Fig. 6. Effect of Plaunotol on NF-κ

Fig. 6. Effect of Plaunotol on NF-κB and IκB phosphorylation. (A) RGM1 cells were seeded at 3.8 × 105 in 6-well plates. After serum-starved for 24 h, medium containing 10% FBS and 50 μM plaunotol was added for 15 min. Then, cells were harvested and used for Western blot analysis with phosphorylated-NF-κB and phosphorylated-IκB antibodies. TNF-alpha was used as the positive control. (B) Cell culture and treatment with plaunotol was as same as that in (A). The nuclear protein was harvested and the nuclear translocation of NF-κB was detected with EMSA. TNF-alpha was also used as the positive control. Line 1: no probe; line 2: plaunotol 0 μM (hot probe); line 3: plaunotol 50 μM (hot probe); line 4: TNF-alpha 20 ng/ml (hot probe); line 5: plaunotol 0 μM (cold probe); line 6: plaunotol 50 μM (cold probe); line 7: TNF-alpha 20 ng/ml (cold probe).

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

มะเดื่อ 6 ผลของการที่ plaunotol nf-κbและiκb phosphorylation (ก) เซลล์ rgm1 เมล็ดที่ 3.8 × 105 ในแผ่น 6 ดี หลังจากซีรั่ม-หิวโหยเวลา 24 ชั่วโมงขนาดกลางที่มี FBS 10% และ 50 ไมโครเมตร plaunotol ถูกบันทึกเป็นเวลา 15 นาที จากนั้นเซลล์ถูกเก็บเกี่ยวและใช้ในการวิเคราะห์ดวงตะวันด้วย phosphorylated-nf-κbและ phosphorylated-iκbแอนติบอดี TNF-alpha ถูกใช้เป็นควบคุมบวก(ข) การเพาะเลี้ยงเซลล์และการรักษาด้วย plaunotol เป็นเช่นเดียวกับที่ใน (ก) โปรตีนนิวเคลียร์ได้รับการเก็บเกี่ยวและการโยกย้ายนิวเคลียร์ของ nf-κbถูกตรวจพบด้วย Emsa TNF-alpha ยังใช้เป็นควบคุมบวก 1 สาย: ไม่สอบสวน; สาย 2: plaunotol 0 ไมโครเมตร (สอบสวนร้อน); เส้นที่ 3: plaunotol 50 ไมโครเมตร (สอบสวนร้อน); เส้นที่ 4: TNF-alpha 20 ng / ml (สอบสวนร้อน); สาย 5: plaunotol 0 ไมโครเมตร ( สอบสวนเย็น);สาย 6: plaunotol 50 ไมโครเมตร (สอบสวนเย็น); สาย 7: TNF-alpha 20 ng / ml (หัววัดเย็น)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

Fig. 6 ผลของ Plaunotol phosphorylation NF κB และ IκB (A) เซลล์ RGM1 มี seeded ที่ 3.8 × 105 ในดี 6 แผ่น หลังจากเซรั่ม-starved สำหรับ 24 ชม กลางประกอบด้วย 10% FBS และ 50 μM plaunotol เพิ่มสำหรับ 15 นาที แล้ว เซลล์ถูกเก็บเกี่ยว และใช้สำหรับการวิเคราะห์คืนในตาตะวันตกกับ phosphorylated NF κB และ phosphorylated IκB แอนตี้ TNF alpha ถูกใช้เป็นตัวควบคุมบวก เพาะเลี้ยงเซลล์ (B) และการบำบัด ด้วย plaunotol เป็นเช่นเดียวกับที่ใน (A) โปรตีนนิวเคลียร์ถูกเก็บเกี่ยว และการสับเปลี่ยนนิวเคลียร์ของ NF-κB พบกับ EMSA TNF alpha ยังใช้เป็นตัวควบคุมบวก บรรทัดที่ 1: โพไม่รบ บรรทัด 2: plaunotol 0 μM (ร้อนโพรบ); บรรทัด 3: plaunotol 50 μM (ร้อนโพรบ); สาย 4: TNF-อัลฟา 20 ng/ml (พร้อมโพรบ); บรรทัด 5: μM plaunotol 0 (เย็นโพรบ); สาย 6: plaunotol 50 μM (เย็นโพรบ); สาย 7: TNF-อัลฟา 20 ng/ml (โพรบเย็น)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

รูป. 6 . ผลของ plaunotol บน NF , A - κb และ iκb phosphorylation . ( A ) 1 เซลล์ rgm เป็นเม็ดที่แผ่นความร้อน 3.8 × 105 ใน 6 - เป็นอย่างดี หลังจากเจลมาสก์มอยเจอร์ไรเซอร์ - อดอยากหิวโหยสำหรับ 24 ชั่วโมง,ขนาดกลางที่มี 10% และ FBS สำหรับผู้ป่วยเบาหวาน 50 μ m plaunotol ได้ถูกเพิ่มลงใน 15 นาทีจากนั้นให้เซลล์ก็เก็บเกี่ยวและใช้สำหรับการวิเคราะห์แบบตะวันตกทำให้เสียไปด้วย phosphorylated - NF , A - κb และ phosphorylated - iκb เมื่อเส้นเลือด. tnf - แอลฟาถูกใช้เป็นการควบคุมในเชิงบวกที่( B )และการรักษาวัฒนธรรมเซลล์ plaunotol เป็นเหมือนกับว่าใน( a ) โปรตีนจากอาวุธนิวเคลียร์ก็เก็บเกี่ยวและ translocation นิวเคลียร์ของ NF A - κb มีการตรวจพบกับ emsa tnf - ตัวอักษรและถูกใช้เป็นการควบคุมในเชิงบวกที่ยัง สายที่ 1 :ไม่มีการสอบสวน; 2 : plaunotol 0 μ m (ความร้อนอุปกรณ์ตรวจสอบ);สาย 3 : plaunotol 50 μ m (ความร้อนอุปกรณ์ตรวจสอบ);สาย 4 : tnf - แอลฟา 20 NG / ML (ร้อนตรวจสอบ);สาย 5 : plaunotol 0 μ m (เย็นงัดแงะ);สาย 6 plaunotol 50 μ m (ตรวจสอบความเย็น)สาย 7 tnf - แอลฟา 20 NG / ML (อุปกรณ์ตรวจสอบน้ำเย็น)