the result of enhanced oxidative de

the result of enhanced oxidative degradation
of IAA, based on the decrease in superoxide dismutase,
a Zn-enzyme, and catalase activities in Zn-deficient
plants (Cakmak and Marschner 1988).
Suge et al. (1986) noted a significantly low level of gibberellin
in Zn-deficient plants of Zea mays L. by bioassay
of the total biological activity. The comparative effects of
Zn deficiency on the levels of GAs and IAA as well as relevant
quantitative data have not been reported. We quantified
both GAs and IAA by GC-MS using internal standards.
Brassinosteroids (BRs), which have recently been
found to be important in plant growth, were also examined.
Zea mays L. (Pioneer Hybrid 3358) was grown in vermiculite
in a greenhouse. Seedlings were transferred to
plastic vats with a 70-liter nutrient solution composed
of 3.3 mM KNO3, 2.5 mM Ca(NO3)2.4H2O, 1.0 mM
NH4H2PO4, 2.0 mM MgSO4.7H2O, 100//M Fe-EDTA, 9
fiM MnCl2-4H2O, 45fiM H3BO3, 0.3//M CuSO4-5H2O
and 0.5 /xM Na2Mo4>2H2O in deionized water! ZnSO4-
7H2O as Zn was supplied at sufficient (0.77 fiM), critical
(0.12//M) and deficient (OpM) levels. The nutrient solutions
were adjusted to pH 5.8 by 1.0 M HC1 or NaOH and
replaced every two days. Then, after transplanting, shoots
which had not been seriously damaged by Zn deficiency,
were removed (Table 1). Plant culture for analysis of GAs,
IAA and BRs in Zn-deficient Zea mays L. was repeated
three times. The shoots were soaked in methanol (MeOH)
immediately after weighing.
The tissue was homogenized and extracted three times
with excess MeOH. To the extract were added labeled internal
standards, [2H5]GA, (50 ng), fHJGAa, (200 ng), ["CJIAA
(100 ng), [2H6]brassinolide (1 /jg) and [2H6]castasterone
(1 fig). The extract was concentrated in vacuo and
fractionated by the usual method (Endo et al. 1989) to give
an acidic ethyl acetate (AE) and neutral ethyl acetate (NE)
fraction. The AE fraction was pre-purified with a polyvinylpyrrolidone
column, a Sep-Pak (ODS) cartridge and a
Sepralyte (diethylaminopropyl) column as reported by
Nakayama et al. (1989). A fraction containing GAs and
IAA was dissolved in 100 fA of 50% aqueous MeOH, subjected
to ODS-HPLC (Senshu-Pak ODS 4253D; 250x10
mm i.d.), and eluted at a flow rate of 3 ml min"1 with 30%
aqueous MeOH containing 0.1% acetic acid (0-2 min) and
then a linear gradient of 30-100% MeOH (2-30 min). The
retention time was 13-15 min for GA,, 15-17 min for IAA
and 20-23 min for GAa,.
The NE fraction was purified in a column of silica gel.
Elution was carried out step wise with chloroform (CHC13),
and CHC13 containing 1, 2.5, 5, 7, 10, 20 and 100% MeOH
(90 ml each). To monitor the biological activity of BRs,
sample aliquots were assayed by the rice lamina inclination
test (Arima et al. 1984). Eluates obtained with 5 to 1% of
MeOH in CHC13 were combined, dissolved in MeOHCHCI3
(4 : 1) and loaded onto a column of Sephadex LH-

