2.4. Soil enzyme activities Soil e

2.4. Soil enzyme activities
Soil enzymes involved in organic C decomposition and N mineralization were selectively examined. To reduce variation for measurements of soil enzyme activities, triplicate measurements were performed for soil collected from each field plot and then the average values were calculated and used for statistical analysis. All enzyme assays were determined against two types of controls (i.e., substrate alone and soil filtrate alone). Soil enzyme activity is expressed as mmol of a product produced per h per kg of soil.
The activity of N-acetyl-β -glucosaminidase was determined by using p-nitrophenyl N-acetyl-β -glucosaminide as the substrate (Parham and Deng, 2000). Soil ( ̴ 0.5 g dry weight equivalent) was
incubated for 1 h at 37 ˚C with 1 ml of 10 mM glucosaminide and 4 ml of 50mMacetate buffer (pH 5.0). Reactionwas terminated and colorwas allowed to develop by adding 1 ml of 0.5M CaCl2 and 4 ml of 0.5 M NaOH. The filtrate was measured colorimetrically at 410 nm.
Cellulase activity was determined by the modified method of Von Mersi and Schinner (1996). Soil ( ̴ 2 g dry weight equivalent) was incubated with 0.9% of carboxymethyl-cellulose in 10 ml 0.5 M acetate buffer (pH 5.5) at 37 ˚C for 24 h. The filtrates of soilsubstrate slurries were subjected to color reaction and the produced Prussian blue was analyzed colorimetrically at 690 nm.
The activity of soil phenol oxidase was determined colorimetrically using L-3,4-dihydroxyphenylanaline (i.e., DOPA) as the substrate (Saiya-Cork et al., 2002). In brief, soil ( ̴ 0.5 g dry weight equivalent) was mixed with 1 ml of 10 mM DOPA and 4 ml of 50 mM acetate buffer (pH 5.0) and incubated at room temperature for 1 h by constantly shaking at 125 rev min-1. The reaction was terminated by centrifugation at 5000 × g for 5 min and then the optical density of the supernatant was measured at 460 nm.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.4. กิจกรรมของเอนไซม์ดิน เกี่ยวข้องกับเอนไซม์ในดินอินทรีย์ C สลายตัว และเลือกที่จะถูก examined N mineralization เพื่อลดความผันแปรสำหรับการวัดกิจกรรมของเอนไซม์ดิน วัดตสแควร์ดำเนินการรวบรวมจากพล็อตแต่ละฟิลด์ดินแล้ว คำนวณ และใช้สถิติวิเคราะห์ค่าเฉลี่ย กำหนด assays เอนไซม์ทั้งสองชนิดของตัวควบคุม (เช่น พื้นผิวเพียงอย่างเดียวและดินฟาร์มเพียงอย่างเดียว) ดินเอนไซม์จะแสดงเป็นโมลของผลิตภัณฑ์ที่ผลิตต่อชั่วโมงต่อกิโลกรัมของดินมีกำหนดกิจกรรมของ N-acetyl-β - glucosaminidase โดยใช้ p nitrophenyl N-acetyl-β - glucosaminide เป็นพื้นผิว (พารัมและเติ้ง 2000) แก้ไขดิน (̴ 0.5 กรัมน้ำหนักแห้งเท่ากับ)รับการกกสำหรับ 1 ชั่วโมงที่ 37 ˚ 1 มล.