BRIEF DESCRIPTION OF THE FIGURES:5

BRIEF DESCRIPTION OF THE FIGURES:
5 Figure 1 shows the kinetics of IgG Abs in BALB/c mice (n = 5) immunized subcutaneously
four times every 14 days, and 30 days after the last immunization with 100 pg of ECD-Her1 and 100 Jug of ECD-Her2 in 200,ug of VSSPs. Blood draws were performed on days 7, 21, 35, 56, 87 and 102 to measure IgG Abs titers in the immune sera using ELISA assay. Abs
IgG kinetics are expressed as the Log (1/titre media+1) for each extraction day, when it was 10 coated with the ECD-Her1 (a) and ECD-Her2 (b). Abs response of individual mice (n = 5) is
shown in the figure, the response is specific to ECD-HER1 (c) and ECD-Her2 (d) and was
measured by plotting the reciprocal logarithm of the Abs title plus 1, on day 87 of the
immunization protocol. Different letters indicate statistical significance as tested by two-way
ANOVA (treatment group factor), using Bonferroni test correction (p

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

คำอธิบายโดยย่อของตัวเลข:รูปที่ 5 แสดง 1 จลนพลศาสตร์ของ IgG Abs ในหนู BALB/c (n = 5) immunized subcutaneously4 ครั้งทุก 14 วัน และ 30 วันหลังจากรับวัคซีนล่าสุด 100 pg Her1 เบาะแสและ 100 เหยือกของเบาะแส-Her2 ใน 200 ยูจีเลือด VSSPs วาดได้ดำเนินการในวันที่ 7, 21, 35, 56, 87 และ 102 วัด titers IgG Abs จะภูมิคุ้มกันที่ใช้ทดสอบ ELISA ในการ AbsIgG จลนพลศาสตร์แสดงเป็นล็อก (1/titre สื่อ + 1) วันสกัด เมื่อมันเป็นเคลือบ ด้วยเบาะแส-Her1 (a) และเบาะแส Her2 (ข) 10 ตอบ abs ของหนูแต่ละตัว (n = 5) คือ แสดงในภาพ การตอบสนองเฉพาะเบาะแส-HER1 (c) และเบาะแส-Her2 (d) และมี วัด โดยการพล็อตลอการิทึมซึ่งกันและกันของชื่อ Abs 1 วันที่ 87 โพรโทคอลรับวัคซีน ตัวอักษรที่แตกต่างกันว่า นัยสำคัญทางสถิติเป็นทดสอบ โดยสอง การวิเคราะห์ความแปรปรวน (รักษาปัจจัยกลุ่ม), การใช้การแก้ไขทดสอบ Bonferroni (p < 0.05) รูปที่ 15 แสดง 2 การรับรู้ของ MCF7/HER2 และ MDAMB468 เนื้องอกเซลล์บรรทัดโดยภูมิคุ้มกัน จะเกิดจากวัคซีนชนิดไบวาเลนต์ Herl + Her2 น่ารู้ monovalent Her1 และ Her2 ใช้เซลล์กระแส รายการเซลล์เนื้องอกที่บุคคลดังกล่าวถูก incubated กับการ จะภูมิคุ้มกัน (n = 5) หรือ มีของผสมของภูมิคุ้มกันก่อนจะทำให้เจือจาง 1: 200 ในวันที่ 35 ของการ โพรโทคอลรับวัคซีน ตลอดจนการควบคุมค่าของรีเซปเตอร์: nimotuzumab MAbs 20 และ trastuzumab ที่ความเข้มข้น 10 ยู จี/ml ในเวลาต่อมา เซลล์ได้ ชื่อแพะ PAbs ป้องกันเมาส์กลวง IgG กับ fluorescein isothiocyanate ที่ ป้ายเซลล์มี visualized โดยเซลล์กระแส เปอร์เซ็นต์ของเซลล์ที่รับรู้โดยการ นโยบายและ MAbs ถูกกำหนดโดยใช้ไหลโจ้รุ่นซอฟต์แวร์ 5.7.2 ตัวอักษรที่แตกต่างกัน