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ผลของการเพิ่มการลด oxidativeของ IAA ตามซูเปอร์ออกไซด์ dismutase ลดลงZn-เอ็นไซม์ และกิจกรรม catalase ใน Zn ไม่พืช (Cakmak และ Marschner 1988)Suge et al. (1986) ไว้ในระดับต่ำอย่างมีนัยสำคัญของ gibberellinในพืชไม่ Zn ของซี mays L. โดย bioassayกิจกรรมชีวภาพทั้งหมด ผลของการเปรียบเทียบขาด Zn ในระดับของก๊าซและ IAA ที่เกี่ยวข้องได้เป็นอย่างดีไม่ได้มีการรายงานข้อมูลเชิงปริมาณ เรา quantifiedก๊าซและ IAA โดย GC MS ใช้มาตรฐานภายในBrassinosteroids (BRs), ซึ่งได้รับพบมีความสำคัญในการเจริญเติบโตของพืช ก็ยังตรวจสอบซี mays L. (ไพโอเนียร์ไฮบริ 3358) ถูกปลูก vermiculiteในเรือนกระจก กล้าไม้ได้โอนไปvats พลาสติก ด้วยโซลูชันธาตุอาหาร 70 ลิตรประกอบด้วยของ KNO3 3.3 mM, 2.5 mM Ca (NO3) 2.4H2O, 1.0 มม.NH4H2PO4, MgSO4.7H2O 2.0 มม. 100 / / M Fe-EDTA, 9fiM MnCl2 4H2O, 45fiM H3BO3, 0.3 / / M CuSO4 5H2Oและ 0.5 /xM Na2Mo4 > 2H2O น้ำ deionized ZnSO4-ให้มาที่เพียงพอ (0.77 fiM), 7H2O Zn เป็นสำคัญ(0.12 / / M) และระดับการขาดสาร (แผ่น/นาที) โซลูชั่นธาตุอาหารถูกปรับ pH 5.8 โดย 1.0 M HC1 หรือ NaOH และเปลี่ยนทุก 2 วัน จากนั้น หลังจาก transplanting หน่อซึ่งก็ไม่ได้อย่างจริงจังเสียหายขาด Znถูกเอาออก (ตารางที่ 1) วัฒนธรรมพืชสำหรับการวิเคราะห์แก๊สIAA และ BRs ใน Zn ไม่ซี mays L. ที่ซ้ำสามครั้ง ถ่ายภาพถูกนำไปแช่ในเมทานอ)ทันทีหลังจากที่ชั่งเนื้อเยื่อถูก homogenized เป็นกลุ่ม และดึงรั้งมีส่วนเกินทานอ การดึงข้อมูลถูกเพิ่มชื่อภายในมาตรฐาน GA [2H 5], (50 ng), fHJGAa, (200 ng), ["CJIAA(100 ng), [2H 6] brassinolide (1 /jg) และ [2 H 6] castasterone(1 ฟิก) การดึงข้อมูลเข้มข้นใน vacuo และแบ่งตามวิธีการปกติ (Endo et al. 1989) ให้มีกรดเอทิล acetate (AE) และกลางเอทิล acetate (NE)เศษส่วน เศษส่วน AE ที่บริสุทธิ์ก่อน ด้วยการ polyvinylpyrrolidoneคอลัมน์ ตลับปาก Sep (ODS) และSepralyte (diethylaminopropyl) คอลัมน์รายงานนะกะยะมะและ al. (1989) เศษส่วนที่ประกอบด้วยก๊าซ และIAA ถูกละลายใน fA 100 50% ทานออควี ภายใต้การ ODS HPLC (Senshu-ปาก ODS 4253D; 250 x 10มม.ประชาชน), และ eluted ที่อัตราการไหล 3 ml นาที "1 กับ 30%ทานออควีประกอบด้วย 0.1% กรดน้ำส้ม (0-2 นาที) และแล้วเส้นไล่ระดับสีของทานอ 30-100% (2-30 นาที) ที่รักษาเวลาได้ 13-15 นาทีสำหรับ GA, 15-17 นาทีสำหรับ IAAและต่ำสุด 20-23 สำหรับเฒ่าเศษส่วน NE ที่บริสุทธิ์ในคอลัมน์ของซิลิก้าเจลElution ถูกดำเนินการขั้นตอนที่ฉลาด ด้วยคลอโรฟอร์ม (CHC13),และ CHC13 ประกอบด้วย 1, 2.5, 5, 7, 10, 20 และ 100% ทานอ(90 มล.แต่ละ) การตรวจสอบกิจกรรมชีวภาพของ BRsตัวอย่าง aliquots ถูก assayed โดยความเอียง lamina ข้าวการทดสอบ (อา et al. 1984) Eluates รับกับ 5 ถึง 1% ของทานอใน CHC13 ถูกรวม ละลายใน MeOHCHCI3(4:1) และโหลดลงในคอลัมน์ของ Sephadex LH -

