2.4. Determination of enzyme activi

2.4. Determination of enzyme activity
2.4.1. Enzyme extraction
All treated-samples were immediately kept in an ice-water bath
at 4 °C for no more than 2 h after the PEF treatment and while
conducting the enzyme extraction step. For the first setup, a 250 mL
centrifugation tube (Nalgene, New York, USA) was filled with 170 g of
the carrot–buffer mixture (approximately 45 g carrot mash and 125 g
phosphate buffer) and 7.305 g NaCl was added to create final concentration
of 1 M NaCl for enzyme extraction. For the carrot pieces, each of the
carrot was cut in half along the middle axis to obtain approximately 45 g
of carrot piece to be sampled for each enzyme assay. Together with
125 g of the PEF-treated phosphate buffer solution, the carrot was
blended (Waring Laboratory Science, Winsted, USA) at high speed
(not more than 20,000 rpm according to the manufacturer specification)
for 10 s. Another 250 mL a centrifugation tube (Nalgene, New
York, USA) was filled with the homogenised carrot–buffer mixture,
with an addition of salt to create final NaCl concentration of 1 M for enzyme
extraction. Each reference/control sample contained 45 g untreated
carrot (mash or solid piece) and 125 g phosphate buffer. The enzyme
extraction was conducted in triplicate for each sample.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.4 การกำหนดกิจกรรมของเอนไซม์2.4.1. เอนไซม์สกัดทั้งหมดถือว่าตัวอย่างถูกเก็บไว้ในอ่างอาบน้ำเป็นน้ำแข็งทันทีที่ 4 ° C สำหรับไม่เกิน 2 h หลัง จากรักษา PEF และขณะดำเนินการขั้นตอนการสกัดเอนไซม์ สำหรับการติดตั้งครั้งแรก 250 mLหลอด centrifugation (Nalgene นิวยอร์ก สหรัฐอเมริกา) ก็เต็มไป ด้วยของ 170 ก.ส่วนผสมแครอท – บัฟเฟอร์ (ประมาณ 45 กรัมผสมแครอทและ 125 gฟอสเฟตบัฟเฟอร์) และ 7.305 g NaCl เพิ่มเพื่อสร้างความเข้มข้นสุดท้ายของ NaCl M 1 สำหรับสกัดเอนไซม์ สำหรับชิ้นแครอท แต่ละแครอทที่ตัดครึ่งแกนกลางรับประมาณ 45 กรัมชิ้นแครอทเพื่อเป็นตัวอย่างสำหรับการวิเคราะห์แต่ละเอนไซม์ ร่วมกับg 125 ของโซลูชันรักษา PEF ฟอสเฟตบัฟเฟอร์ ยกผสมผสาน (Waring ห้องปฏิบัติการวิทยาศาสตร์ Winsted สหรัฐอเมริกา) ที่ความเร็วสูง(ไม่เกิน 20000 rpm ตามสเปคผู้ผลิต)10 s อีก 250 mL หลอด centrifugation (Nalgene ใหม่นิวยอร์ก สหรัฐอเมริกา) ก็เต็มไป ด้วยส่วนผสมของแครอทบัฟเฟอร์ homogenisedด้วยการเพิ่มเกลือ NaCl ความเข้มข้นสุดท้ายของ 1 เมตรสำหรับเอนไซม์สร้างสกัด แต่ละตัวอย่างอ้างอิง/ควบคุมอยู่ไม่ถูกรักษา 45 กรัมแครอท (คลุกเคล้าหรือชิ้นส่วนของแข็ง) และ 125 g ฟอสเฟตบัฟเฟอร์ เอนไซม์นี้มีดำเนินการสกัดใน triplicate สำหรับแต่ละตัวอย่าง

