Mature biofilms (48 h, 30 °C, BHIMn

Mature biofilms (48 h, 30 °C, BHIMnG) were washed once with 1ml PBS prior to the addition of either 100 μg/ml of DNase I (final concentration
in PBS; Sigma-Aldrich), 10 μg/ml of Proteinase K (Qiagen) or PBS
(as a control) and incubated at 30 °C for 1 h. After the treatment, the
biofilms were washed three times to remove enzymes prior to biofilm
quantification by both the CV assay and cell enumeration.
The influence of Proteinase K on the initial attachment was tested by
addition of Proteinase K (final concentration of 10 μg/ml) along with the
inoculated BHIMnG and after 1 or 2.5 h incubation at 30 °C, the medium
was removed and the wells were washed three times with 2 ml of PBS
to remove the unattached cells. Attached cells were enumerated on
MRS agar.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

Biofilms ผู้ใหญ่ (48 h, 30 ° C, BHIMnG) ถูกล้างครั้งเดียว ด้วย PBS 1ml ก่อนแห่งใด 100 μg/ml ของ DNase (สมาธิขั้นสุดท้ายของฉันใน PBS Sigma-Aldrich), 10 μg/ml ของ Proteinase K (Qiagen) หรือ PBS(เป็นตัวควบคุม) และ incubated ที่ 30 ° C สำหรับ 1 h หลังการรักษา การbiofilms ถูกล้างสามครั้งเอาเอนไซม์ก่อน biofilmนับ โดยทั้งที่ประวัติวิเคราะห์และเซลล์แจงนับอิทธิพลของ Proteinase K บนสิ่งที่แนบที่ต้นได้รับการทดสอบโดยเพิ่มเติม Proteinase K (เข้มข้นสุดท้ายของ μg 10 ml) ด้วยการinoculated BHIMnG และ หลังบ่ม h 1 หรือ 2.5 ที่ 30 ° C สื่อถูกเอาออก และมีล้างบ่อสามครั้ง ด้วย 2 ml ของ PBSการเอาออกเซลล์ unattached เซลล์แนบที่ระบุในMRS agar

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ไบโอฟิล์มผู้ใหญ่ (48 ชั่วโมง 30 องศาเซลเซียส BHIMnG) ถูกล้างครั้งเดียวกับ 1ml พีบีเอสก่อนที่จะมีการเพิ่มขึ้นของทั้ง 100 ไมโครกรัม / มิลลิลิตร DNase ฉัน
(ความเข้มข้นสุดท้ายในพีบีเอส; Sigma-Aldrich), 10 ไมโครกรัม / มิลลิลิตร Proteinase K ( Qiagen) หรือพีบีเอส
(เป็นตัวควบคุม) และบ่มที่อุณหภูมิ 30 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 1 ชั่วโมง หลังจากการรักษาที่ไบโอฟิล์มถูกล้างสามครั้งเพื่อเอาเอนไซม์ก่อนที่จะมีไบโอฟิล์มปริมาณทั้งทดสอบCV และนับเซลล์. อิทธิพลของ Proteinase K ในสิ่งที่แนบมาครั้งแรกได้รับการทดสอบโดยนอกเหนือจากProteinase K (ความเข้มข้นสุดท้าย 10 ไมโครกรัม / มิลลิลิตร ) พร้อมกับเชื้อBHIMnG และหลังวันที่ 1 หรือ 2.5 บ่มชั่วโมงที่อุณหภูมิ 30 องศาเซลเซียส, สื่อที่จะถูกลบออกและบ่อถูกล้างสามครั้งมี2 มิลลิลิตรพีบีเอสเพื่อขจัดเซลล์โสด เซลล์ที่แนบมาได้รับการระบุในอาหารเลี้ยงเชื้อ MRS

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ผู้ใหญ่ไบโอฟิล์ม ( 48 ) , 30 ° C , bhimng ) ซักครั้งนึง 1ml PBS ก่อนที่จะเพิ่มให้ 100 μ g / ml ตรวจหา ADNase ( สุดท้ายสมาธิ
ใน PBS ; ซิกม่า Aldrich ) , 10 μ g / ml โปร K ( เพิ่ม ) หรือ PBS
( ควบคุม ) โดยที่ 30 ° C เป็นเวลา 1 ชั่วโมงหลังการรักษา คือ ล้างไบโอฟิล์ม
3 ครั้งเพื่อเอาเอนไซม์ก่อนกล่าวคือ
ปริมาณโดยทั้งสองพันธุ์ในเซลล์การ .
อิทธิพลของโปรตีน K บนสิ่งที่แนบมาเริ่มต้นทดสอบโดย
เพิ่มโปรตีน K ( ความเข้มข้นสุดท้าย 10 μ g / ml ) พร้อมกับเชื้อ และหลังจาก bhimng
1 หรือ 2.5 H บ่มที่ 30 ° C (
ถูกเอาออก และ เวลส์ ได้ซักสามครั้งกับ 2 ml ของ PBS
เพื่อขจัดเซลล์ย .เซลล์มีการระบุในแนบ
. mr .