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ผลมาจากการย่อยสลายออกซิเดชันที่เพิ่มขึ้นของ IAA ขึ้นอยู่กับการลดลงของ superoxide dismutase ที่สังกะสีเอนไซม์และกิจกรรมcatalase ใน Zn ขาดพืช(Cakmak และ Marschner 1988). Suge et al, (1986) ที่ระบุไว้ในระดับต่ำอย่างมีนัยสำคัญของ gibberellin ในพืชสังกะสีขาด Zea mays ของแอลโดยการทดสอบฤทธิ์ทางชีวภาพของกิจกรรมทางชีวภาพรวม เปรียบเทียบผลของการขาดธาตุสังกะสีในระดับของก๊าซและ IAA เช่นเดียวกับที่เกี่ยวข้องข้อมูลเชิงปริมาณยังไม่ได้รับรายงาน เราวัดทั้งก๊าซและ IAA โดย GC-MS โดยใช้มาตรฐานภายใน. Brassinosteroids (BRS) ซึ่งเพิ่งได้รับการพบว่ามีความสำคัญในการเจริญเติบโตของพืชนอกจากนี้ยังมีการตรวจสอบ. Zea mays L. (ไพโอเนียร์ไฮบริด 3358) ได้รับการปลูกในดินในเรือนกระจก ต้นกล้าถูกโอนไปยังถังพลาสติกที่มีสารละลายธาตุอาหาร 70 ลิตรประกอบด้วย 3.3 มิลลิ KNO3 2.5 มิลลิ Ca (NO3) 2.4H2O 1.0 มิลลิNH4H2PO4 2.0 มิลลิ MgSO4.7H2O 100 // M Fe-EDTA, 9 FIM MnCl2- 4H2O, 45fiM H3BO3 0.3 // M CuSO4-5H2O และ 0.5 / xM Na2Mo4> 2H2O ในน้ำปราศจากไอออน! ZnSO4- 7H2O เป็นสังกะสีเป็นแหล่งที่เพียงพอ (0.77 FIM) ที่สำคัญ(0.12 // M) และขาด (OPM) ระดับ โซลูชั่นสารอาหารที่มีการปรับค่าพีเอช 5.8 1.0 M HC1 หรือ NaOH และเปลี่ยนทุกสองวัน จากนั้นหลังจากย้ายปลูกหน่อซึ่งไม่ได้รับความเสียหายอย่างจริงจังจากการขาดธาตุสังกะสี, ถูกถอดออก (ตารางที่ 1) วัฒนธรรมพืชสำหรับการวิเคราะห์ของก๊าซIAA และ BRS ใน Zn ขาด Zea mays L. ซ้ำสามครั้ง หน่อถูกแช่ในเมทานอล (เมธานอล) ทันทีหลังจากชั่งน้ำหนัก. เนื้อเยื่อเป็นปั่นและสกัดสามครั้งด้วยเมธานอลส่วนเกิน เพื่อให้สารสกัดที่ถูกเพิ่มเข้าติดป้ายภายในมาตรฐาน [2H5] GA, (50 นาโนกรัม) fHJGAa, (200 นาโนกรัม) ["CJIAA (100 นาโนกรัม) [2H6] brassinolide (1 / เจกรัม) และ [2H6] castasterone (1 มะเดื่อ). สารสกัดเข้มข้นในสุญญากาศและfractionated โดยวิธีปกติ (Endo et al. 1989) ที่จะให้เอทิลอะซิเตเป็นกรด(AE) และเอทิลอะซิเตเป็นกลาง (NE) ส่วน. โดยส่วน AE ได้ก่อนบริสุทธิ์กับ polyvinylpyrrolidone คอลัมน์เป็น ก.ย. ปาก (ODS) ตลับหมึกและSepralyte (diethylaminopropyl) คอลัมน์รายงานโดยยามาet al. (1989). ให้ส่วนที่มีก๊าซและIAA ถูกละลายใน 100 เอฟเอ 50% น้ำเมธานอลภายใต้การODS-HPLC (ODS Senshu ปาก 4253D; 250x10 มิลลิเมตรรหัส) และชะในอัตราการไหลของ 3 มลนาที "1 กับ 30% น้ำเมธานอลที่มี 0.1% กรดอะซิติก (0-2 นาที) และแล้วลาดเชิงเส้นของ30-100% เมธานอล (2-30 นาที) เวลาการเก็บรักษาเป็น 13-15 นาทีสำหรับ GA ,, 15-17 นาที IAA และ 20-23 นาที GAA ,. เศษ NE บริสุทธิ์ในคอลัมน์ของซิลิกาเจล. ชะได้ดำเนินการขั้นตอนที่ชาญฉลาดด้วยคลอโรฟอร์ม (CHC13) , และ CHC13 ที่มี 1, 2.5, 5, 7, 10, 20 และ 100% เมธานอล(90 มล. แต่ละคน) ในการตรวจสอบกิจกรรมทางชีวภาพของ BRS, aliquots ตัวอย่างได้รับการวิเคราะห์จากความโน้มเอียงแผ่นข้าวทดสอบ(Arima et al. 1984) Eluates รับกับ 5-1% ของเมธานอลในCHC13 ถูกรวมกันละลายใน MeOHCHCI3 (4: 1) และโหลดลงคอลัมน์ Sephadex LH-

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ผลของการปรับปรุงระบบการย่อยสลาย
ของ IAA , ขึ้นอยู่กับปริมาณเอนไซม์ Superoxide Dismutase
a , สังกะสี , สังกะสี และกิจกรรมต่างๆ ในการบ่งชี้
พืช ( cakmak มาร์ชเนอร์และ 1988 ) .
suge et al . ( 1986 ) ที่ระบุไว้ในระดับต่ำอย่างมีนัยสำคัญทางสถิติ ในพืชที่ขาดสังกะสี จิบเบอเรลลิน