ระบุนัยสำคัญทางสถิติเป็นทดสอบ โดยการวิเคราะห์ความแปรปรวนสองทาง (รักษาปัจจัยกลุ่ม), ใช้แก้ไขทดสอบ Bonferroni 25 (p < 0.05)รูปที่ 3 แสดงการรู้ของบรรทัดเซลล์เนื้องอก H292 โดยภูมิคุ้มกันจะเกิดจากวัคซีนชนิดไบวาเลนต์ Her1 + Her2 และ monovalent รู้ Her1 และ Her2 ใช้วิเคราะห์เซลล์ เซลล์เนื้องอกที่มนุษย์ถูก incubated ในวันที่ 35 ของโพรโทคอลรับวัคซีนกับภูมิคุ้มกันจะ (n = 5)หรือของผสมของก่อน-ภูมิคุ้มกันจะทำให้ 1:300 ตลอดจนควบคุมของนิพจน์ 30 รีเซปเตอร์: MAbs nimotuzumab และ trastuzumab ที่ความเข้มข้นของ 10pg/ml ในเวลาต่อมา เซลล์ถูกป้าย ด้วยแพะ PAbS ป้องกันเมาส์ IgG กลวงด้วย fluorescein isothiocyanate เซลล์มีป้ายชื่อมี visualized โดยเซลล์กระแส ที่ กำหนดเปอร์เซ็นต์ของเซลล์ที่รับรู้นโยบายและ MAbs ใช้ไหลโจ้ ซอฟต์แวร์เวอร์ชัน 5.7.2 ตัวอักษรต่าง ๆ ระบุนัยสำคัญทางสถิติเป็นการทดสอบโดยการวิเคราะห์ความแปรปรวน 35 สอง (รักษาปัจจัยกลุ่ม), ใช้ Bonferroni ทดสอบแก้ไข (p < 0.05) รูปที่ 4 แสดงยับยั้ง Her2 และ Her1 ฟอสโฟรีเลชันสาเหตุจะภูมิคุ้มกัน เกิดโดย Her1 + Her2 วัคซีนชนิดไบวาเลนต์ H292 เซลล์ถูก incubated ในการของผสม 5 ภูมิคุ้มกันจะเกิดจากวัคซีนชนิดไบวาเลนต์ Herl + Her2 และ Her1 รู้ Monovalent และ Her2 ระดับของ Her1 และ Her2 ฟอสโฟรีเลชันหลังการกระตุ้น ด้วย EGF และรักษาที่แตกต่างกันถูกกำหนด โดยคืนในตาตะวันตก เซลล์ไม่ถูกรักษาถูกใช้เป็นค่าลบการควบคุมและการรักษา ด้วยของผสมจะภูมิคุ้มกันก่อน (PI) เป็นตัวควบคุมลบ 5 ของ specificity TKI AG1478 ถูกใช้เป็นตัวควบคุมค่าบวกในการยับยั้งการ ที่ ภาพแสดงระดับของ P Her1 (ก) และ (ข) การได้รับ P Her2 กับการรักษาที่แตกต่างกัน บาร์ กราฟแสดงการวิเคราะห์ภาพจากการทดลองหนึ่งตัวแทน densitometric เลือกจากการทดลองที่ดำเนินการรูปที่ 5 แสดงผลต้าน proliferative ต้นของ Abs ที่เหนี่ยวนำ โดย Herl + Her2 10 วัคซีน bivalent ในบรรทัด H292 เนื้องอก H292 เซลล์ที่ incubated ภายใน 48 ชั่วโมงในของผสมห้าจะภูมิคุ้มกัน ทำให้เจือจาง 1:20 วันที่ 87 ของโพรโทคอลการรับวัคซีน ของผสมของพี่จะถูกใช้เป็นตัวควบคุมค่าลบในการทดลอง เซลล์นี้ถูกกำหนด โดย MTT เทียบเคียงวิธีการ การกำหนดความแตกต่างของความหนาแน่นออปติคอล (OD) โดยการลบ OD ที่540 ค่า OD ที่ 620 nm เปอร์เซ็นต์สูงสุดนี้ได้ค้นพบเมื่อ 15 ลบต่าง absorbance ของคณะทันตแพทยศาสตร์กับเซรั่มของพี่ แถบแสดง หมายความว่า triplicates การทดลองที่ 3 การรักษาแต่ละ ระบุตัวอักษรแตกต่างกัน นัยสำคัญทางสถิติตามทดสอบ Dunnett T3 vs b, p < 0.01 สำหรับการเปรียบเทียบกับ c, p < 0.001 รูปที่ 6 แสดง titers Abs ที่รู้เบาะแส Her1 และเบาะแส Her2 เกิดจาก วัคซีนชนิดไบวาเลนต์ Her2 Her1 + สูตรที่ประกอบด้วยจำนวนเท่า หรือไม่เท่ากันของแต่ละตัวรับ 20 หนู BALB/c (n = 5) ที่ immunized subcutaneously 4 ครั้งทุก 14 