ของ glucosaminide 10 มม.และ 4 ml 50mMacetate บัฟเฟอร์ (pH 5.0) ยกเลิก Reactionwas และ colorwas ได้พัฒนา โดยการเพิ่ม 0.5 M CaCl2 และ 4 ml ของ 0.5 M NaOH การกรองโดยวัด colorimetrically ที่ 410 nmกิจกรรม cellulase ถูกกำหนด โดยวิธีการแก้ไขของ Von Mersi และ Schinner (1996) ดิน (̴ 2 กรัมน้ำหนักแห้งเท่ากับ) มี incubated มี 0.9% เซลลูโลส carboxymethyl ในบัฟเฟอร์ acetate 0.5 ม. 10 มล. (pH 5.5) ที่ 37 ˚ c ใน 24 ชม Filtrates ของ soilsubstrate slurries ถูกปฏิกิริยาสี และผลิตสีน้ำเงิน Prussian  colorimetrically ที่ 690 nmกำหนดกิจกรรมของดินฟีนอ oxidase colorimetrically ใช้ L-3, 4-dihydroxyphenylanaline (เช่น DOPA) เป็นพื้นผิว (คอร์ก Saiya et al. 2002) สังเขป ดิน (̴ 0.5 กรัมน้ำหนักแห้งเท่ากับ) ถูกผสมกับ 1 มล. 10 มม. DOPA และ 4 ml ของ acetate 50 มม.บัฟเฟอร์ (pH 5.0) และได้รับการกกที่อุณหภูมิห้อง 1 ชั่วโมง โดยการเขย่าอยู่ตลอดเวลาที่หมุนรอบ 125 นาที-1 ปฏิกิริยาที่ถูกยกเลิก โดยหมุนเหวี่ยงที่ 5000 × g 5 นาทีแล้ว ความหนาแน่นออปติคัลของ supernatant ถูกวัดที่ 460 nm

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.4 ดินเอนไซม์
เอนไซม์ดินมีส่วนร่วมในการสลายตัว C อินทรีย์และแร่ N มีการตรวจสอบการคัดเลือก เพื่อลดการเปลี่ยนแปลงสำหรับการตรวจวัดของกิจกรรมเอนไซม์ดินวัดได้ดำเนินการเพิ่มขึ้นสามเท่าดินที่เก็บได้จากแต่ละแปลงข้อมูลแล้วค่าเฉลี่ยจะถูกคำนวณและใช้สำหรับการวิเคราะห์ทางสถิติ ทั้งหมดเอนไซม์ได้รับการพิจารณากับสองชนิดของตัวควบคุม (เช่นพื้นผิวเพียงอย่างเดียวและกรองดินเพียงอย่างเดียว) กิจกรรมของเอนไซม์ดินจะแสดงเป็นมิลลิโมลของผลิตภัณฑ์ที่ผลิตต่อชั่วโมงต่อกิโลกรัมของดิน.
กิจกรรมของ N-acetyl-เบต้า -glucosaminidase ถูกกำหนดโดยใช้ P-Nitrophenyl N-acetyl-β -glucosaminide เป็นสารตั้งต้น (พารัมและเติ้งที่เกิดขึ้น 2000) ดิน (̴ 0.5 กรัมน้ำหนักแห้งเทียบเท่า) ถูก
บ่มเป็นเวลา 1 ชั่วโมงที่ 37 C ที่มี 1 มิลลิลิตร 10 มิลลิเมตร glucosaminide และ 4 มิลลิลิตร 50mMacetate บัฟเฟอร์ (pH 5.0) Reactionwas ยกเลิกและ colorwas ได้รับอนุญาตในการพัฒนาโดยการเพิ่ม 1 มิลลิลิตรของ 0.5M CaCl2 และ 4 มล. 0.5 M NaOH กรองวัด colorimetrically ที่ 410 นาโนเมตร.
กิจกรรมเซลลูเลสถูกกำหนดโดยวิธีการแก้ไขของฟอน mersi และ Schinner (1996) ดิน (̴ 2 กรัมน้ำหนักแห้งเทียบเท่า) ถูกบ่มกับ 0.9% ของคาร์บอกซีเซลลูโลสใน 10 มล. 0.5 M อะซิเตตบัฟเฟอร์ (pH 5.5) ที่ 37 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 24 ชั่วโมง กรองของ slurries soilsubstrate ถูกยัดเยียดให้เกิดปฏิกิริยาสีและผลิตปรัสเซียนฟ้าวิเคราะห์ colorimetrically ที่ 690 นาโนเมตร.
