2.9. Determination of Metallothione

2.9. Determination of Metallothionein Amount
The pellet of 1 ml of S. aureus incubated for 24 hours at 37 ◦C in LB medium was resuspended in 1 ml of phosphate buffer (pH 7),after that the sample was denaturated in thermo block at 99 ◦C for 20 minutes and centrifuged for 20 minutes at 25 000 rpm. Supernatant from the sample was used for electrochemical detection. Electrochemical detection was carried out using the method of differential pulse voltammetry (Raspor et al., 2001; Sevcikova et al.,2013) (three electrodes consisted of working mercury drop elec-trode (HMDE), reference silver-chloride electrode Ag/AgCl/3 M KCland auxiliary carbon electrode). The analysed samples were deoxi-dized by argon for 120 seconds. As a supporting electrolyte, Brdickasolution, which contained 1 mM [Co(NH3)6]Cl3and 1 M ammo-nium buffer (NH3(aq) + NH4Cl, pH 9.6), was used as a supporting electrolyte. This electrolyte was changed after each analysis ofsample. The parameters for measurements were following: initialpotential -0.7 V, final potential -1.75 V, the time interval 0.2 s, steppotential 2 mV, amplitude -250 mV.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.9 การกำหนดจำนวน Metallothioneinเม็ดของ ml 1 ของหมอเทศข้างลาย S. incubated ตลอด 24 ชั่วโมงที่ 37 ◦C ในปอนด์ถูก resuspended ใน 1 ml ของฟอสเฟตบัฟเฟอร์ (pH 7), หลังจากตัวอย่างถูก denaturated ในเทอร์โมบล็อกที่ 99 ◦C 20 นาที และ centrifuged 20 นาทีที่ 25 000 รอบต่อนาที Supernatant จากตัวอย่างที่ใช้ตรวจทางเคมีไฟฟ้า ตรวจไฟฟ้าถูกดำเนินการโดยใช้วิธีของชีพจรส่วน voltammetry (Raspor และ al., 2001 Sevcikova et al., 2013) (หุงตสามประกอบด้วยปรอทหล่น elec-trode (HMDE), อ้างอิงอิเล็กโทรดคลอไรด์ซิลเวอร์ Ag/AgCl/3 M KCland เสริมคาร์บอนอิเล็กโทรดทำงาน) ตัวอย่าง analysed ได้ deoxi-dized โดยอาร์กอน 120 วินาที เป็นแบบอิเล็กโทรสนับสนุน Brdickasolution ซึ่งมีอยู่ 1 มม. [Co (NH3) 6] Cl3and 1 M กระสุน-nium บัฟเฟอร์ (NH3(aq) + NH4Cl, pH 9.6), ใช้เป็นอิเล็กโทรสนับสนุน อิเล็กโทรนี้ถูกเปลี่ยนแปลงหลังจาก ofsample แต่ละการวิเคราะห์ พารามิเตอร์สำหรับการประเมินได้ดังต่อไปนี้: initialpotential-0.7 V สุดท้ายเป็น-1.75 V เวลาช่วง 0.2 s, steppotential 2 mV, mV คลื่น-250

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.9 การกำหนดจำนวนเงิน Metallothionein
เม็ด 1 มิลลิลิตรของเชื้อ S. aureus บ่มเป็นเวลา 24 ชั่วโมงที่อุณหภูมิ 37 ◦Cในสื่อ LB ถูก resuspended ใน 1 มิลลิลิตรของฟอสเฟตบัฟเฟอร์ (pH 7) หลังจากที่ตัวอย่างได้รับการ denaturated ในการป้องกันความร้อนที่ 99 ◦C เป็นเวลา 20 นาทีและปั่นเป็นเวลา 20 นาทีที่ 25 000 รอบต่อนาที ใสจากกลุ่มตัวอย่างที่ใช้สำหรับการตรวจสอบทางเคมีไฟฟ้า การตรวจสอบไฟฟ้าได้รับการดำเนินการโดยใช้วิธีการที่แตกต่างกัน Voltammetry ชีพจร (Raspor et al, 2001;.. Sevcikova, et al, 2013) (สามขั้วไฟฟ้าประกอบด้วยการทำงานลดลงปรอท Elec-Trode (HMDE), อิเล็กโทรดเงินคลอไรด์อ้างอิง Ag / AgCl / 3 M KCland ขั้วคาร์บอนเสริม) วิเคราะห์ตัวอย่าง deoxi-dized โดยอาร์กอนเป็นเวลา 120 วินาที ในฐานะที่เป็นอิเล็กโทรไลสนับสนุน Brdickasolution ซึ่งประกอบด้วย 1 มิลลิ [Co (NH3) 6] Cl3and 1 M บัฟเฟอร์กระสุน-เนียม (NH3 (AQ) + NH4Cl ค่า pH 9.6) ถูกนำมาใช้เป็นอิเล็กโทรไลสนับสนุน อิเล็กโทรไลนี่คือการเปลี่ยนแปลงหลังจากที่แต่ละวิเคราะห์ ofsample พารามิเตอร์สำหรับการตรวจวัดที่ได้รับต่อไปนี้: initialpotential -0.7 V ที่มีศักยภาพสุดท้าย -1.75 V เวลาช่วงเวลา 0.2 วินาที, steppotential 2 mV กว้าง -250 mV

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.9 . การหาปริมาณการสกัด
เม็ด 1 มิลลิลิตรของ S . aureus บ่มที่ 37 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 24 ชั่วโมง◦เซส resuspended 1 มิลลิลิตร ) ในฟอสเฟตบัฟเฟอร์ pH 7 ) หลังจากที่จำนวน denaturated ใน Thermo บล็อกที่ 99 ◦ C เป็นเวลา 20 นาทีและ 20 นาทีที่ระดับ 25 , 000 รอบต่อนาที สูงจากตัวอย่างที่ใช้ในการตรวจสอบทางเคมีไฟฟ้าการตรวจสอบทางเคมีพบว่าใช้วิธีดิฟเฟอเรนเชียลพัลส์แสงยูวี ( raspor et al . , 2001 ; sevcikova et al . , 2013 ) ( สามขั้วไฟฟ้าประกอบด้วยทำงานปรอทลดลง elec ชนะ ( ตัว ) , อ้างอิงซิลเวอร์คลอไรด์ขั้วโดย 0.46% / 3 ม. kcland เสริมขั้วไฟฟ้าคาร์บอน ) ทั้งหมดจำนวน deoxi dized โดยอาร์กอน 120 วินาที เป็นสารละลายอิเล็กโทรไลต์เกื้อหนุนbrdickasolution ซึ่งมีอยู่ 1 มม. [ CO ( nh3 ) 6 ] 1 M cl3and กระสุน Condo บัฟเฟอร์ ( nh3 ( AQ ) 4 . pH 9.6 ) ถูกใช้เป็นสารละลายอิเล็กโทรไลต์เกื้อหนุน . ผลนี้ถูกเปลี่ยนหลังจากที่แต่ละการวิเคราะห์อิสระคือ พารามิเตอร์สำหรับการวัดมีดังต่อไปนี้ : initialpotential - 0.7 v สุดท้าย ศักยภาพ -1.75 V ช่วงเวลา 0.2 s steppotential 2 MV ขนาด - 250 MV .