Isolation and sequence analysis of

Isolation and sequence analysis of genomic and cDNA of TOFL
The genomic fragment containing the TOFL gene was isolated from an L. esculentum cv. VFN8 genomic library. The library was screened with a PCR fragment of TOFL previously amplified with the use of two degenerated primers from the most conserved coding regions ofFLO and LFY genes.
The complete coding region of TOFL cDNA from both tomato wild type and fa genotypes was obtained by RT-PCR using a set of TOFL-specific primers (5′-CAA CAT GGA CCC AGA TGC TTT C-3′ and 5′-GAA GCA CAA TTA GAA ATG TGG C-3′). RT-PCR reactions were carried out with a commercial kit (Amersham–Pharmacia–Biotech) following the manufacturer’s instructions. The PCR products obtained were cloned in pGEM-T plasmid vectors, and sequenced with the use of fluorescent primers and a Pharmacia DNA sequencer.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

วิเคราะห์แยกและลำดับของ genomic cDNA ของ TOFL และไม่แยกส่วน genomic ประกอบด้วยยีน TOFL จากการ L. esculentum พันธุ์ VFN8 genomic ไลบรารี รีถูกฉาย ด้วยส่วน PCR ของ TOFL ก่อนหน้านี้ ขยาย ด้วยการใช้ไพรเมอร์ degenerated สองสุดนำรหัสภูมิภาค ofFLO และยีน LFYภูมิภาคสภาพสมบูรณ์ของ cDNA TOFL จากมะเขือเทศชนิดป่าและการศึกษาจีโนไทป์ของ fa ได้รับ โดย RT-PCR ใช้ชุด TOFL เฉพาะไพรเมอร์ (ซีเอเอโฮ 5′ CAT GGA ซีซีซีตู้ TGC ที C-3′ และ 5′-เฒ่า GCA ซีเอเอโฮ TTA เฒ่า ATG TGG C-3′) ปฏิกิริยา RT-PCR ได้ดำเนิน ด้วยชุดพาณิชย์ (Amersham – Pharmacia – เทคโนโลยีชีวภาพ) ตามคำแนะนำของผู้ผลิต ผลิตภัณฑ์ PCR ได้โคลนใน pGEM T plasmid เวกเตอร์ และเรียงลำดับ ด้วยการใช้ไพรเมอร์ที่เรืองแสงและ sequencer Pharmacia ดีเอ็นเอ

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การแยกและการวิเคราะห์ลำดับเบสของยีนและพันธุกรรมของจีโนม tofl
ส่วนที่มี tofl ยีนถูกแยกจาก L . มะเขือเทศพันธุ์ ห้องสมุดจีโนม vfn8 . ห้องสมุดฉายด้วย PCR ส่วนของ tofl ก่อนหน้านี้ของการใช้สองเสื่อมไพรเมอร์จากที่สุดเพื่อ offlo รหัสภูมิภาคและ
lfy ยีนรหัสภูมิภาคของสมบูรณ์ tofl cDNA จากประเภททั้งป่าและพันธุ์มะเขือเทศ เอฟเอได้โดย RT-PCR โดยใช้ไพรเมอร์ที่จำเพาะ tofl ( ชุดของ 5 ’ - caa แมวก๊ะ CCC AGA TGC TTT c-3 5 ’ - ’ GAA GAA ( GCA caa ATG tgg c-3 School ) ปฏิกิริยา RT-PCR พบว่ามีชุดพาณิชย์ ( ที่มุ่งมั่น––เทคโนโลยีชีวภาพ ) ทำตามคำแนะนำของผู้ผลิตpcr ผลิตภัณฑ์ที่ได้ทำการโคลนเวกเตอร์ pgem-t พลาสมิดและลำดับเบสด้วยการใช้ไพรเมอร์เรืองแสงและมุ่งมั่น DNA sequencer .