More than 2000 Simulium larvae were collected each day (1800
were used for bioassays and 200 for identification). Taxonomic
analysis of the field-collected blackfly larvae identified over 90%
of the specimens as Simulium perflavum Roubaud. There was no
significant variation on this rate among the samples. The other
species found were: S. pertinax; S. serranum; S. spinibranchium;
S. subpallidum; S. botulibranchium; S. inaequale; S. subnigrum and
S. auripellitum. However, individual identification of larvae was
time consuming and, as a result, the bioassays presented here,
which require large numbers of larvae, were carried out using
these mixed populations.
Bt cells expressing the Cry4Aa, Cry4Ba, Cry10Aa, Cry11Aa and
Cyt1Aa proteins, alone or in combination, were used in selective
bioassays against these larvae as described above. Densitometric
analysis of toxin production from SDS PAGE indicated that all the
proteins were expressed in approximately equal molar yields (data
not shown). The Cry4Aa, Cry4Ba and Cry11Aa proteins caused 100%
larval death but Cyt1Aa and Cry10Aa did not cause mortality in the
highest concentration tested (2500 mg per ml). Combinations of
toxins were then assayed and the following mixtures also produced
100% mortality: Cyt1Aa + Cry4Aa; Cyt1Aa + Cry4Ba; Cyt1Aa
+ Cry11Aa; Cry4Aa + Cry4Ba; Cry4Aa + Cry11Aa; Cry4Aa + Cry10
Aa; Cry4Ba + Cry11Aa; Cry4Ba + Cry10Aa; Cry11Aa + Cry10Aa;
Cyt1Aa + Cry4Aa + Cry4Ba + Cry11Aa + Cry10Aa. These single and
mixed toxins and Bti were then subjected to further bioassay, to
determine the concentration that kills 50% of the target population
(LC50) as shown in Table 1. No mortality was observed in the
controls.
Of the individual toxin producing strains, those producing
Cry4Ba were the most toxic with an LC50 of 92 mg ml-1 followed
by Cry4Aa (560 mg ml-1) and Cry11Aa (830 mg ml-1). Toxin combinations
were then tested for synergism among different toxins. The
mixture of samples containing Cry4Ba and Cry4Aa, which were the
most toxic individually, produced the most active combination
(LC50 54 mg ml-1) and this interaction was seen to be synergistic,
with a synergism factor of 2.9. Combination of the other individually
toxic components Cry4Ba + Cry11Aa and Cry4Aa + Cry11Aa
were also synergistic (SF 1.5 and 1.8, respectively). Mixtures of
Cry4Ba or Cry11Aa with Cyt1Aa (which is non-toxic alone)
revealed synergistic interactions, as did combinations of Cry4Ba
or Cry11Aa with Cry10Aa (Table 1). In contrast, Cry4Aa co-administrated
with Cry10Aa did not show evidence of synergistic interaction
but this toxin combined with Cyt1Aa show synergist
interaction. In addition, administration of Cry10Aa and Cyt1Aa,
which were non-toxic alone, also failed to affect larvae viability
when added together to the larvae. The mixture of all toxin-producing
strains showed a high level of synergism with an SF of
4.1. Althought, the highest level of synergism was observed with
the parental Bti strain, assuming an equal concentration of each
มากกว่า 2000 Simulium ตัวอ่อนที่ถูกเก็บรวบรวมในแต่ละวัน (1800
ถูกนำมาใช้สำหรับการทดลองทางชีววิทยาและ 200 สำหรับประชาชน) อนุกรมวิธาน
การวิเคราะห์ของตัวอ่อนฟิลด์เก็บ blackfly ระบุกว่า 90%
ของตัวอย่างเป็น Simulium perflavum Roubaud ไม่มีคือ
การเปลี่ยนแปลงอย่างมีนัยสำคัญจากอัตราในหมู่ตัวอย่างนี้ อื่น ๆ
พบว่ามีสายพันธุ์: S. Pertinax; S. serranum; S. spinibranchium;
S. subpallidum; S. botulibranchium; S. inaequale; S. subnigrum และ
S. auripellitum แต่บัตรประจำตัวบุคคลของตัวอ่อนได้รับการ
ใช้เวลานานและเป็นผล, การทดลองทางชีววิทยาที่นำเสนอที่นี่
ซึ่งต้องใช้จำนวนมากของตัวอ่อนได้ดำเนินการโดยใช้
ประชากรผสมเหล่านี้.