วันด้วย:กลุ่ม 1, pg 100 ของเบาะแส - Her1 และเบาะแส - Her2; 100 เหยือก กลุ่ม 2, 100 ยูจีของเบาะแส - Her1และ 200 ยูจีของเบาะแส - Her2 กลุ่ม 3, 100 ยูจีของเบาะแส - Her1 และ 300 ยูจีของเบาะแส - Her2 กลุ่ม 4, 200 ยูจี Her1 เบาะแสและ 100 ยูจีเบาะแส-Her2 กลุ่ม 5, 300 pg เบาะแส - Her1 และ 100 เหยือก เบาะแส - Her2 สูตรทั้งหมดประกอบด้วย 200 ยูจีของ VSSP กำหนดของ Her1 เบาะแสและ 25 เบาะแส Her2 แอนติบอดีเฉพาะ titers ทำตามในซีรั่มโดยวิธี ELISA การ assay จากวาดเลือดมาวัน 56 จลนพลศาสตร์ abs IgG จะแสดงเป็นสื่อของ เข้าสู่ระบบซึ่งกันและกันบวกหนึ่งวันสกัด เมื่อมันถูกเคลือบ ด้วยเบาะแส-Her1 (a) และเบาะแส-Her2 (b) IgG Abs การตอบสนองของหนูแต่ละตัว (n = 5) ถูกกำหนด โดยการพล็อต ค่าผกผันของ titers แอนติบอดี30 ไม่ต่างทางสถิติเป็นการทดสอบโดยการวิเคราะห์ความแปรปรวนสองทาง (รักษาปัจจัยกลุ่ม), ใช้แก้ไขทดสอบ Bonferroni (p < 0.05) สุภัค ตัวอย่างต่อไปนี้จะหมายถึงเฉพาะการแสดง แต่ ในแบบไม่จำกัด ข้อถือสิทธิed การประดิษฐ์ตัวอย่าง:ตัวอย่างที่ 35 1: แอนตี้เฉพาะที่เกิดขึ้นกับ Her1 เบาะแสและ DEC Her2 ชื่อโดยวัคซีนชนิดไบวาเลนต์ Herl + Her2หนู Balb/c ที่ immunized subcutaneously มีกำหนดวัคซีนชนิดไบวาเลนต์ที่ประกอบด้วย pg 100 ของ Her1 เบาะแสและ pg 100 ของ Her2 เบาะแส กลุ่มที่สองของหนูที่ immunized กับกำหนด monovalent วัคซีนที่ประกอบด้วย pg 100 ของเบาะแส - Her1 และกลุ่มที่สามที่ immunized กับกำหนด monovalent วัคซีนที่ประกอบด้วย pg 100 ของ Her2 เบาะแส ที่5 สูตรวัคซีนทั้งสามที่กล่าวถึงมีอยู่ 200 pg ของ VSSP สารเสริม Immunizationsได้ดำเนินการในวันที่ 0, 14, 28, 42 และ 72 และเลือดออกกระบวนการเซรั่มที่วัน -2, 21, 56, 87 และ 102 แอนติบอดีที่เฉพาะ titers ECDs Her1 และ Her2 ในซีรั่มถูกกำหนดโดยใช้วิธี ELISAหนู immunized กับวัคซีนชนิดไบวาเลนต์ Herl + Her2 ยกเฉพาะ IgG isotype แอนตี้ 10 Her1 เบาะแสและ Her2 เบาะแส Titers แอนติบอดีที่เกิดกับของเหล่านี้ รีเซปเตอร์ได้ไม่แตกต่างจากที่เกิดจากรู้ monovalent ตามลำดับ ใน กรณีของการตอบสนองของแอนติบอดีต่อเบาะแส-Her1 ทั้ง titers เหนี่ยวนำ โดย Her1 + Her2 วัคซีนชนิดไบวาเลนต์และวัคซีน monovalent ถึงค่า 1/10.000 การตอบสนอง จากเบาะแส Her2 เกิด ทั้ง bivalent และวัคซีน monovalent ถึงค่า titers แอนติบอดี 15 ของ 200.000 1 (รูปที่ 1)ผลนี้แสดงว่า ผสมรีเซปเตอร์สองในกำหนดวัคซีนเดียวไม่มีผลต่อ อิมมูโนเจนicity ของแต่ละรายบุคคล ซึ่งตรวจสอบอาจมีการใช้วัคซีนกำหนดนี้20 ตัวอย่าง 2: การรับรู้ของ Her1 + /mts Her2 ", Herillier2 + บรรทัดเนื้องอก โดยจะเกิดจากวัคซีนชนิดไบวาเลนต์ Herl + Her2จะจากหนู immunized กับวัคซีนชนิดไบวาเลนต์ Her1 + Her2 และ Monovalentรู้ Her1 และ Her2 ผสม 1/200 ได้ incubated 105 เซลล์ของเซลล์เนื้องอกต่าง ๆบรรทัด: MDA-MB468 (ATCC, HTB-132), มาจากเต้านม adenoคาร์ซิโนมา และ25 MCF7/Her2 สร้างจาก transfection ของ MCF7 บรรทัดเซลล์ (ATCC HTB-22) และแบบเต็มความยาว Her2 จะปี่ถูกใช้เป็นตัวควบคุม specificity ลบ มาบ nimotuzumab ที่รู้จัก Her1 และ Herceptin monoclonal แอนติบอดี ที่รู้จัก Her2 ถูกใช้เป็นตัวควบคุมบวกจะสร้างวัคซีนชนิดไบวาเลนต์ที่รู้จักเปอร์เซ็นต์เดียวของ MDA-เซลล์ MB468 30 เป็นนโยบายที่สร้างขึ้น โดย Her1 วัคซีน Monovalent นอกจากนี้ จะ สร้างโดยวัคซีนชนิดไบวาเลนต์ที่รู้จักเซลล์ MCF7/Her2 เป็นเปอร์เซ็นต์เดียวกัน นโยบายที่สร้างขึ้น โดยวัคซีน Monovalent Her2 ตามการทดสอบของ Dunnett T3 (p > 0.05) (รูปที่ 2) ความรุนแรงของการรับรู้ของรีเซปเตอร์เหล่านี้ยังเป็นคล้ายกันมาก (ตารางที่ 1) นี้แสดงให้เห็นว่า แอนตี้ที่ทำให้เกิดประกอบด้วย 35 ตัดแบ่ง bivalent Her1 และ Her2 รีเซปเตอร์มีผลต่อการรับรู้ของ Her1 ขนาดเต็ม และ Her2 รีเซปเตอร์ในเมมเบรนของเซลล์เนื้องอก มันยังแสดงให้เห็นว่าคุณภาพของ ไม่มีผลต่อการรับรู้เมื่อมีสร้างแอนตี้ Her1 และ Her2 จากการกำหนดตามทั้งรีเซปเตอร์ เนื่องจากการรู้เป็นที่ได้รับพร้อมจะจากรู้ monovalent ทั้งจำนวนในเซลล์ที่รับรู้และความเข้มของการรู้MDAMB 468 MCF7/Her2รักษาMFI MFIVac Herl + Her2 440,05 140,99Vac Herl 370,23 4,31Vac Her2 4,02 104,055 Tablel: หมายถึง ค่าเฉลี่ยความเข้ม (MFI) fluorescence ของเซลล์ MDAMB468 และ MCF7/HER2รับรู้ โดยจะภูมิคุ้มกันที่สร้างขึ้น โดยการรักษาตัวอย่างที่ 3: การรับรู้ของ Her1 + /mts Her2 + บรรทัดเนื้องอก โดยจะเกิดจากวัคซีนชนิดไบวาเลนต์ Herl + Her2นโยบาย 10 จากหนูที่ immunized วัคซีนชนิดไบวาเลนต์ Herl + Her2 และรู้ monovalent Her1และ Her2, 1 300 แตกออกได้ incubated กับบรรทัดของเซลล์เนื้องอก H292 (ATCC CR

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

คำอธิบายสั้น ๆ ของตัวเลข:
5 รูปที่ 1 แสดงจลนศาสตร์ของ IgG Abs ใน Balb / C หนู (n = 5)
วัคซีนใต้ผิวหนังสี่ครั้งทุก14 วันและ 30 วันหลังการฉีดวัคซีนก่อนที่มี 100 หน้าของ ECD-Her1 และ 100 ภ ของ ECD-HER2 ใน 200 ไมโครกรัมของ VSSPs เลือดจับได้ดำเนินการในวันที่ 7, 21, 35, 56, 87 และ 102 ในการวัด IgG Abs titers ในซีรั่มของระบบภูมิคุ้มกันที่ใช้ทดสอบ ELISA Abs
จลนศาสตร์ IgG จะแสดงเป็นเข้าสู่ระบบ (1 / สื่อ titre + 1) ในแต่ละวันการสกัดเมื่อมันเป็น 10 เคลือบด้วย ECD-Her1 (ก) และ ECD-HER2 (ข) การตอบสนองต่อเอบีเอสของหนูของแต่ละบุคคล (n = 5)
จะแสดงในรูปของการตอบสนองเป็นเฉพาะกับECD-HER1 (ค) และ ECD-HER2 (ง)
และได้รับการวัดจากพล็อตลอการิทึมซึ่งกันและกันของชื่อAbs บวก 1 บน วันที่ 87
ของโปรโตคอลการสร้างภูมิคุ้มกันโรค ตัวอักษรที่แตกต่างกันแสดงให้เห็นนัยสำคัญทางสถิติในขณะที่การทดสอบโดยสองทาง
ANOVA (ปัจจัยที่กลุ่มการรักษา) โดยใช้การแก้ไขการทดสอบ Bonferroni (p <0.05).