กิจกรรมของฟีนอลออกซิเดสในดินถูกกำหนด colorimetrically ใช้ L-3,4-dihydroxyphenylanaline (เช่น DOPA) เป็นสารตั้งต้น (Saiya- คอร์ก et al., 2002) ในช่วงสั้น ๆ ของดิน (̴ 0.5 กรัมน้ำหนักแห้งเทียบเท่า) ผสมกับ 1 มล. 10 มิลลิเมตร DOPA และ 4 มิลลิลิตรขนาด 50 มมบัฟเฟอร์อะซิเตท (pH 5.0) และบ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 1 ชั่วโมงอย่างต่อเนื่องโดยการเขย่าที่ 125 REV นาที 1 . ปฏิกิริยาถูกยกเลิกโดยการหมุนเหวี่ยงที่ 5000 ×กรัมเป็นเวลา 5 นาทีและจากนั้นความหนาแน่นของแสงของสารละลายวัดที่ 460 นาโนเมตร

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.4 . กิจกรรมเอนไซม์ดินดินอินทรีย์ C และเอนไซม์ที่เกี่ยวข้องในการย่อยสลายสารอินทรีย์ไนโตรเจนถูกเลือกตรวจสอบ เพื่อลดการเปลี่ยนแปลงของกิจกรรมเอนไซม์สำหรับวัดดิน การวัดการทำสำเนาสามฉบับสำหรับดินที่เก็บจากแต่ละแปลงปลูกและค่าเฉลี่ยที่คำนวณ และสถิติที่ใช้ในการวิเคราะห์ข้อมูล ใช้เอนไซม์วิเคราะห์ทั้งหมดกับสองประเภทของการควบคุม ( เช่น ใช้คนเดียว และกรองดินเพียงอย่างเดียว ) กิจกรรมของเอนไซม์ในดินจะแสดงเป็นมิลลิโมลของสินค้าที่ผลิต / H ต่อกิโลกรัมของดินกิจกรรมของ n-acetyl - บีตา - glucosaminidase ถูกกำหนดโดยการใช้ p-nitrophenyl n-acetyl - บีตา - glucosaminide เป็นฐานรอง ( พาร์เฮิ่ม และเติ้ง , 2000 ) ดิน ( ̴ 0.5 กรัม เทียบเท่าน้ำหนักแห้ง ) คือบ่มที่ 37 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 1 ชั่วโมง ˚ 1 มล. 10 mm glucosaminide 4 มิลลิลิตร 50mmacetate บัฟเฟอร์ pH 5.0 ) พบว่า colorwas สิ้นสุดลงและอนุญาตให้พัฒนาโดยการเพิ่ม 1 มิลลิลิตร และ 4 ml ผลิต 0.5 0.5 M NaOH หนักวัด colorimetrically ที่ 410 นาโนเมตรกิจกรรมของเอนไซม์ถูกกำหนดโดยดัดแปลงมาจากวิธีของฟอน mersi และ schinner ( 1996 ) ดิน ( ̴ 2 กรัมเทียบเท่าน้ำหนักแห้ง ) คือแยก 0.9% คาร์บอกซีเมทิลเซลลูโลส 10 ml 0.5 m อะซิเตทบัฟเฟอร์ pH 5.5 ที่ 37 ˚ เป็นเวลา 24 ชั่วโมง สารละลายของ soilsubstrate slurries ถูกปฏิกิริยาการเกิดสีและผลิตยาสีน้ำเงินวิเคราะห์ colorimetrically ที่ 690 nm .กิจกรรมของเอนไซม์ฟีนอลดินตั้งใจ colorimetrically ใช้ l-3,4-dihydroxyphenylanaline ( เช่น โด ) เป็นฐานรอง ( ไซย่าก๊อก et al . , 2002 ) ในช่วงสั้น ๆ , ดิน ( ̴ 0.5 กรัม เทียบเท่าน้ำหนักแห้ง ) ผสมกับ 1 มล. 10 mm และ 4 มิลลิลิตร ด้วยบัฟเฟอร์อะซิเตท 50 มม. ( pH 5.0 ) และบ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 1 ชั่วโมง โดยตลอดเวลาเขย่า 125 min-1 Rev . ปฏิกิริยาที่ถูกยกเลิกโดยการปั่นเหวี่ยงที่ 5000 ×กรัมเป็นเวลา 5 นาทีและความหนาแน่นสูง แสงของวัดที่ 460 nm .