Fig. 1. Effect of porcine placenta

Fig. 1. Effect of porcine placenta extract on the activation of macrophage cells. (A) To test the cytotoxicity of porcine PE in mouse macrophage cell line, RAW 264.7 cells were cocultured with 10% PE for 8, 12 and 24 h. Cell viability was estimated at the indicated time points by Trypan Blue exclusion method. At each point untreated cells were used as control. (B) Porcine PE inhibits activation-dependent morphological change of RAW 264.7 cells upon LPS stimulation. Cells were cocultured overnight with 10% PE and then stimulated with LPS (1µg/ml). Cells were visualized under microscope to monitor morphological changes. (C) RAW 264.7 cells were cocultured overnight with 10% PE and then stimulated with LPS (1µg/ml). Total RNA was isolated and analyzed by quantitative real-time PCR. Relative expression level of the TNF-α in the LPS and PE + LPS samples were compared with the control group. Results are expressed as percentage expression of the genes by taking the expression of the gene in LPS treated sample as 100%. (D) RAW 264.7 cells (2×106 cells/well) were stimulated with LPS (1µg/ml) for 8 h and 1µg/ml brefeldin A (Sigma) was added 10 h before the end of culture. Intracellular TNF-α was analyzed by FACS. Error bars indicates SD. One (*) asterisk indicates p< 0.05. Data are representative of three independent experiments.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

Fig. 1 ผลของรกช่วงแยกบนการเปิดใช้งานของเซลล์ macrophage (A) การทดสอบ cytotoxicity ของ PE ช่วงในรายการเซลล์ macrophage เมาส์ RAW 264.7 เซลล์ถูก cocultured 10% PE สำหรับ 8, 12 และ 24 h. เซลล์ชีวิตถูกจัดประเมินจุดเวลาที่ระบุ โดยวิธีแยก Trypan Blue ในแต่ละ เซลล์ไม่ถูกรักษาถูกใช้เป็นตัวควบคุม (ข) ช่วง PE ยับยั้งขึ้นอยู่กับการเปิดใช้งานเปลี่ยนแปลงสัณฐานของ RAW 264.7 เซลล์เมื่อกระตุ้น LPS เซลล์ถูก cocultured ค้างคืน 10% PE และถูกกระตุ้น ด้วย LPS (1µg/ml) แล้ว เซลล์มี visualized ภายใต้กล้องจุลทรรศน์การตรวจสอบการเปลี่ยนแปลงสัณฐาน (ค) RAW 264.7 เซลล์ถูก cocultured ค้างคืน 10% PE และถูกกระตุ้น ด้วย LPS (1µg/ml) แล้ว อาร์เอ็นเอทั้งหมดแยกต่างหาก และวิเคราะห์ โดย PCR เชิงปริมาณแบบเรียลไทม์ นิพจน์ที่สัมพันธ์กับระดับของ TNF-αใน LPS และ PE + LPS อย่างถูกเปรียบเทียบกับกลุ่มควบคุม ผลลัพธ์จะแสดงเป็นค่าเปอร์เซ็นต์ของยีนโดยการใช้นิพจน์ของยีนนี้ใน LPS ตัวอย่างถือว่าเป็น 100% เซลล์ (D) RAW 264.7 (2 × 106 เซลล์/ดี) ถูกถูกกระตุ้น ด้วย LPS (มล 1µg) สำหรับ 8 h และ brefeldin 1µg/ml (ซิกมา) เพิ่ม h 10 ก่อนสิ้นวัฒนธรรม Intracellular TNF-αมีวิเคราะห์ ด้วย FACS แถบข้อผิดพลาดบ่งชี้ SD. จัน (*) หนึ่งแสดง p < 0.05 ข้อมูลเป็นตัวแทนของการทดลองอิสระ 3

