2.4. Cytotoxicity assayAll isolated

2.4. Cytotoxicity assay

All isolated compounds (1–6) were subjected to cytotoxic evaluation against KB (human

epidermoid carcinoma) and HeLa (human cervical carcinoma) cell lines employing the

colorimetric method [4] and [5]. Adriamycin was used as the reference substance which

exhibits activity against KB and HeLa cell lines. The 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-

diphenyl-tetrazolium bromide (Sigma Chemical Co., USA) was dissolved in saline to make a

5 mg/mL stock solution. Cancer cells (3 × 103 cells) suspended in 100 μg/wells of MEM

medium containing 10% fetal calf serum (FCS, Gibco BRL, Life Technologies, NY, USA)

were seeded onto a 96-well culture plate (Costar, Corning Incorporated, NY 14831, USA).

After 24 h pre-incubation at 37 °C in a humidified atmosphere of 5% CO2/95% air to allow

cellular attachment, various concentrations of test solution (10 μL/well) were added and

these were then incubated for 48 h under the above conditions. At the end of the incubation,

10 μL of tetrazolium reagent was added into each well followed by further incubation at

37 °C for 4 h. The supernatant was decanted, and DMSO (100 μL/well) was added to allow

Formosan solubilization. The optical density (OD) of each well was detected using a

microplate reader at 550 nm and for correction at 595 nm. Each determination represented

the average mean of six replicates. The 50% inhibition concentration (IC50 value) was

determined by curve fitting.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.4 วิเคราะห์ cytotoxicityถูกต้องทั้งหมดแยกสารประกอบ (1-6) ประเมิน cytotoxic กับ KB (มนุษย์ epidermoid carcinoma) และบรรทัดเซลล์ HeLa (carcinoma มดลูกมนุษย์) ที่ใช้ใน วิธีการเทียบเคียง [4] และ [5] Adriamycin ถูกใช้เป็นสารอ้างอิงซึ่ง การจัดแสดงกิจกรรมตามฐานและเซลล์ HeLa บรรทัด 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-ฟีนิลได tetrazolium โบรไมด์ (ซิกเคมี Co. สหรัฐอเมริกา) ที่ละลายในน้ำเกลือจะทำให้การ แก้ปัญหาหุ้น 5 mg/mL เซลล์มะเร็ง (3 × 103 เซลล์) ชั่วคราวใน μg 100 บ่อของหน่วยความจำ สื่อที่ประกอบด้วย 10% ลูกครรภ์เซรั่ม (FCS, Gibco BRL เทคโนโลยีชีวิต NY, USA) มี seeded วัฒนธรรมดี 96 ใส่จาน (Costar คอร์นทำ Incorporated, NY 14831 สหรัฐอเมริกา) หลังจาก 24 ชมก่อนบ่มที่ 37 ° C ในบรรยากาศ humidified อากาศ CO2/95% 5% ให้ โทรศัพท์มือถือแนบ ความเข้มข้นต่าง ๆ ของการทดสอบ (10 μL/ดี) ถูกเพิ่มเข้ามา และ นอกจากนี้เหล่านี้แล้วก็ incubated สำหรับ h 48 ภายใต้เงื่อนไขข้างต้น ที่สุดของคณะทันตแพทยศาสตร์ ΜL 10 ของรีเอเจนต์ tetrazolium ถูกเพิ่มเข้าไปในแต่ละดีตาม ด้วยการบ่มที่ 37 ° C สำหรับ 4 h Supernatant ถูก decanted และ DMSO (100 μL/ดี) ถูกเพิ่มเข้ามาให้ Solubilization ฟอร์ม่อซาน ความหนาแน่นออปติคอล (OD) ของแต่ละดีพบใช้เป็น microplate reader ที่ 550 nm และ สำหรับการแก้ไขที่ 595 nm แต่ละเรื่องที่แสดง หมายถึงค่าเฉลี่ยของ 6 เหมือนกับ มีความเข้มข้นยับยั้งการ 50% (IC50 ค่า) กำหนด โดยเส้นโค้งกระชับ

