We have developed methods for quant

We have developed methods for quantitative extraction and analysis of zeins from maize (Zea mays L.) flour. Extraction involved solubilization of total endosperm proteins in an alkaline buffer containing SDS and 2-mercaptoethanol with subsequent precipitation of nonzein proteins by the addition of ethanol to 70%. Analysis of these proteins by SDS-PAGE with Coomassie blue staining and by Western blotting and ELISA assay with zein antibodies revealed that this extraction method is more quantitative than the traditional Landry-Moureaux procedure, especially for the β- and γ-zeins. This method was used to extract and analyze the zein content of several `Quality Protein Maize' (QPM) varieties developed by the International Maize and Wheat Improvement Center. QPM varieties contain `modifier genes' that confer a vitreous phenotype on opaque-2 genotypes, while maintaining the elevated levels of lysine and tryptophan characteristic of this mutant. This analysis revealed that the QPM types contain 2 to 4 times the amount of the γ-zein than unmodified opaque-2 or normal maize varieties. Possible relationships between the high expression of the γ-zein and the modified opaque phenotype are discussed.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

เราได้พัฒนาวิธีการสกัดเชิงปริมาณและการวิเคราะห์ของ zeins จากข้าวโพดแป้ง (ซี mays L.) แยกเกี่ยวข้อง solubilization ของเอนโดสเปิร์มรวมโปรตีนในบัฟเฟอร์เป็นด่างที่ประกอบด้วย SDS และ 2-mercaptoethanol กับฝนต่อมาของโปรตีน nonzein ด้านนอกของเอทานอล 70% วิเคราะห์โปรตีนเหล่านี้ โดย SDS-หน้ากับย้อมสี Coomassie blue และ blotting วิธีตะวันตกและการทดสอบ ELISA กับแอนตี้ zein เปิดเผยว่า นี้หากสกัดด้วยวิธีเชิงปริมาณมากขึ้นกว่าตอน Landry Moureaux ดั้งเดิม โดยเฉพาะอย่างยิ่งสำหรับการβ - และγ-zeins วิธีนี้ถูกใช้ในการแยก และวิเคราะห์เนื้อหา zein พันธุ์หลาย 'คุณภาพโปรตีนข้าวโพด' (QPM) พัฒนา โดยศูนย์พัฒนาข้าวสาลีและข้าวโพดนานาชาติ พันธุ์ QPM ประกอบด้วย 'ปรับเปลี่ยนยีน' ที่ประสาท phenotype คล้ายแก้วในการศึกษาจีโนไทป์ 2 แบบทึบ ในขณะที่รักษาระดับสูงของไลซีนและทริปโตเฟนลักษณะของ mutant นี้ วิเคราะห์นี้เปิดเผยว่า ชนิด QPM ประกอบด้วย 2 4 ครั้งจำนวน zein γกว่า unmodified ทึบแสง-2 หรือพันธุ์ข้าวโพดปกติ ได้ความสัมพันธ์ระหว่างค่าสูงของγ zein และ phenotype ทึบแก้ไขจะกล่าวถึง

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

เราได้มีการพัฒนาวิธีการสกัดและการวิเคราะห์เชิงปริมาณของ zeins จากข้าวโพด (Zea mays L. ) แป้ง ที่เกี่ยวข้องกับการสกัดการละลายของโปรตีน endosperm รวมในบัฟเฟอร์อัลคาไลน์ที่มี SDS และ 2 mercaptoethanol กับการเร่งรัดตามมาของโปรตีน nonzein โดยนอกเหนือจากเอทานอล 70% การวิเคราะห์ของโปรตีนเหล่านี้โดย SDS-PAGE กับการย้อมสี Coomassie สีฟ้าและซับตะวันตกและทดสอบ ELISA กับแอนติบอดี Zein เปิดเผยว่าวิธีการสกัดนี้เป็นปริมาณมากขึ้นกว่าเดิมขั้นตอน Landry-Moureaux โดยเฉพาะอย่างยิ่งสำหรับβ-และγ-zeins วิธีการนี​​้ถูกใช้ในการสกัดและวิเคราะห์เนื้อหา Zein หลาย `ข้าวโพดโปรตีนคุณภาพ '(QPM) สายพันธุ์ที่พัฒนาโดยข้าวโพดและข้าวสาลีนานาชาติปรับปรุงศูนย์ พันธุ์ QPM มี `ยีนปรับปรุง 'ที่ปรึกษาฟีโนไทป์น้ำเลี้ยงในทึบแสง-2 สายพันธุ์ในขณะที่รักษาระดับสูงของไลซีนและลักษณะของโพรไบโอกลายพันธุ์นี้ การวิเคราะห์นี้เปิดเผยว่าประเภท QPM มี 2-4 ครั้งปริมาณของγ-Zein กว่าทึบแสง-2 ยังไม่แปรปกติหรือพันธุ์ข้าวโพดเลี้ยงสัตว์ ความสัมพันธ์ที่เป็นไปได้ระหว่างการแสดงออกสูงของγ-Zein และฟีโนไทป์ทึบแสงการแก้ไขที่จะกล่าวถึง

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

เราได้พัฒนาวิธีการสำหรับการสกัดและการวิเคราะห์เชิงปริมาณ zeins จากข้าวโพด ( Zea mays L . ) แป้ง การสกัด การสกัดโปรตีนที่เกี่ยวข้องทั้งหมดของหน่วยคำในด่าง buffer ที่มี SDS และอย่างเดียวกับการตกตะกอนของโปรตีน nonzein ตามมาโดยการเติมเอทานอล 70%การวิเคราะห์โปรตีนเหล่านี้ถูกกับเหล่านี้น่าจะเป็นสีฟ้าคราบและ Western blotting และ ELISA ตรวจสอบด้วย ซึ่งแอนติบอดีพบว่าวิธีสกัดเป็นปริมาณกว่าดั้งเดิม แลนดี้ moureaux ขั้นตอนโดยเฉพาะอย่างยิ่งสำหรับบีตา - γ - zeins .วิธีนี้ถูกใช้เพื่อแยกและวิเคราะห์ซึ่งเนื้อหาคุณภาพข้าวโพดโปรตีนหลาย ` ' ( qpm ) พันธุ์ที่พัฒนาโดยข้าวโพดข้าวสาลีและศูนย์การพัฒนาระหว่างประเทศ . พันธุ์ที่ประกอบด้วยยีน qpm ` ' หารือที่มีเศษแก้วบน opaque-2 พันธุ์ , ในขณะที่รักษาระดับสูงของไลซีน และทริปนี้ลักษณะของพวกกลายพันธุ์การวิเคราะห์พบว่าประเภท qpm ประกอบด้วย 2 ถึง 4 เท่าของγ - ซึ่งมากกว่าที่แปร opaque-2 หรือปกติพันธุ์ข้าวโพด ความสัมพันธ์ที่เป็นไปได้ระหว่างการแสดงออกสูงของγ - ซึ่งการทึบแสงและการได้ถูก