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

มะเดื่อ 1. ผลของสารสกัดจากรกหมูในกระตุ้นการทำงานของเซลล์ macrophage (A) เพื่อทดสอบความเป็นพิษของ PE สุกรในสายเมาส์เซลล์ macrophage, RAW 264.7 เซลล์ถูก cocultured กับ PE 10% สำหรับ 8, 12 และ 24 ชั่วโมง ความมีชีวิตของเซลล์ที่ประมาณจุดเวลาที่ระบุโดย Trypan วิธีการยกเว้นสีฟ้า ในแต่ละจุดได้รับการรักษาเซลล์ที่ถูกนำมาใช้เป็นตัวควบคุม (B) Porcine PE ยับยั้งการเปลี่ยนแปลงทางสัณฐานวิทยายืนยันการใช้งานขึ้นอยู่กับ RAW 264.7 เซลล์เมื่อกระตุ้น LPS เซลล์ที่ถูก cocultured ค้างคืนกับ 10% PE และกระตุ้นแล้วด้วย LPS (1μg / ml) เซลล์ที่ถูกมองเห็นภายใต้กล้องจุลทรรศน์เพื่อติดตามการเปลี่ยนแปลงลักษณะทางสัณฐานวิทยา (C) RAW 264.7 เซลล์ถูก cocultured ค้างคืนกับ PE 10% และกระตุ้นแล้วด้วย LPS (1μg / ml) รวม RNA ถูกแยกและวิเคราะห์โดยเชิงปริมาณแบบ real-time PCR ระดับการแสดงออกของญาติของ TNF-αใน LPS และ PE + ตัวอย่าง LPS ถูกเมื่อเทียบกับกลุ่มควบคุม ผลการค้นหาจะแสดงเป็นร้อยละของการแสดงออกของยีนโดยการแสดงออกของยีนใน LPS ได้รับการรักษาตัวอย่างเป็น 100% (D) RAW 264.7 เซลล์ (2 × 106 เซลล์ / ดี) ได้รับการกระตุ้นด้วย LPS (1μg / ml) เป็นเวลา 8 ชั่วโมงและ1μg / ml brefeldin (Sigma) ถูกเพิ่มเข้ามา 10 ชั่วโมงก่อนที่จะสิ้นสุดของวัฒนธรรม ภายในเซลล์ TNF-αถูกวิเคราะห์โดยมาซึ่ง บาร์บ่งชี้ข้อผิดพลาด SD หนึ่ง (*) เครื่องหมายบ่งชี้ p <0.05 ข้อมูลเป็นตัวแทนของการทดลองสามอิสระ

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

รูปที่ 1 ผลของการใช้สารสกัดจากรกแกะในเซลล์แมคโครฟาจ . ( 1 ) ทดสอบความเป็นพิษของเลือดหมู PE ในเมาส์แมโครเฟจเซลล์ดิบ 264.7 cells cocultured กับ PE 10 % 8 , 12 และ 24 ชั่วโมง เซลล์ประมาณที่ระบุเวลา คะแนน โดยวิธีการยกเว้นไตรแพนสีฟ้า ในแต่ละจุดและเซลล์ที่ใช้ควบคุม( ข ) การเปลี่ยนแปลงขึ้นอยู่กับลักษณะการเปลี่ยนแปลงของ PE ยับยั้ง LPS กระตุ้นเซลล์เมื่อ 264.7 ดิบ . เซลล์มี cocultured ค้างคืนกับ PE 10 % แล้วกระตุ้นด้วยสเปรย์หล่อลื่น ( 1 µ g / ml ) เซลล์มีการมองเห็นภายใต้กล้องจุลทรรศน์เพื่อตรวจสอบการเปลี่ยนแปลงทางสัณฐานวิทยา . ( c ) วัตถุดิบ 264.7 cells cocultured ค้างคืนกับ PE 10 % แล้วกระตุ้นด้วยสเปรย์หล่อลื่น ( 1 µ g / ml )อาร์เอ็นเอทั้งหมดถูกแยก และวิเคราะห์เชิงปริมาณแบบ PCR ญาติแสดงระดับของ TNF - αในสเปรย์หล่อลื่นและ PE จำนวนเมื่อเทียบกับกลุ่มควบคุม ผลลัพธ์ที่ได้จะแสดงเป็นเปอร์เซ็นต์ของการแสดงออกของยีนโดยการแสดงออกของยีนในสเปรย์รักษาตัวอย่าง 100% ( D ) วัตถุดิบ 264 .7 เซลล์ ( 2 × 106 เซลล์ / ดี ) ถูกกระตุ้นด้วยสเปรย์หล่อลื่น ( 1 µ g / ml ) 8 H 1 µ g / ml brefeldin ( Sigma ) เพิ่ม 10 ชั่วโมงก่อนการสิ้นสุดของวัฒนธรรม ภายในเซลล์เม็ดเลือดขาวαโดยใช้ facs . แถบข้อผิดพลาดแสดง SD ( * ) เครื่องหมายดอกจันระบุ p < 0.05 ข้อมูลตัวแทนสามการทดลองที่เป็นอิสระ