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.4 การทดสอบความเป็นพิษทั้งหมดที่แยกสาร (1-6) ถูกยัดเยียดให้เป็นพิษต่อการประเมินผลกับ KB (มนุษย์มะเร็งepidermoid) และ HeLa (มะเร็งปากมดลูกมนุษย์) เซลล์จ้างวิธีการสี[4] และ [5] Adriamycin ถูกใช้เป็นสารอ้างอิงที่จัดแสดงนิทรรศการกิจกรรมกับKB และ HeLa เซลล์ 3 (4,5-dimethylthiazol-2-YL) -2,5- diphenyl-tetrazolium โบรไมด์ (ซิกม่า Chemical Co. , สหรัฐอเมริกา) ถูกละลายในน้ำเกลือที่จะทำให้5 มิลลิกรัม / มิลลิลิตรวิธีการแก้ปัญหาสต็อก เซลล์มะเร็ง (3 × 103 เซลล์) ที่ลอยอยู่ใน 100 ไมโครกรัม / หลุมของ MEM ขนาดกลางที่มี 10% ซีรั่มน่องทารกในครรภ์ (FCS, Gibco BRL เทคโนโลยีชีวิต, นิวยอร์ก, สหรัฐอเมริกา) เมล็ดลงบนแผ่นวัฒนธรรม 96 หลุม (ดารา, Corning Incorporated , NY 14831, USA). หลังจาก 24 ชั่วโมงก่อนการบ่มที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียสในบรรยากาศที่ความชื้นของ CO2 5% / 95% อากาศเพื่อช่วยให้สิ่งที่แนบโทรศัพท์มือถือความเข้มข้นต่างๆของการแก้ปัญหาการทดสอบ (10 ไมโครลิตร / ดี) ได้รับการเพิ่มและเหล่านี้บ่มแล้วเป็นเวลา 48 ชั่วโมงภายใต้เงื่อนไขดังกล่าวข้างต้น ในตอนท้ายของการบ่มที่10 ไมโครลิตรของสาร tetrazolium ถูกเพิ่มเข้าไปในแต่ละตามอย่างดีจากการบ่มเพิ่มเติมได้ที่37 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 4 ชั่วโมง สารละลายถูก decanted และ DMSO (100 ไมโครลิตร / ดี) ถูกเพิ่มเข้ามาเพื่อให้การละลายFormosan ความหนาแน่นของแสง (OD) ของดีแต่ละคนถูกตรวจพบโดยใช้ผู้อ่านmicroplate ที่ 550 นาโนเมตรและสำหรับการแก้ไขที่ 595 นาโนเมตร ความมุ่งมั่นของแต่ละคนเป็นตัวแทนของค่าเฉลี่ยหกซ้ำ ความเข้มข้นของการยับยั้ง 50% (ค่า IC50) ถูกกำหนดโดยการปรับเส้นโค้ง

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.4 . ความเป็นพิษต่อ

ทั้งหมดแยกสารประกอบ ( 1 – 6 ) ถูกประเมินเทียบกับพิษบางครั้ง ( มนุษย์

epidermoid มะเร็ง ( มะเร็งปากมดลูก ) และ Hela cell lines มนุษย์ ) ใช้วิธี Colorimetric

[ 4 ]    และ [ 5 ] ขาวโพลนที่ถูกใช้เป็นสารซึ่งอ้างอิง

กิจกรรมนิทรรศการต่อต้าน Kb และ Hela cell lines . 3 - ( 4,5-dimethylthiazol-2-yl ) - 2 , 5 -

อีเธอร์ tetrazolium โบรไมด์ ( Sigma Chemical Co . , USA ) ละลายในน้ำเกลือให้

5 รึเปล่ามก. / มล. และหุ้นโซลูชั่น เซลล์มะเร็ง ( 3  ×  103 เซลล์แขวนลอยใน 100  μกรัม / หลุม ของแหม่ม

อาหารที่มีซีรัมลูกโค ( fetal 10% FCS gibco BRL , เทคโนโลยี , ชีวิต , NY , USA )

มีเมล็ดลงบนจาน 96 ดีวัฒนธรรม ( COSTAR , Corning Incorporated , นิวยอร์ก 14831 , USA )

หลังจาก 24 ไหม H ก่อนบ่มที่ 37 องศาเซลเซียส ในบรรยากาศ ° humidified 5% CO2 / 95 % เครื่องให้

มือถือแนบมาทดสอบสารละลายความเข้มข้นต่างๆ ( 10  μลิตร ) เพิ่ม

เหล่านี้แล้วบ่ม 48 ไหม H ภายใต้เงื่อนไขข้างต้น ที่จุดสิ้นสุดของระยะเวลา μ

10 ลิตร tetrazolium รีเอเจนต์ถูกเพิ่มลงในแต่ละหลุม ตามด้วยเพิ่มเติมบ่มที่ 37 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 4

 °รึเปล่า .และน่าน คือ ริน และ DMSO ( 100  μลิตร ) เพิ่มให้

formosan ขณะ ความหนาแน่นของแสง ( OD ) ของแต่ละคนก็ถูกตรวจพบใช้

อ่านพื้นที่ภาคเหนือของประเทศไทยที่ 550 ไหม nm และแก้ไขที่ 595 รึเปล่า nm . แต่ละการกำหนดแสดง

ค่าเฉลี่ยของ 6 ได้แก่ สารความเข้มข้น 50% ( ic50 มั้ยค่า

) ถูกกำหนดโดยการปรับเส้นโค้ง