15 รูปที่ 2 แสดงให้เห็นถึงการรับรู้ของ MDAMB468 และ MCF7 / HER2
เซลล์เนื้องอกโดยภูมิคุ้มกันซีรั่มที่เกิดจากวัคซีนชนิดไบวาเลนต์ Herl + HER2 และวัคซีน monovalent Her1 และ HER2,
ใช้โฟ เส้นเซลล์มะเร็งของมนุษย์ดังกล่าวถูกบ่มกับซีรั่มภูมิคุ้มกัน (n = 5) หรือกับของผสมของซีรั่มก่อนภูมิคุ้มกันเจือจาง 1: 200 ในวันที่ 35 ของโปรโตคอลการฉีดวัคซีนเช่นเดียวกับการควบคุมการแสดงออกของรีเซปเตอร์: 20 nimotuzumab โคลนและ trastuzumab, ที่ความเข้มข้น 10 ไมโครกรัม / มิลลิลิตร ต่อจากนั้นเซลล์ถูกกำกับด้วย PABS แพะ IgG ป้องกันเมาส์ผันกับ fluorescein isothiocyanate เซลล์ที่มีข้อความที่ถูกมองเห็นโดยโฟ ร้อยละของเซลล์ที่ได้รับการยอมรับจากซีรั่มและโคลนถูกกำหนดโดยใช้ซอฟต์แวร์รุ่นไหลโจ 5.7.2 ตัวอักษรที่แตกต่างกันแสดงให้เห็นนัยสำคัญทางสถิติในขณะที่การทดสอบโดยสองทาง ANOVA (ปัจจัยที่กลุ่มการรักษา) โดยใช้การแก้ไขการทดสอบ25 Bonferroni (p <0.05). รูปที่ 3 แสดงให้เห็นถึงการรับรู้ของเซลล์เนื้องอก H292 ด้วยซีรั่มภูมิคุ้มกันที่เกิดจากวัคซีนชนิดไบวาเลนต์ Her1 + HER2 และวัคซีน monovalent Her1 และ HER2 ใช้โฟ เซลล์มะเร็งของมนุษย์ถูกบ่มในวันที่ 35 ของโปรโตคอลการสร้างภูมิคุ้มกันที่มีภูมิคุ้มกันซีรั่ม (n = 5) หรือกับของผสมก่อน -immune ซีรั่มเจือจาง 1: 300 เช่นเดียวกับการควบคุมของ 30 การแสดงออกของรีเซปเตอร์ไปนี้: โคลน nimotuzumab และ trastuzumab ที่ความเข้มข้น 10pg / มล. ต่อจากนั้นเซลล์ถูกกำกับด้วย PABS แพะต่อต้านเมาส์ IgG ผันกับisothiocyanate fluorescein เซลล์ที่มีข้อความที่ถูกมองเห็นโดยโฟ ร้อยละของเซลล์ที่ได้รับการยอมรับจากซีรั่มและโคลนถูกกำหนดโดยใช้กระแสโจซอฟต์แวร์รุ่น 5.7.2 ตัวอักษรที่แตกต่างกันแสดงให้เห็นนัยสำคัญทางสถิติในขณะที่การทดสอบโดยสองทาง 35 ANOVA (ปัจจัยที่กลุ่มการรักษา) โดยใช้การแก้ไขการทดสอบ Bonferroni (p <0.05). รูปที่ 4 แสดงการยับยั้งการ Her1 และ HER2 ฟอสโฟรีเลชันที่เกิดจากซีรั่มภูมิคุ้มกันที่เกิดจากวัคซีนชนิดไบวาเลนต์ Her1 + HER2 บริหาร เซลล์ H292 ถูกบ่มในของผสมในห้าของซีรั่มที่เกิดจากภูมิคุ้มกันของวัคซีนชนิดไบวาเลนต์Herl + HER2 และ monovalent วัคซีน Her1 และ HER2 ระดับของ Her1 HER2 และฟอสโฟรีเลชันหลังจากการกระตุ้นด้วย EGF และกับการรักษาที่แตกต่างกันได้รับการพิจารณาโดยดวงตะวัน