2.6. Flow cytometrySpike tips of 1

2.6. Flow cytometry
Spike tips of 1 cm length were chopped, using a razor blade, in nuclear extraction buffer obtained from the High Resolution Kit for Plant DNA (Partec, Münster, Germany) provided by the manufacturer of the flow cytometer. The extraction buffer was a low pH solution containing Triton X-100. The extract was filtered through a 50-mm nylon mesh and the medium with the isolated nuclei was collected. A buffer with the fluorescent DNA stain 4,6-diamidino- 2-phenylindole (DAPI), also part of the standard reagent set (Partec) was added, and the solution was vortexed. The DNA content of the isolated nuclei was analyzed using a flow cytometer (Ploidy Analyzer, Partec). DNA levels were obtained from a total of 5000 nuclei. On the basis of histograms obtained from cytometry, the ratio of nuclei with decreased DNA was calculated as described in Yamada et al. (2006). Although itis unclear whether DNA masses detected by flow cytometry (FCM) have functions as nuclei, DNA masses were regarded as nuclei in the present study.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.6 การตรวจวิเคราะห์เซลล์ไหลเคล็ดลับเข็มความยาว 1 ซม.มีการเตรียมการ การใช้ใบมีดโกน ในบัฟเฟอร์นิวเคลียร์ดูดได้จากความสูงความละเอียดชุดดีเอ็นเอของพืช (Partec ฟ เยอรมนี) ผู้ผลิตของ cytometer ไหล บัฟเฟอร์ที่สกัดมีการแก้ไขปัญหาค่า pH ต่ำประกอบด้วย Triton X-100 สารสกัดถูกกรองผ่านตาข่ายไนล่อน 50 มม. และรวบรวมสื่อกับนิวเคลียสแยก เพิ่มบัฟเฟอร์ ด้วยการเรืองแสงดีเอ็นเอคราบ 4,6-diamidino-2-phenylindole (DAPI), นอกจากนี้ยังเป็นส่วนหนึ่งของสารมาตรฐาน (Partec) และการแก้ไขปัญหาก็ vortexed เนื้อหาดีเอ็นเอของนิวเคลียสหนึ่ง ๆ ถูกวิเคราะห์โดยใช้ cytometer ไหล (พล็อยดีวิเคราะห์ Partec) ระดับดีเอ็นเอที่ได้จากทั้งหมด 5000 แอลฟา ตามมาจากการตรวจวิเคราะห์เซลล์ฮิสโตแกรม อัตราส่วนของนิวเคลียสมี DNA ลดลงถูกคำนวณตามที่อธิบายไว้ในยามาดะ et al. (2006) แม้ว่ามันจะไม่ชัดเจนว่าฝูงดีเอ็นเอที่ตรวจพบ โดยการตรวจวิเคราะห์เซลล์ไหล (FCM) มีหน้าที่เป็นแอลฟา ฝูงดีเอ็นเอถูกถือเป็นนิวเคลียสในการศึกษาปัจจุบัน

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.6 flow cytometry
เคล็ดลับเข็มมีความยาว 1 ซม. ถูกสับใช้ใบมีดโกนในบัฟเฟอร์สกัดนิวเคลียร์ที่ได้รับจากความละเอียดสูง Kit สำหรับพืชดีเอ็นเอ (Partec, มอนสเตอร์เยอรมนี) โดย บริษัท ผู้ผลิตไหล cytometer บัฟเฟอร์สกัดเป็นวิธีการแก้ปัญหาค่า pH ต่ำที่มี Triton X-100 สารสกัดถูกกรองผ่านตาข่ายไนลอน 50 มิลลิเมตรและขนาดกลางที่มีนิวเคลียสบางแห่งถูกเก็บรวบรวม บัฟเฟอร์กับดีเอ็นเอเรืองแสงเปื้อน 4,6-diamidino- 2 phenylindole (DAPI) ยังเป็นส่วนหนึ่งของน้ำยาชุดมาตรฐาน (Partec) คือการเพิ่มและการแก้ปัญหาที่ถูกหมุนวน เนื้อหาดีเอ็นเอของนิวเคลียสบางแห่งได้รับการวิเคราะห์โดยใช้ cytometer ไหล (ploidy วิเคราะห์ Partec) ระดับดีเอ็นเอที่ได้รับจากทั้งหมด 5000 นิวเคลียส บนพื้นฐานของการ histograms ภูมิคุ้มกันที่ได้จากอัตราส่วนของนิวเคลียสที่มีการลดลงของดีเอ็นเอที่คำนวณได้ตามที่อธิบายไว้ในยามาดะ, et al (2006) แม้ว่า ITIS ชัดเจนว่าฝูงดีเอ็นเอที่ตรวจพบโดย cytometry ไหล (FCM) มีหน้าที่เป็นนิวเคลียสฝูงดีเอ็นเอถูกมองว่าเป็นนิวเคลียสในการศึกษาในปัจจุบัน

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.6 เครื่องนับเซลล์เข็มยาว 1 เซนติเมตร มีเคล็ดลับหั่น โดยใช้ใบมีดโกน , นิวเคลียร์ใช้สารที่ได้จากชุดความละเอียดสูงสำหรับดีเอ็นเอของพืช ( พาร์เท็ค , M ü nster , เยอรมนี ) โดยผู้ผลิตของการใช้โมโน . บัฟเฟอร์ pH สารละลายที่มีการสกัดต่ำ Triton X-100 . สารสกัดที่ถูกกรองผ่าน 50 mm ตาข่ายไนล่อนและสื่อกับแยกนิวเคลียสถูกเก็บ บัฟเฟอร์กับหลอด DNA คราบ 4,6-diamidino - 2-phenylindole ( dapi ) , ยังเป็นส่วนหนึ่งของสารเคมีชุดมาตรฐาน ( พาร์เท็ค ) คือการเพิ่มและการแก้ปัญหาคือ vortexed . ดีเอ็นเอ เนื้อหาของการแยกนิวเคลียสถูกวิเคราะห์โดยใช้การใช้โมโน ( การวิเคราะห์ พาร์เท็ค ) ระดับดีเอ็นเอที่ได้จากผลรวมของ 5000 นิวเคลียส . บนพื้นฐานของฮิสโตแกรมที่ได้จากเซลล์ , อัตราส่วนของนิวเคลียสกับดีเอ็นเอลดลงคำนวณตามที่อธิบายไว้ในยามาดะ et al . ( 2006 ) แต่มันชัดเจนว่า ดีเอ็นเอที่ตรวจพบโดยการไหลของมวล ( ( FCM ) มีหน้าที่เป็นนิวเคลียสของดีเอ็นเอมวลชนถือว่านิวเคลียสในการศึกษาปัจจุบัน