Tomato (Solanum lycopersicum L. cv Rutgers), pepper (Capsicum
annuum L. cv Marengo), Nicotiana benthamiana, and squash (Cucurbita
pepo L. cv Zucchini Elite) were germinated and seedlings were used
for all experiments in this study. Plants were grown under greenhouse
conditions with 26 °C daytime temperature and 20 °C nighttime
temperature, and 16-h days. Viral RNAs of twelve CMV mutants (a, c,
d, e, f, g, h, i, j, k, l, and m) were mixed in equal concentration and
inoculated to seedlings of the host young true leaves or cotyledons as
described previously (Li and Roossinck, 2004). Mutants a, c, d, and m
are silent changes in the coat protein gene; the remaining mutants are
found in the 3′ non-translated region of CMV RNA 3. Each mutation
consists of a single nucleotide change that introduces a restriction
enzyme site, allowing the mutant to be easily monitored using an
RFLP-like assay (Li and Roossinck, 2004). Three independent experiments
using three plants per experiment were carried out for each of
the four hosts used in this study.
มะเขือเทศ (Solanum lycopersicum L. cv Rutgers), พริกไทย (พริกหวานannuum L. cv แรมาเรนโก), Nicotiana benthamiana และสควอช (Cucurbitapepo L. cv ซูกินี Elite) มีเปลือกงอก และใช้กล้าไม้สำหรับการทดลองทั้งหมดในการศึกษานี้ มีปลูกพืชภายใต้เรือนกระจกด้วย 26 ° C กลางวัน 20 ° C และอุณหภูมิเวลากลางคืนอุณหภูมิ และ 16 h วัน RNAs ไวรัสของ CMV 12 สายพันธุ์ (a, cd, e, f, g, h ฉัน j, k, l และ m) ถูกผสมในความเข้มข้นเท่ากัน และinoculated จะกล้าไม้ใบไม้จริงหนุ่มโฮสต์หรือ cotyledons เป็นอธิบายไว้ก่อนหน้านี้ (Li และ Roossinck, 2004) สายพันธุ์ a, c, d และ mมีสภาพการเปลี่ยนแปลงในยีนโปรตีนตรา สายพันธุ์ที่เหลืออยู่พบในภูมิภาคนี้ไม่ได้แปล 3′ CMV อาร์เอ็นเอ 3 การกลายพันธุ์แต่ละประกอบด้วยการเปลี่ยนแปลงของนิวคลีโอไทด์หนึ่งที่แนะนำข้อจำกัดไซต์เอนไซม์ ให้ mutant จะได้ตรวจสอบโดยใช้การวิเคราะห์เหมือน RFLP (Li และ Roossinck, 2004) สามการทดลองอิสระใช้สามพืชต่อทดลองได้ดำเนินการสำหรับแต่ละโฮสต์สี่ที่ใช้ในการศึกษานี้
การแปล กรุณารอสักครู่..

มะเขือเทศ (Solanum lycopersicum L. พันธุ์รัตเกอร์ส), พริก (Capsicum
annuum L. พันธุ์เต็มที) Nicotiana benthamiana และสควอช (Cucurbita
pepo L. พันธุ์บวบยอด) ได้รับการงอกและต้นกล้าที่ถูกนำมาใช้
สำหรับการทดลองทั้งหมดในการศึกษาครั้งนี้ พืชที่ปลูกเรือนกระจกภายใต้
เงื่อนไขที่มี 26 ° C อุณหภูมิเวลากลางวันและ 20 ° C กลางคืน
อุณหภูมิและวันที่ 16 ชั่วโมง RNAs ไวรัสสิบสองกลายพันธุ์ CMV (A, C,
D, E, F, G, H, I, J, K, L และม.) ได้รับการผสมในความเข้มข้นเท่ากันและ
เชื้อจะกล้าของโฮสต์ใบจริงหนุ่มสาวหรือใบเลี้ยงเป็น
อธิบายไว้ก่อนหน้า (Li และ Roossinck, 2004) การกลายพันธุ์, C, D, และม.
มีการเปลี่ยนแปลงในความเงียบยีนโปรตีนหุ้ม; การกลายพันธุ์ที่เหลือจะ
พบในภูมิภาค 3 'ที่ไม่ได้แปล CMV RNA 3. การกลายพันธุ์แต่ละ
ประกอบด้วยการเปลี่ยนแปลงเบื่อหน่ายเดียวที่แนะนำข้อ จำกัด
เว็บไซต์เอนไซม์ที่ช่วยให้การกลายพันธุ์ที่จะตรวจสอบได้ง่ายโดยใช้
การทดสอบ RFLP เหมือน (Li และ Roossinck , 2004) สามทดลองที่เป็นอิสระ
โดยใช้สามพืชต่อการทดลองได้ดำเนินการสำหรับแต่ละ
สี่โฮสต์ที่ใช้ในการศึกษาครั้งนี้
การแปล กรุณารอสักครู่..

มะเขือเทศ ( ไม่สามารถจะยอมรับได้ lycopersicum L . cv รัท ) พริก ( พริกหวาน
annuum L . cv Marengo ) ขนะ benthamiana , สควอชและสายพันธุ์
ปีโป้ L . พันธุ์บวบ Elite ) งอกและต้นกล้าที่ใช้
สำหรับการทดลองทั้งหมดในการศึกษานี้ พืชที่ปลูกภายใต้สภาพโรงเรือน
26 °องศาเซลเซียสและอุณหภูมิ 20 ° C อุณหภูมิกลางวันและกลางคืน
16-h วัน ไวรัส RNAs 12 ซีเ มวีกลายพันธุ์ ( A , C ,
DE , F , G , H , I , J , K , L , M ) และถูกผสมในความเข้มข้นเท่ากันและ
เชื้อต้นกล้าโฮสต์หนุ่มจริงใบหรือการแสดงออกเป็น
อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ ( ลี้ และ roossinck , 2004 ) สายพันธุ์ A , C , D , และ M
เปลี่ยนเงียบในโปรตีนหุ้มอนุภาค ; สายพันธุ์ที่เหลืออยู่
3 นั้นไม่พบในภูมิภาคของซีเ มวีแปล RNA 3 การกลายพันธุ์
แต่ละประกอบด้วยนิวคลีโอไทด์เดี่ยวเปลี่ยนแนะนำจำกัด
เอนไซม์กลายพันธุ์เป็นเว็บไซต์ที่ช่วยให้สามารถตรวจสอบการใช้
: ชอบ assay ( หลี่ และ roossinck , 2004 ) สามอิสระการทดลอง
ใช้สามต้นต่อการทดลองดำเนินการสำหรับแต่ละ
4 โฮสต์ที่ใช้ในการศึกษาครั้งนี้
การแปล กรุณารอสักครู่..