เซลล์บำบัดถูกนำมาใช้เป็นตัวควบคุมเชิงลบและการรักษาที่มีของผสมของซีรั่มก่อนภูมิคุ้มกัน (PI) เป็น 5 การควบคุมเชิงลบของความจำเพาะ TKI AG1478 ถูกใช้เป็นตัวควบคุมในเชิงบวกสำหรับการยับยั้ง ภาพแสดงระดับของ P-Her1 (ก) และ P-HER2 (ข) ได้รับการรักษาที่แตกต่างกันด้วย บาร์กราฟแสดงการวิเคราะห์ densitometric ของภาพที่ได้จากการทดลองตัวแทนหนึ่งได้รับการแต่งตั้งจากทั้งสองการทดลองดำเนินการ. รูปที่ 5 แสดงให้เห็นถึงฤทธิ์ต้านการเจริญของ Abs เกิดจาก Herl + HER2 bivalent 10 วัคซีนในบรรทัดเนื้องอก H292 เซลล์ H292 ถูกบ่มเป็นเวลา 48 ชั่วโมงในของผสมในห้าของซีรั่มภูมิคุ้มกันเจือจาง1:20 ในวันที่ 87 ของโปรโตคอลสร้างภูมิคุ้มกัน ของผสมของซีรั่ม PI ถูกนำมาใช้เป็นตัวควบคุมเชิงลบในการทดลอง มีชีวิตเซลล์ถูกกำหนดโดยวิธีการสี MTT กำหนดความแตกต่างของความหนาแน่นของแสง (OD) โดยการลบ OD ที่540 มูลค่าของ OD ที่ 620 นาโนเมตร เปอร์เซ็นต์ความมีชีวิตสูงสุดถูกพบเมื่อวันที่ 15 ลบความแตกต่างของการดูดกลืนแสงของการบ่มด้วยเซรั่มพีไอ บาร์เป็นตัวแทนของค่าเฉลี่ยของ triplicates สามการทดลองสำหรับการรักษาแต่ละ ตัวอักษรที่แตกต่างกันแสดงให้เห็นนัยสำคัญทางสถิติตามการทดสอบ Dunnett T3 สำหรับเทียบข, p <0.01 สำหรับเทียบ C, p <0.001. รูปที่ 6 แสดง titers ของ Abs ที่รู้จัก ECD-Her1 และ ECD-HER2 เหนี่ยวนำโดยวัคซีนชนิดไบวาเลนHer1 ต์ + สูตร HER2 ที่มีเท่ากันหรือไม่เท่ากันของแต่ละ20 รับ หนู Balb / c (n = 5) ได้รับวัคซีนใต้ผิวหนังสี่ครั้งทุก 14 วันกับกลุ่มที่1, 100 หน้าของ ECD- Her1 และ 100 เหยือก ECD- HER2; กลุ่มที่ 2, 100, ไมโครกรัมของ ECD- Her1 และ 200 ไมโครกรัมของ ECD- HER2; กลุ่มที่ 3, 100, ไมโครกรัมของ ECD- Her1 และ 300 ไมโครกรัมของ ECD- HER2; กลุ่มที่ 4, 200 ไมโครกรัมของ ECD-Her1 และ 100 ไมโครกรัม ECD-HER2; กลุ่มที่ 5, 300 หน้า ECD- Her1 และ 100 ภECD- HER2 สูตรทั้งหมดที่มี 200 ไมโครกรัมของ VSSP ความมุ่งมั่นของ ECD-Her1 และ 25-ECD HER2 แอนติบอดีที่เฉพาะเจาะจง titers ที่ได้รับการดำเนินการเกี่ยวกับซีรั่มโดยวิธี ELISA ของการทดสอบจากการวาดเลือดที่นำมาในวันที่56 Abs จลนศาสตร์ IgG จะแสดงเป็นสื่อที่เข้าสู่ระบบซึ่งกันและกันบวกหนึ่งสำหรับแต่ละวันสกัดเมื่อมันถูกเคลือบด้วย ECD-Her1 (ก) และ ECD-HER2 (ข) การตอบสนอง IgG Abs ของหนูของแต่ละบุคคล (n = 5) ถูกกำหนดโดยการวางแผนผกผันของtiters แอนติบอดี. 