2.1. Collection of legume seedsSeed

2.1. Collection of legume seeds
Seed samples of broad beans (Vicia faba), kidney
beans (P. vulgaris), cowpeas (V. sinensis), chickpeas (C.
arietinum) and peas (P. sativum) were collected from
different localities in Almadinah Almunawwarah, Saudi
Arabia. They were placed in sterilized polyethylene bags
and transferred directly to themicrobiological laboratory
for fungal analysis.
2.2. Isolation and identification of fungi
Fungi were isolated from legume seeds by the
standard blotter method (baiting) [28] on potato dextrose
agar plates (potato 200 g, dextrose 20 g, agar 20 g,
in 1 L distilled water) supplemented with amoxicillin
(0.5 mg/ml) as an antibacterial agent. Five seeds per
dish and five dishes were used for each type of seeds
as replicates. A total of 125 seed samples (25 samples
of each type of legume) were assayed for their fungal
content. All dishes were incubated at 28 ◦C for 6
days. At the end of the incubation period, the developing
fungi were counted, identified and calculated on
25 seeds for each sample. Fungi were identified on the
basis of macro- and microscopic characteristics. All fungal
cultures were confirmed by studying the morphology
of colonies, microscopic examination and characterization,
spore shape and colour by comparison with fungal
identification references
2.3. Screening of fungi for α-amylase production
Forty-six fungal species in 26 genera from different
legume seeds were assayed for their ability to produce
amylase enzyme. Fungi were cultured on solid starch
yeast extract agar medium (soluble starch, 5.0 g; yeast
extract, 2.0 g; KH2PO4, 1.0 g; MgSO4.7H2O, 0.5 g and
agar, 15 g) [38]. Fungal isolates were tested for amylase
production by starch hydrolysis. Starch agar medium
(peptone, 0.5 g; beef extract, 0.15 g; yeast extract, 0.15 g;
NaCl, 0.5 g;starch, 1 g; agar, 2 g; distilled water, 100 ml)
was inoculated with fungi and incubated at 30 ◦C, then
flooded with iodine solution (iodine, 0.2 ml; potassium
iodide, 0.4 ml; distilled water, 100 ml). A clear zone
around fungal growth indicated the production of amylase
[39]. On this basis, Aspergillus niger and Rhizopus
stolonifer were selected for further studies on amylase
production.

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.1 คอลเลกชันของเมล็ดถั่วตัวอย่างเมล็ดพันธุ์ถั่วกว้าง (ถั่วปากอ้า) ไตถั่ว(พีขิง), cowpeas (โวลต์ sinensis) ถั่วชิกพี (คarietinum) และถั่ว (พี sativum) ที่ถูกเก็บรวบรวมจากท้องถิ่นที่แตกต่างกันในAlmadinah Almunawwarah ซาอุดิอารเบีย พวกเขาถูกวางไว้ในถุงพลาสติกชนิดผ่านการฆ่าเชื้อและโอนโดยตรงไปยังห้องปฏิบัติการ themicrobiological สำหรับการวิเคราะห์เชื้อรา. 2.2 การแยกและบัตรประจำตัวของเชื้อราเชื้อราที่แยกได้จากเมล็ดถั่วโดยวิธีกระดาษซับหมึกมาตรฐาน(เหยื่อ) ได้ [28] ในเดกซ์โทรสมันฝรั่งแผ่นวุ้น(มันฝรั่ง 200 กรัม, dextrose 20 กรัม, วุ้น 20 กรัมใน1 ลิตรน้ำกลั่น) เสริมด้วย amoxicillin ( 0.5 mg / ml) เป็นตัวแทนต้านเชื้อแบคทีเรีย ห้าเมล็ดต่อจานและห้าอาหารที่ถูกนำมาใช้สำหรับแต่ละประเภทของเมล็ดเป็นซ้ำ ทั้งหมด 125 ตัวอย่างเมล็ดพันธุ์ (25 ตัวอย่างของพืชตระกูลถั่วชนิดของแต่ละคน) ถูก assayed สำหรับเชื้อราของพวกเขาเนื้อหา อาหารทุกจานถูกบ่มที่ 28 ◦Cเป็นเวลา 6 วัน เมื่อสิ้นสุดระยะเวลาการบ่มที่พัฒนาเชื้อรานับการระบุและการคำนวณบน25 เมล็ดสำหรับแต่ละตัวอย่าง เชื้อราที่ถูกระบุบนพื้นฐานของลักษณะแมโครและกล้องจุลทรรศน์ ทั้งหมดเชื้อราวัฒนธรรมที่ได้รับการยืนยันโดยการศึกษาสัณฐานวิทยาของอาณานิคมตรวจด้วยกล้องจุลทรรศน์และลักษณะรูปร่างและสปอร์สีโดยการเปรียบเทียบกับเชื้อราประจำตัวอ้างอิง2.3 การคัดกรองของเชื้อราสำหรับαอะไมเลสผลิตเชื้อราสี่สิบหกสายพันธุ์ใน 26 จำพวกที่แตกต่างกันจากเมล็ดถั่วถูกassayed สำหรับความสามารถในการผลิตเอนไซม์อะไมเลส เชื้อรามาเลี้ยงบนแป้งที่เป็นของแข็งยีสต์สารสกัดจากกลางวุ้น (แป้งที่ละลายน้ำได้ 5.0 กรัมยีสต์สารสกัดจาก2.0 กรัม; KH2PO4 1.0 กรัม MgSO4.7H2O, 0.5 กรัมและวุ้น15 กรัม) [38] สายพันธุ์เชื้อราได้รับการตรวจอะไมเลสผลิตโดยการย่อยสลายแป้ง แป้งกลางวุ้น(เปปโตน, 0.5 กรัมสารสกัดจากเนื้อวัว, 0.15 กรัมสารสกัดจากยีสต์ 0.15 กรัมโซเดียมคลอไรด์, 0.5 กรัมแป้ง 1 กรัม; วุ้น 2 กรัมน้ำกลั่น 100 มล.) ได้รับเชื้อด้วยเชื้อราและบ่มที่ 30 ◦Cแล้วน้ำท่วมด้วยวิธีการแก้ปัญหาไอโอดีน(ไอโอดีน 0.2 มล.; แตสเซียมไอโอไดด์0.4 มล. น้ำกลั่น 100 มล.) โซนที่ชัดเจนรอบเจริญเติบโตของเชื้อราชี้ให้เห็นการผลิตของอะไมเลส[39] บนพื้นฐานนี้ไนเจอร์ Aspergillus และ Rhizopus stolonifer ได้รับเลือกสำหรับการศึกษาเพิ่มเติมเกี่ยวกับอะไมเลสผลิต