Zea mays L . โดยวิธีของกิจกรรมทางชีวภาพทั้งหมด ผลเปรียบเทียบของ
การขาดสังกะสีในระดับของก๊าซและ IAA ตลอดจนที่เกี่ยวข้อง
ข้อมูลเชิงปริมาณ ยังไม่ได้รับรายงาน เราตรวจทั้งก๊าซและ IAA โดย

และใช้มาตรฐานภายใน brassinosteroids ( Brs ) ซึ่งเพิ่งได้รับ
พบเป็นสำคัญในการเจริญเติบโตของพืช นอกจากนี้ยังตรวจสอบ .
Zea mays L . ( ไพโอเนียร์ไฮบริด 3849 ) ปลูกในเวอร์มิคูไลท์
ในเรือนกระจก ต้นกล้าถูก

ถังพลาสติกที่มี 70 ลิตร สารละลายธาตุอาหารประกอบ
ของ kno3 3.3 มม. , 2.5 มม. CA ( 3 ) 2.4h2o NH4H2PO4 1.0 มม. ,
, mgso4.7h2o 2.0 มม. 100 / / M เฟ EDTA , FIM mncl2-4h2o 45fim h3bo3 9
, ,
0.3//m cuso4-5h2o 0.5 / XM na2mo4 > 2H2O-dx ในคล้ายเนื้อเยื่อประสานน้ำ ! znso4 -
7h2o เป็นสังกะสีที่ถูกจัดที่เพียงพอ ( 0.77 FIM ) วิกฤต
( 0.12 / / m ) และขาด ( OPM ) ระดับ โซลูชั่นสารอาหาร
ถูกปรับ pH 5.8 โดย 10 M สกัดหรือ NaOH และ
เปลี่ยนทุก 2 วัน แล้วหลังจากปักดำหน่อ
ซึ่งไม่ได้รับความเสียหายอย่างจริงจัง โดยสังกะสีขาด
ถูกเอาออก ( ตารางที่ 1 ) พืชวัฒนธรรมการวิเคราะห์ก๊าซและขาดสังกะสี
IAA ใน Brs Zea mays L . กัน
3 ครั้ง ยอดแช่ในเมทานอล ( เมทิลแอลกอฮอล์ )
ทันทีหลังจากชั่ง .
เนื้อเยื่อที่เป็นโฮโม และสกัดด้วยเมทิลแอลกอฮอล์เกินสามครั้ง
.ให้สารสกัดเพิ่มป้ายมาตรฐานภายใน
, [ 2h5 ] กา ( 50 กรัม ) , fhjgaa ( 200 กรัม ) , [ " cjiaa
( 100 กรัม ) , [ 2h6 ] บราสสิโนไลด์ ( 1 / JG ) และ [ 2h6 ] castasterone
( 1 รูป ) สารสกัดที่ข้น และพบใน vacuo
โดยวิธีปกติ ( Endo et al . 1989 ) ให้
เป็นเอทิลอะซีเตท ( เอ ) ที่เป็นกรดเป็นกลาง และเอทิลอะซิเตท ( NE )
เศษส่วน ส่วนเอก่อนแยกกับพอลิวินิลไพร์โรลิโดน
คอลัมน์ , ก.ย. ปาก ( ODS ) ตลับหมึกและ
sepralyte ( diethylaminopropyl ) คอลัมน์รายงานโดย
Nakayama et al . ( 1989 ) เศษส่วนที่มีก๊าซละลาย
IAA 100 ฟ้า 50 % ปริมาณน้ำภายใต้การ ods-hplc
( ขายเช่นกัน ปากบอก 4253d ; 250x10
อืมไอดี ) และตัวอย่างที่อัตราการไหล 3 มิลลิลิตรต่อนาที " 1 กับ 30 %
น้ำปริมาณกรดที่ประกอบด้วย 0.1% ( 2 นาที ) และ
แล้วลาดเชิงเส้นของ 30-100 % ปริมาณ ( 2-30 มิน )
กักเวลา 13-15 นาทีกา , 15-17 นาที และ 20 นาทีสำหรับ GAA IAA
.
NE ส่วนบริสุทธิ์ในคอลัมน์ซิลิกาเจล
ได้มาดำเนินการขั้นปัญญากับคลอโรฟอร์ม ( chc13 )
chc13 และประกอบด้วย 1 , 2 , 5 , 7 , 10 , 20 , และ 100 %
( 90 ml ปริมาณแต่ละครั้ง ) การตรวจสอบฤทธิ์ทางชีวภาพของ Brs
,