2.4. Microbiological analysesAt mul

2.4. Microbiological analyses
At multiple deadlines (before drying just after yeast treatment, in
themiddle of firstmaturation, before fattening, and in finalmaturation),
samples of ham surface, approximately 2mmthickness,were aseptically
removed fromthree different areas of unskinnedmuscle surface, collected
in a sterile bag, properly diluted with Peptone Physiological
Solution (PPS) and homogenized for 2 min using a Stomacher (PBIInternational, Italy). After sugna application, fat mince samples of 10 g
were diluted 1:10 (w/w) with PPS, added with 10 g of Tween 80 and
sterile glass beads (∅=3–4mm), andmixed for 15 min. For each sample,
yeast countswere obtained after incubation at 25 °C for 4–5days on
Dichloran–Glycerol agar (DG18, Oxoid, UK) plates. Counts obtained at
assayed steps were reported as colony forming unit (CFU) per g of
meat sample (ISO, 21527-2, 2008).
The presence of the inoculated yeasts was confirmed selecting
twenty per cent of the colonies from the highest dilutions in DG18
plates. Colonies, maintained at room temperature on YPD plates,
were characterized by morphological tests (Kurtzman et al., 2011).
Then, yeast isolates were subjected to molecular identification by
means of RFLPs of PCR amplified ITS-5.8S rRNA gene region; PFGE
analysis was performed for biotypes discrimination (Frustoli et al.,
database (National Institute of Standards and Technology, Gaithersburg)
and Kovats retention Index (Kovats, 1965).
A total of 24 ham samples were analysed in triplicate. A solution of
ethyl propionate (0.25 ppm) was used as external standard twice a
day to correct chromatograms according to instrumental performances.
The amount of volatile compounds was calculated by SIM (Single Ion
Monitoring) integration. The selection of the characteristic ion for the
SIM quantification was performed by studying the molecular fragmentation
and choosing the ion that differentiates from background and
coeluting compounds. Peakswere integrated by ICIS method of the software
Excalibur V 1.4 (Thermo Electron). Results were expressed in relative
abundance units (AU) and measured as total area counts.