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.4 การกำหนดกิจกรรมของเอนไซม์
2.4.1 สกัดเอนไซม์ทั้งหมดตัวอย่างได้รับการรักษาที่ถูกเก็บไว้ทันทีในห้องอาบน้ำน้ำแข็งน้ำที่4 ° C เป็นเวลาไม่เกิน 2 ชั่วโมงหลังการรักษา PEF และในขณะที่การดำเนินการขั้นตอนการสกัดเอนไซม์ สำหรับการติดตั้งเป็นครั้งแรกที่เป็นมิลลิลิตร 250 หลอดหมุนเหวี่ยง (Nalgene, New York, USA) ที่เต็มไปด้วย 170 กรัมผสมแครอทบัฟเฟอร์(ประมาณ 45 กรัมบดแครอท 125 กรัมฟอสเฟตบัฟเฟอร์) และ 7.305 กรัมโซเดียมคลอไรด์ถูกเพิ่มเข้ามาในการสร้างครั้งสุดท้าย ความเข้มข้นของโซเดียมคลอไรด์1 M สำหรับการสกัดเอนไซม์ สำหรับชิ้นแครอทแต่ละแครอทถูกตัดในครึ่งตามแนวแกนกลางที่จะได้รับประมาณ 45 กรัมของชิ้นแครอทที่จะเก็บตัวอย่างสำหรับแต่ละการทดสอบการทำงานของเอนไซม์ ร่วมกับ125 กรัมฟอสเฟต PEF รับการรักษาสารละลายบัฟเฟอร์แครอทที่ถูกผสม(Waring ห้องปฏิบัติการวิทยาศาสตร์ Winsted สหรัฐอเมริกา) ที่มีความเร็วสูง(ไม่เกิน 20,000 รอบต่อนาทีตามข้อกำหนดของผู้ผลิต) เวลา 10 วินาที อีก 250 มิลลิลิตรหลอดหมุนเหวี่ยง (Nalgene, New York, USA) ที่เต็มไปด้วยส่วนผสมแครอทบัฟเฟอร์ homogenised, มีการเพิ่มของเกลือที่จะสร้างความเข้มข้นของโซเดียมคลอไรด์สุดท้ายของ 1 M เอนไซม์สกัด แต่ละอ้างอิง / ตัวอย่างการควบคุมที่มีอยู่ได้รับการรักษา 45 กรัมแครอท(บดหรือชิ้นส่วนที่เป็นของแข็ง) และ 125 กรัมฟอสเฟตบัฟเฟอร์ เอนไซม์สกัดได้ดำเนินการในเพิ่มขึ้นสามเท่าสำหรับแต่ละตัวอย่าง

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.4 . การวิเคราะห์กิจกรรมของเอนไซม์
เครื่องมือกำจัดเพื่อย้าย . การสกัดเอนไซม์
ทั้งหมดถือว่าจำนวนทันทีเก็บไว้ในน้ำแข็ง น้ำที่อาบ
ที่ 4 ° C ไม่เกิน 2 ชั่วโมงหลังการรักษาและดำเนินการในขณะที่
PEF เอนไซม์การสกัดขั้น สำหรับการติดตั้งครั้งแรก , 250 ml .
3 หลอด ( นาลจีน , นิวยอร์ก , สหรัฐอเมริกา ) เต็มไปด้วย 170 กรัม
แครอท–บัฟเฟอร์ ( ประมาณ 45 กรัม ผสมแครอทบดและ 125 g
ฟอสเฟตบัฟเฟอร์ ) และ NaCl 7.305 G เพิ่มสร้าง
1 M NaCl ความเข้มข้นสุดท้ายสำหรับการสกัดเอนไซม์ สำหรับแครอทชิ้นของแต่ละ
แครอทก็หั่นครึ่งตามแนวแกนกลางที่จะได้รับประมาณ 45 g
แครอทชิ้นให้เป็นตัวอย่างสำหรับแต่ละเอนไซม์ที่แบคทีเรีย ร่วมกับ
125 กรัมของ PEF ทำสารละลายฟอสเฟตบัฟเฟอร์ แครอทเป็น
ผสม ( winsted waring ห้องปฏิบัติการวิทยาศาสตร์ , ,สหรัฐอเมริกา )
ความเร็วสูง ( ไม่เกิน 20 , 000 รอบต่อนาทีตามที่ผู้ผลิตกำหนด )
10 . อีก 250 ml . มี 3 หลอด ( นาลจีนใหม่
นิวยอร์ก สหรัฐอเมริกา ) คือเต็มไปด้วย homogenised แครอทและบัฟเฟอร์ส่วนผสม
ด้วยนอกจากนี้เกลือเพื่อสร้างความเข้มข้นเกลือโซเดียมคลอไรด์สุดท้าย 1 M สำหรับการสกัดเอนไซม์

แต่ละอ้างอิง / ตัวอย่างควบคุม มีดิบ
45 กรัมแครอท ( บดหรือชิ้นส่วนของแข็ง ) และ 125 กรัมฟอสเฟตบัฟเฟอร์ การสกัดเอนไซม์
ดำเนินการทั้งสามใบสำหรับแต่ละตัวอย่าง