตของสายพันธุ์ที่ใช้ก่อนหน้านี้ของ marxianus.3 Kluyveromyces จึงมี ต้อง-ment กับสายพันธุ์ยีสต์ที่มีความสามารถในการทำงานที่อุณหภูมิสูง อันเป็นผลมาจากการฟื้นตัวอย่างต่อเนื่องเอทานอลจากเวย์หมักที่อุณหภูมิสูง, ใหม่ quirement ความเข้มข้นของการเตรียมเวย์จะถูกทำให้ไร้ผล ชุดของสายพันธุ์ทนร้อนของ marxianus เคได้รับการแยก 4 และเป็นหนึ่งในสายพันธุ์เหล่านั้น IMB3 ได้รับรายงานว่าจะมีความสามารถในการผลิตเอทานอลที่ 45 ° C ในระหว่างการเจริญเติบโตในกลูโคส cellobiose 5 ซูโครส 6 และแลคโตสที่มี สื่อ. ที่เกี่ยวกับการเจริญเติบโตในแลคโตส-

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

กลุ่มเทคโนโลยีชีวภาพ , โรงเรียนวิชาชีววิทยาและเคมี มหาวิทยาลัยของเสื้อคลุม Coleraine , บริษัท , ลอนดอนเดรีย์ ไอร์แลนด์เหนือ : ยีสต์ทนเมื่อย kluyveromyces marxianus imb3 ได้ก่อนหน้านี้เคยแสดงให้เห็นความสามารถในการผลิตเอทานอลต่อการเจริญเติบโตในภาวะที่มีสื่อที่ 45 องศา นี่เราแสดงให้เห็นว่า สิ่งมีชีวิตมีความสามารถในการผลิตกิจกรรม p-galactosidase inducible ในการแสดงตนของแลกโตส ส่วนใหญ่ของ activiw ปรากฏเป็นเซลล์ที่เกี่ยวข้อง เอนไซม์ , แยกตามการหยุดชะงักของเซลล์ มีลักษณะเป็นบางส่วนและมี K , 5 มม. สำหรับพื้นผิว o-nitrophenyl-p-o-galactoside ส่วนว่า แลคโตส คือ 40 มม.กิจกรรมแสดงให้มีอุณหภูมิสูงที่สุด 50 องศา ถึงแม้ว่าครึ่งชีวิตของเอนไซม์เป็น < 5 นาทีที่อุณหภูมิที่ ครึ่งชีวิตของการแยกเอนไซม์ที่ 4S " C , เหมาะสม อุณหภูมิของการหมักยีสต์ก็เป็น 15 นาที โดยเอนไซม์ที่อุณหภูมิ 30 องศา C เป็นเวลาอย่างน้อย 8 ชั่วโมง pH 7.5 .เมื่อเราวิเคราะห์ผลโดยใช้เมื่อ polyactyl - เจลร่วมกับไอโซไซม์และการย้อมด้วย methylumbelltferyl-p-o-galactoside เป็นสับสเตรท สองรูปแบบที่แตกต่างกันของกิจกรรม observedfollowing บ่มนานด้วยสาร พบว่ายีสต์สามารถผลิตเอทานอลที่ 4S " Cthermotolerance ไม่สะท้อนให้เห็นในกิจกรรมของเอนไซม์ที่เกี่ยวข้องกับการผสมผสานของแลกโตส
คำสำคัญ : kluyveromyces marxianus ; สาร ; เอทานอล ; นม ; p-galactosidase

แนะนำหน่อย แลคโตส ใน เวย์ ได้รับการยอมรับว่าเป็นอุดมคติวัสดุการผลิต ทั้งเชื้อเพลิงและเครื่องดื่มเอทานอลผ่านการหมัก' ที่มีประสิทธิภาพการแปลงและกระบวนการออกแบบได้ถูกขัดขวางโดยข้อเท็จจริงที่ครุ่นคิด - tion ของแลคโตสในเวย์ค่อนข้างต่ำและค่อนข้างน้อยหมักยีสต์ มีความสามารถในการใช้ ทางเลือกที่พบมากที่สุดที่จะใช้สายพันธุ์ดั้งเดิมของ Saccharomyces cerevisiae ร่วมกับ exogenously เพิ่ม
ที่อยู่พิมพ์ขอให้กลุ่มชีวภาพ ดร. แมเฮล , ,โรงเรียนวิชาชีววิทยาและเคมีคลุม , มหาวิทยาลัย , โคล - เรนท์ ทำซ่า บริษัท เดอ ไอร์แลนด์เหนือ ได้รับ 29 กรกฎาคม 1994 ; แก้ไข 8 พฤศจิกายน 2537 ; ยอมรับ 18 พฤศจิกายน 2537
เอนไซม์รวมสายพันธุ์ของ kluyveromyces ถึงแม้ว่าเหล่านี้มีความสามารถในการทํางานที่อุณหภูมิ > 37 " Cมันได้รับการแนะนำว่าใช้หางนมเข้มข้นจะได้รับการคาดหวังที่จะเอาชนะปัญหาที่เกี่ยวข้องกับต่ำคอน - centrations ของ lactose2 ; แต่นี้เป็นปัญหาที่ sociated กับแล็กโตส intolerance ของก่อนหน้านี้ใช้สายพันธุ์ของ kluyveromyces marxianus 3 จึงต้อง ment สำหรับสายพันธุ์ยีสต์ที่มีความสามารถในการทำงานที่อุณหภูมิสูงเป็นผลจากการฟื้นตัวจากเวย์ fermentations เอทานอลอย่างต่อเนื่องที่อุณหภูมิสูง , Re - quirement สำหรับความเข้มข้นของการเตรียมเวย์จะถูกยกเลิก ชุดของสายพันธุ์ทนของ K . marxianus ถูกโดดเดี่ยว และหนึ่งในสายพันธุ์ที่ imb3 ได้รับรายงานมีความสามารถในการผลิตเอทานอลที่ 45 ° C ในช่วงการเจริญเติบโตที่ 5 ในกลูโคส ซูโครส6 และแลคโตส - ที่มีสื่อ ' ด้วยความเคารพของแลคโตส -