เซลล์บาทแสดง Cry4Aa, Cry4Ba, Cry10Aa, Cry11Aa และ
โปรตีน Cyt1Aa, เพียงอย่างเดียวหรือรวมกันถูกนำมาใช้ในการคัดเลือก
bioassays กับตัวอ่อนเหล่านี้ตามที่อธิบายไว้ข้างต้น Densitometric
การวิเคราะห์ของการผลิตสารพิษจาก SDS หน้าชี้ให้เห็นว่าทั้งหมดที่
มีการแสดงออกของโปรตีนในอัตราผลตอบแทนกรามเท่ากันโดยประมาณ (ข้อมูล
ไม่แสดง) Cry4Aa, Cry4Ba และโปรตีน Cry11Aa 100% เกิดจาก
การตายของตัวอ่อน แต่ Cyt1Aa Cry10Aa และไม่ก่อให้เกิดการเสียชีวิตใน
การทดสอบความเข้มข้นสูงสุด (2,500 มิลลิกรัมต่อมิลลิลิตร) การรวมกันของ
สารพิษที่ถูก assayed แล้วและสารผสมดังต่อไปนี้ยังผลิต
การเสียชีวิต 100%: Cyt1Aa + Cry4Aa; Cyt1Aa + Cry4Ba; Cyt1Aa
+ Cry11Aa; Cry4Aa + Cry4Ba; Cry4Aa + Cry11Aa; Cry4Aa + Cry10
Aa; Cry4Ba + Cry11Aa; Cry4Ba + Cry10Aa; Cry11Aa + Cry10Aa;
Cyt1Aa Cry4Aa + + + Cry4Ba Cry11Aa + Cry10Aa เหล่านี้เดี่ยวและ
สารพิษผสมและ Bti ถูกยัดเยียดจากนั้นไปทดสอบฤทธิ์ทางชีวภาพต่อไปเพื่อ
ตรวจสอบความเข้มข้นที่ฆ่า 50% ของประชากรเป้าหมาย
(LC50) ดังแสดงในตารางที่ 1 ไม่มีการตายพบว่าใน
การควบคุม.
ของสารพิษของแต่ละบุคคลการผลิตสายพันธุ์ ผู้ผลิต
Cry4Ba เป็นพิษมากที่สุดกับ LC50 จาก 92 มิลลิกรัมต่อมิลลิลิตร-1 ตามมา
โดย Cry4Aa (560 มิลลิกรัมต่อมิลลิลิตร-1) และ Cry11Aa (830 มิลลิกรัมต่อมิลลิลิตร-1) การผสมสารพิษ
ได้มีการทดสอบแล้วสำหรับเสริมฤทธิ์ในหมู่สารพิษที่แตกต่างกัน
ส่วนผสมของกลุ่มตัวอย่างที่มี Cry4Ba และ Cry4Aa ซึ่งเป็น
พิษมากที่สุดเป็นรายบุคคลการผลิตรวมกันใช้งานมากที่สุด
(LC50 54 มิลลิกรัมต่อมิลลิลิตร-1) และการมีปฏิสัมพันธ์นี้ที่เห็นจะทำงานร่วมกัน
กับปัจจัยเสริมฤทธิ์ของ 2.9 การรวมกันของบุคคลอื่น ๆ
ส่วนประกอบที่เป็นพิษ Cry4Ba + Cry11Aa และ Cry4Aa + Cry11Aa
นั้นยังมีการทำงานร่วมกัน (เอสเอฟ 1.5 และ 1.8 ตามลำดับ) ส่วนผสมของ
Cry4Ba หรือ Cry11Aa กับ Cyt1Aa (ซึ่งไม่เป็นพิษอยู่คนเดียว)
เปิดเผยการมีปฏิสัมพันธ์กันอย่างลงตัวเช่นเดียวกับการรวมกันของ Cry4Ba
หรือ Cry11Aa กับ Cry10Aa (ตารางที่ 1) ในทางตรงกันข้าม Cry4Aa ร่วมปกครอง
กับ Cry10Aa ไม่ได้แสดงหลักฐานของการมีปฏิสัมพันธ์กันอย่างลงตัว
แต่สารพิษนี้รวมกับ Cyt1Aa แสดง synergist
ปฏิสัมพันธ์ นอกจากนี้การบริหารงานของ Cry10Aa และ Cyt1Aa,
ซึ่งเป็นที่ปลอดสารพิษเพียงอย่างเดียวยังไม่ส่งผลกระทบต่อการมีชีวิตตัวอ่อน
เมื่อเข้ามาอยู่ร่วมกันเพื่อตัวอ่อน ส่วนผสมของสารพิษทั้งหมดผลิต
สายพันธุ์พบว่ามีระดับสูงของการเสริมฤทธิ์กับเอสเอฟของ
4.1 ถึงแม้ในระดับสูงสุดของการเสริมฤทธิ์เป็นข้อสังเกตที่มี
สายพันธุ์ของพ่อแม่ Bti สมมติว่าความเข้มข้นเท่ากันของแต่ละ
การแปล กรุณารอสักครู่..