30 ไม่มีความแตกต่างทางสถิติในขณะที่การทดสอบโดยสองทาง ANOVA (ปัจจัยที่กลุ่มการรักษา) โดยใช้การแก้ไขการทดสอบBonferroni (p <0.05) ถูกตั้งข้อสังเกต . ตัวอย่างต่อไปนี้มีความหมายเพียงเพื่อแสดงให้เห็น แต่ในทางที่จะ จำกัด การไม่มีข้อถือสิทธิเอ็ดการประดิษฐ์. ตัวอย่าง: 35 ตัวอย่างที่ 1: แอนติบอดีเฉพาะชื่อขึ้นกับ ECD-Her1 และธันวาคม-HER2 เหนี่ยวนำโดยHerl + HER2 วัคซีนชนิดไบ วาเลนต์หนูBalb / c ได้รับวัคซีนใต้ผิวหนังกับวัคซีนชนิดไบวาเลนต์สูตรที่มี 100 หน้าของ ECD-Her1 และ 100 หน้าของ ECD-HER2 กลุ่มที่สองของหนูที่ได้รับวัคซีนที่มีสูตรวัคซีน monovalent มี 100 หน้าของ ECD- Her1 และกลุ่มที่สามได้รับวัคซีนที่มีสูตรวัคซีน monovalent มี 100 หน้าของ ECD-HER2 5 สูตรที่สามที่กล่าวถึงวัคซีนที่มีอยู่ 200 หน้าของ VSSP สารเสริม การฉีดวัคซีนได้ดำเนินการในวันที่ 0, 14, 28, 42 และ 72 และเลือดถูกดึงออกมาสำหรับการประมวลผลซีรั่มวัน-2, 21, 56, 87 และ 102 ระดับแอนติบอดีที่เฉพาะเจาะจงกับ ECDs ของ Her1 และ HER2 ในซีรั่มมี กำหนดใช้วิธี ELISA. หนูวัคซีนกับ Herl + HER2 วัคซีนชนิดไบวาเลนต์ยก IgG แอนติบอดีที่เฉพาะเจาะจง isotype 10 กับ ECD-Her1 และ ECD-HER2 ระดับแอนติบอดีเหนี่ยวนำกับแต่ละเหล่านี้รีเซปเตอร์ไม่ได้แตกต่างจากที่เกิดจากวัคซีน monovalent ที่เกี่ยวข้อง ในกรณีที่มีการตอบสนองของแอนติบอดีกับ ECD-Her1 ที่ทั้งเชื้อที่เกิดจาก Her1 + HER2 วัคซีนชนิดไบวาเลนต์และวัคซีน monovalent ถึง 1 / 10.000 ค่า การตอบสนองต่อ ECD-HER2 เหนี่ยวนำทั้งโดย bivalent และวัคซีน monovalent ถึง 15 แอนติบอดีค่า titers 1 / 200.000 (รูปที่ 1). ผลที่ได้นี้แสดงให้เห็นว่าการผสมทั้งสองรีเซปเตอร์ในสูตรวัคซีนเดียวไม่ได้ส่งผลกระทบต่ออิ . มมูโนเจน icity ของแต่ละของพวกเขาเป็นรายบุคคลซึ่งจะตรวจสอบการใช้งานที่มีศักยภาพของการกำหนดวัคซีนนี้20 ตัวอย่างที่ 2: การรับรู้ Her1 + / HER2 "Herillier2 + สายเนื้องอกจากซีรั่มที่เกิดจากวัคซีนชนิดไบวาเลนต์Herl + HER2 ซีรั่ม จากหนูวัคซีนกับวัคซีนชนิดไบวาเลนต์ Her1 + HER2 และ monovalent วัคซีน Her1 และ HER2 เจือจาง 1/200 ถูกบ่มกับ 105 เซลล์ของเซลล์มะเร็งที่แตกต่างกันบรรทัด: MDA-MB468 (ATCC, HTB-132) ที่ได้มาจากเต้านม adeno