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.4 การทางจุลชีววิทยาวิเคราะห์ที่สิ้นสุดหลาย (ก่อนแห้งหลังการรักษายีสต์ ในthemiddle ของ firstmaturation เลี่ยน และ ใน finalmaturation),มีตัวอย่างของพื้นผิวแฮม ประมาณ 2mmthickness, asepticallyfromthree เอาพื้นที่ต่าง ๆ ของพื้นผิว unskinnedmuscle รวบรวมในถุงใส่ ถูกผสมกับสรีรวิทยา Peptoneโซลูชัน (PPS) และ homogenized เป็นกลุ่มสำหรับ 2 นาทีใช้แผงประดับหน้าอก (PBIInternational อิตาลี) หลังจากโปรแกรมประยุกต์ sugna ไขมัน mince ตัวอย่าง 10 กรัมได้แตกออก 1:10 (w/w) กับ PPS เพิ่มกับ 10 กรัมของ Tween 80 และลูกปัดแก้วกอซ (∅ = 3-4mm), andmixed สำหรับ 15 นาที สำหรับตัวอย่างแต่ละเชื้อยีสต์ได้รับหลังจากการบ่มที่ 25 ° C สำหรับ 4 – 5days บน countswereDichloran – กลีเซอร agar (DG18, Oxoid สหราชอาณาจักร) แผ่น จำนวนที่ได้รับตอน assayed ถูกรายงานว่า เป็นอาณานิคมขึ้นหน่วย (CFU) ต่อกรัมของเนื้อตัวอย่าง (ISO, 21527-2, 2008)Inoculated yeasts ก็ได้รับการยืนยันการเลือกร้อยละยี่สิบของอาณานิคมจาก dilutions สูงสุดใน DG18แผ่น อาณานิคม การเก็บรักษาที่อุณหภูมิห้องในที่แผ่น YPDมีลักษณะ โดยการทดสอบของ (Kurtzman et al., 2011)แล้ว ยีสต์แยกถูกต้องรหัสโมเลกุลด้วยวิธีการ RFLPs PCR ขยายของ-5.8S rRNA ยีนภูมิภาค PFGEทำการวิเคราะห์สำหรับแบ่งแยก biotypes (Frustoli et al.,ฐานข้อมูล (ชาติสถาบันมาตรฐาน และเทคโนโลยี Gaithersburg)และเก็บรักษา Kovats ดัชนี (Kovats, 1965)จำนวนตัวอย่างแฮม 24 ถูก analysed ใน triplicate การแก้ปัญหาของpropionate เอทิล (0.25 ppm) ใช้เป็นมาตรฐานภายนอกสองตัววันต้อง chromatograms ตามบรรเลงแสดงคำนวณจำนวนของสารระเหย โดยซิม (ไอออนเดียวรวมที่ตรวจสอบ) การเลือกของไอออนลักษณะสำหรับการนับซิมการ์ดถูกดำเนินการ โดยศึกษาการกระจายตัวของโมเลกุลเลือกไอออนที่แตกต่างจากพื้นหลัง และcoeluting สาร Peakswere รวม โดยวิธี ICIS ซอฟต์แวร์เอ็กซ์คาลิเบอร์ V 1.4 (เทอร์โมอิเล็กตรอน) ผลลัพธ์ถูกแสดงในญาติเต็มหน่วย (AU) และวัดเป็นพื้นที่รวมนับ

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.4 วิเคราะห์ทางจุลชีววิทยาในกำหนดเวลาที่หลาย ๆ (ก่อนที่จะแห้งหลังจากการรักษายีสต์ใน themiddle ของ firstmaturation ก่อนขุนและใน finalmaturation) ตัวอย่างของพื้นผิวแฮมประมาณ 2mmthickness ถูกปลอดเชื้อลบออกพื้นที่ที่แตกต่างfromthree ของพื้นผิว unskinnedmuscle เก็บในถุงปลอดเชื้อปรับลดอย่างถูกต้องกับเปปโตนสรีรวิทยาโซลูชัน (PPS) และปั่นเป็นเวลา 2 นาทีโดยใช้ Stomacher (PBIInternational, อิตาลี) หลังจากที่ใช้ sugna ตัวอย่างสับไขมัน 10 กรัมเจือจาง1:10 (w / w) กับ PPS เพิ่ม 10 กรัมของ Tween 80 และลูกปัดแก้วผ่านการฆ่าเชื้อ(∅ = 3-4mm) andmixed นาน 15 นาที สำหรับตัวอย่างแต่ละยีสต์ countswere ได้รับหลังจากการบ่มที่อุณหภูมิ 25 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 4-5days ใน Dichloran-กลีเซอรอลวุ้น (DG18, Oxoid สหราชอาณาจักร) แผ่น เคานต์ได้ที่ขั้นตอน assayed ได้รับรายงานว่าหน่วยสร้างอาณานิคม (CFU) ต่อกรัมตัวอย่างเนื้อ(ISO, 21527-2, 2008). การปรากฏตัวของเชื้อยีสต์ที่ได้รับการยืนยันการเลือกร้อยละยี่สิบของอาณานิคมจากเจือจางที่สูงที่สุดใน DG18 แผ่น อาณานิคมเก็บรักษาไว้ที่อุณหภูมิห้องบนจาน YPD, (. เคิร์ทซ์ et al, 2011). โดดเด่นด้วยการทดสอบลักษณะทางสัณฐานวิทยาจากนั้นสายพันธุ์ยีสต์ที่ถูกยัดเยียดให้บัตรประจำตัวโมเลกุลโดยวิธีการของRFLPs