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.1 . คอลเลกชันของถั่วเมล็ดถั่วเมล็ด
ตัวอย่างกว้าง ( ถั่วปากอ้า ) , ถั่วไต
( P . vulgaris ) cowpeas ( V . ไซแนนซิส ) , chickpeas ( C .
arietinum ) และถั่ว ( หน้า sativum ) สุ่มเก็บจากพื้นที่ที่แตกต่างกันใน almadinah

almunawwarah , ซาอุดิอารเบีย พวกเขาอยู่ในถุง polyethylene ฆ่าเชื้อและโอนโดยตรง


themicrobiological ห้องปฏิบัติการวิเคราะห์เชื้อรา
2.2 .การแยกและจำแนกเชื้อราเชื้อราที่แยกได้จากเมล็ดถั่ว

วิธีดูดซึมด้วยมาตรฐาน ( เหยื่อ ) [ 28 ] บนอาหาร potato dextrose agar (
แผ่นมันฝรั่ง 200 กรัม น้ำผึ้ง 20 กรัม ขนาด 20 g ,
1 L น้ำกลั่นที่เติม amoxicillin
( 0.5 mg / ml ) เป็นตัวแทนต้านเชื้อแบคทีเรีย . ห้าเมล็ดต่อ
จานและห้าจานที่ใช้สำหรับแต่ละชนิดของเมล็ดพืช
เป็นได้แก่จำนวน 125 ตัวอย่างเมล็ดพันธุ์ ( 25 ตัวอย่าง
แต่ละชนิด และมีปริมาณเชื้อรา
) เนื้อหาของพวกเขา อาหารทั้งหมดที่อุณหภูมิ 28 ◦ C
6 วัน ที่จุดสิ้นสุดของระยะเวลาการพัฒนา
ราถูกนับระบุ และคำนวณ
25 เมล็ดสำหรับแต่ละตัวอย่าง เชื้อราที่ระบุบนพื้นฐานของแมโคร -
และลักษณะ ด้วยกล้องจุลทรรศน์ เชื้อรา
ทั้งหมดวัฒนธรรมที่ได้รับการยืนยันจากการศึกษาสัณฐานวิทยา
ของการล่าอาณานิคม และ การตรวจสอบด้วยกล้องจุลทรรศน์ , รูปร่างและสีโดย
สปอร์เชื้อรา

รหัสอ้างอิงเปรียบเทียบกับ 2.3 การคัดเลือกเชื้อราที่ผลิตเอนไซม์อะไมเลสแอลฟา
สี่สิบหกเชื้อราชนิด 26 สกุลจากเมล็ดถั่วมีปริมาณแตกต่างกัน

สำหรับความสามารถในการผลิตเอนไซม์อะไมเลส . เชื้อรา เพาะเลี้ยงบน
แป้งแข็งสารสกัดจากยีสต์อาหารวุ้น ( ละลายแป้ง , 5.0 กรัมยีสต์สกัด ( ;
, G ; kh2po4 1.0 g ; mgso4.7h2o 0.5 กรัมและ
ขนาด 15 กรัม ) [ 38 ] แยกเชื้อราทดสอบการผลิตเอนไซม์อะไมเลส
โดยการย่อยแป้ง แป้งอาหารวุ้น
( extract 0.5 กรัม ; สารสกัดจากเนื้อ 0.15 กรัม ; สารสกัดจากยีสต์ , 0.15 g ;
เกลือแกง 0.5 กรัม ; แป้ง 1 g ; วุ้น 2 g ; น้ำกลั่น 100 มิลลิลิตร )
เป็นเชื้อที่มีเชื้อราบ่มที่ 30 แล้ว
◦ Cน้ำท่วมกับไอโอดีน ( ไอโอดีน , 0.2 มิลลิลิตร สารละลายโพแทสเซียมไอโอไดด์ ;
, 0.4 มิลลิลิตร ; น้ำกลั่น 100 มิลลิลิตร ) ล้างโซน
รอบของเชื้อรา พบผลิตอะไมเลส
[ 39 ] บนพื้นฐานนี้และ เชื้อรา Aspergillus niger
stolonifer ได้แก่การผลิตเอนไซม์อะไมเลส