มากกว่า 2 , 000 simulium ตัวอ่อนในแต่ละวัน ( 1800
นำมาละเอียดและ 200 ชนิด ) การวิเคราะห์ทางด้านเก็บ blackfly
) ระบุ กว่า 90% ของตัวอย่างเป็น simulium perflavum roubaud . ไม่มีการเปลี่ยนแปลงในอัตรานี้
) ในตัวอย่าง อีกชนิดที่พบ ได้แก่ เอส จักรพรรดิเพอร์ทิแน็กซ์
; S . serranum ; S . spinibranchium subpallidum s ;
;เอส botulibranchium ; S . inaequale ; S . subnigrum และ
. auripellitum . อย่างไรก็ตาม ประชาชนของแต่ละบุคคลและมี
เป็นเวลานาน และ เป็นผลให้ละเอียดแสดงที่นี่
ซึ่งต้องมีตัวเลขขนาดใหญ่ของตัวอ่อน ได้ทดลองใช้
สำหรับประชากรผสมเหล่านี้ เซลล์แสดง cry4aa cry4ba cry10aa cry11aa , , , และโปรตีน
cyt1aa คนเดียวหรือรวมกันได้ถูกใช้ใน เลือก
ละเอียดกับตัวอ่อนเหล่านี้ตามที่อธิบายไว้ข้างต้น densitometric
การวิเคราะห์การผลิตสารพิษจาก SDS หน้าพบว่าโปรตีนทั้งหมด
แสดงออกในอัตราผลตอบแทนประมาณเท่ากับฟันกราม ( ข้อมูล
ไม่แสดง ) การ cry4aa cry4ba , และโปรตีนจาก cry11aa 100%
ตายหนอนแต่ cyt1aa cry10aa และไม่ก่อให้เกิดการตายใน
สูงสุดความเข้มข้นทดสอบ ( 2500 มิลลิกรัมต่อมิลลิลิตร ) การรวมกันของ
สารพิษและสารผสมต่อไปนี้แล้วปริมาณผลิตยัง
อัตราการตาย 100% : cyt1aa cry4aa ; cyt1aa cry4ba ; cyt1aa
cry11aa ; cry4aa cry4ba ; cry4aa cry11aa ; cry4aa cry10
; cry4ba cry11aa ; cry4ba cry10aa ; cry11aa cry10aa ;
cyt1aa cry4aa cry4ba cry11aa cry10aa . เดี่ยวนี้และ
สารพิษผสมและต่ำจึงต้องทดสอบเพิ่มเติม
,ศึกษาความเข้มข้นที่ฆ่า 50% ของเป้าหมายประชากร
( LC ( , 50 ) ) ดังแสดงในตารางที่ 1 ไม่พบอัตราการตายใน
ของการควบคุม แต่ละสายพันธุ์ที่ผลิตสารพิษที่ผลิต ,
cry4ba เป็นส่วนใหญ่ที่เป็นพิษด้วย ) 92 แน่นอนมก. ตาม
โดย cry4aa ( 560 mg แน่นอน ) และ cry11aa ( 830 mg แน่นอน ) สารพิษชุด
แล้วทดสอบการเกื้อกูลของสารพิษต่าง ๆ
ส่วนผสมของตัวอย่างที่มี cry4ba และ cry4aa ที่เป็นพิษมากที่สุด
แบบผลิตรวมกันที่ใช้งานมากที่สุด ( LC ( , 50 ) 54 mg แน่นอน ) และปฏิสัมพันธ์นี้เห็นเป็น synergistic
ด้วยการเกื้อกูลด้าน 2.9 . การรวมกันของแต่ละอื่น ๆและส่วนประกอบ cry4ba
พิษ cry11aa cry4aa cry11aa
ยังเสริมฤทธิ์ ( SF 1.5 และ 1.8 ตามลำดับ ) ส่วนผสมของ
cry4ba หรือ cry11aa กับ cyt1aa ( ซึ่งไม่เป็นพิษคนเดียว )
พบปฏิสัมพันธ์ร่วมกันเช่นเดียวกับการรวมกันของ cry4ba
หรือ cry11aa กับ cry10aa ( ตารางที่ 1 ) ในทางตรงกันข้าม cry4aa Co administrated
กับ cry10aa ไม่ได้แสดงหลักฐานการส่งเสริมปฏิสัมพันธ์
แต่สารพิษร่วมกับ cyt1aa แสดง Synergist
ปฏิสัมพันธ์ นอกจากนี้ การบริหาร และ cry10aa cyt1aa
ที่ปลอดสารพิษ , คนเดียวยังไม่มีผลต่อตัวอ่อนความมีชีวิต
เมื่อรวมเข้าด้วยกันกับตัวอ่อน ส่วนผสมของสารพิษที่ผลิต
สายพันธุ์ระดับการเกื้อกูลกับ SF ของ
4.1 . ถึงระดับมาก ซึ่งพบว่ามีผู้ปกครอง
เมื่อยอะ สมมติว่า มีความเข้มข้นเท่ากัน ของแต่ละคน
การแปล กรุณารอสักครู่..