ของ PCR ขยายภูมิภาค ITS-5.8S rRNA ยีน PFGE วิเคราะห์ได้รับการดำเนินการสำหรับไบโอไทป์การเลือกปฏิบัติ (Frustoli et al., ฐานข้อมูล (สถาบันมาตรฐานและเทคโนโลยี Gaithersburg) และการเก็บรักษาดัชนี Kovats (Kovats, 1965). จำนวน 24 ตัวอย่างแฮมถูกวิเคราะห์ในเพิ่มขึ้นสามเท่า. วิธีการแก้ปัญหาของpropionate เอทิล (0.25 ppm) ถูกนำมาใช้เป็นมาตรฐานภายนอกสองครั้งต่อวันเพื่อแก้ไขchromatograms ตามการแสดงบรรเลง. ปริมาณของสารระเหยที่คำนวณได้จากซิม (Single ไอออนตรวจสอบ) บูรณาการ. การเลือกของไอออนลักษณะที่ปริมาณซิมได้ดำเนินการโดยการศึกษากระจายตัวของโมเลกุลเลือกไอออนที่แตกต่างจากพื้นหลังและสารประกอบcoeluting. Peakswere แบบบูรณาการโดยวิธีการ ICIS ของซอฟแวร์คาลิเบอร์1.4 V (เทอร์โมอิ) ผล. ถูกแสดงในญาติหน่วยความอุดมสมบูรณ์(AU) และวัดนับรวมพื้นที่

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.4 . จุลชีววิทยาวิเคราะห์
ที่หลายกำหนดเวลา ( ก่อนแห้งหลังการรักษาในรูปแบบของยีสต์
firstmaturation ก่อนที่ขุน และใน finalmaturation )
ตัวอย่างของพื้นผิว แฮม ประมาณ 2mmthickness , aseptically
เอาออก 3 พื้นที่ที่แตกต่างกันของพื้นผิว unskinnedmuscle เก็บ
ในถุงปลอดเชื้อถูกเจือจางด้วยเปปโตนสรีรวิทยา
วิธีแก้ปัญหา ( PPS ) และบดสำหรับ 2 นาทีใช้แผงประดับหน้าอก ( pbiinternational อิตาลี ) หลังจาก sugna ประยุกต์ ตัวอย่างของไขมันสับ 10 กรัม
ถูกเจือจาง 1 : 10 ( w / w ) PPS , เพิ่ม 10 กรัมของ Tween 80 และ
ลูกปัดแก้วหมัน ( ∅ = 3 – 4 ) andmixed 15 นาทีสำหรับแต่ละตัวอย่าง
countswere ยีสต์ได้หลังจากบ่มที่อุณหภูมิ 25 ° C เป็นเวลา 4 - 5 วันบน
ไดคลอแรนและกลีเซอรอล ( dg18 oxoid , UK ) จานนับที่ได้รับ
ขั้นตอนมีรายงานเป็นหน่วย ml เป็นอาณานิคม ( CFU ) / g
เนื้อตัวอย่าง ( ISO , 21527-2 , 2008 ) .
พระพักตร์ของเชื้อยีสต์ที่ได้รับการยืนยันการเลือก
ยี่สิบเปอร์เซ็นต์ของอาณานิคมจากเจือจางสูงสุดใน dg18
แผ่น อาณานิคม , เก็บรักษาที่อุณหภูมิห้องใน ypd แผ่น
มีลักษณะโดยการทดสอบลักษณะทางสัณฐานวิทยา ( เคิร์ทแมน et al . , 2011 ) .
แล้วยีสต์ไอโซเลทถูกระบุโมเลกุลโดย
หมายถึง rflps สามารถขยาย its-5.8s rRNA ยีนภูมิภาค การวิเคราะห์ PFGE
แสดงสำหรับ biotypes จำแนก ( frustoli et al . ,
ฐานข้อมูลแห่งชาติสถาบันมาตรฐานและเทคโนโลยี Gaithersburg )
kovats ดัชนีและความคงทน ( kovats , 1965 ) .
รวม 24 ตัวอย่าง แฮม คนทั้งสามใบ โซลูชั่นของเอทิล propionate (
025 ppm ) ใช้ภายนอกมาตรฐาน
วันสองครั้งเพื่อแก้ไขกลิ่นตามการแสดงการบรรเลง .
ปริมาณสารระเหยที่ถูกคำนวณโดยซิม ( ติดตามรายละเอียด
เดียว ) รวม การเลือกของไอออนและ
ซิมปริมาณกระทำโดยศึกษาการเลือกไอออนและโมเลกุล

ที่แตกต่างจากพื้นหลัง และcoeluting สารประกอบ peakswere รวมโดยวิธีไอซิสของซอฟต์แวร์
Excalibur V 1.4 ( อิเล็กตรอนร้อน ) ผลลัพธ์ที่ได้แสดงออกในความอุดมสมบูรณ์สัมพัทธ์
หน่วย ( AU ) และวัดเป็นจำนวนพื้นที่ทั้งหมด