คาร์ซิโนมาและ25 MCF7 / HER2 สร้างจาก transfection ของ MCF7 นี้ (ATCC HTB-22) สายเต็มเซลล์ที่มีความยาวHER2. โดยซีรั่ม PI ถูกนำมาใช้เป็นตัวควบคุมความจำเพาะเชิงลบ. โดย nimotuzumab ไฟ, ที่ตระหนักถึง Her1 และแอนติบอดี Herceptin, ที่ตระหนักถึง HER2 ถูกนำมาใช้เป็นตัวควบคุมบวก. ซีรั่มที่สร้างโดยวัคซีนชนิดไบวาเลนต์ได้รับการยอมรับร้อยละเดียวกันของ MDA- 30 เซลล์ MB468 เป็นซีรั่มที่สร้างขึ้นโดย monovalent วัคซีน Her1 นอกจากนี้ซีรั่มสร้างโดยวัคซีนชนิดไบวาเลนต์ได้รับการยอมรับร้อยละเดียวกันของ MCF7 / เซลล์ HER2 เป็นซีรั่มที่สร้างขึ้นโดยmonovalent วัคซีน HER2 ตาม Dunnett ของ T3 (p> 0.05) การทดสอบ(รูปที่ 2) ความรุนแรงของการรับรู้ของเหล่ารีเซปเตอร์ก็ยังคล้ายกันมาก (ตารางที่ 1). นี้แสดงให้เห็นว่าแอนติบอดี้เหนี่ยวนำให้เกิดการกำหนด bivalent มี 35 ตัด Her1 และ HER2 รีเซปเตอร์ไม่ส่งผลต่อการรับรู้ของขนาดเต็ม Her1 และHER2 รีเซปเตอร์ในเยื่อหุ้มเซลล์ของเซลล์มะเร็ง นอกจากนี้ยังแสดงให้เห็นว่าคุณภาพของการนี้ได้รับการยอมรับไม่ได้รับผลกระทบเมื่อแอนติบอดีต่อ Her1 และ HER2 ถูกสร้างขึ้นจากการกำหนดบนพื้นฐานของทั้งรีเซปเตอร์เนื่องจากการรับรู้เป็นเช่นเดียวกับที่ได้รับกับซีรั่มจากวัคซีนmonovalent ทั้งใน . จำนวนของเซลล์ได้รับการยอมรับและความรุนแรงของการรับรู้MDAMB 468 MCF7 / HER2 รักษาMFI MFI Vac Herl + HER2 440,05 140,99 Vac Herl 370,23 4,31 Vac HER2 4,02 104,05 5 Tablel: หมายถึงการเรืองแสง ความเข้ม (MFI) เฉลี่ยของ MDAMB468 และ MCF7 / HER2 เซลล์รับการยอมรับจากซีรั่มภูมิคุ้มกันที่เกิดจากการรักษา. ตัวอย่างที่ 3: การรับรู้ Her1 + / HER2 + สายเนื้องอกจากซีรั่มที่เกิดจาก Herl + HER2 วัคซีนชนิดไบวาเลนต์10 Sera จากหนูวัคซีน กับ Herl + HER2 วัคซีนชนิดไบวาเลนต์และวัคซีน monovalent Her1 และ HER2 เจือจาง 1/300 ถูกบ่มกับเซลล์มะเร็งเส้น H292 (ATCC CR

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

คำอธิบายโดยย่อของตัวเลขที่ :
5 รูปที่ 1 แสดงจลนศาสตร์ของ IgG ABS ในหนูสายพันธุ์ Balb / C ( n = 5 ) 5 subcutaneously
4 ครั้ง ทุก 14 วัน และ 30 วัน หลังจากได้รับของ และสุดท้ายกับ 100 - 100 ecd-her1 เหยือก ecd-her2 ใน 200 ไมโครกรัมของ vssps . ดึงเลือดจำนวนวันที่ 7 , 21 , 28 , 56 , 87 และ 102 วัด IgG ABS โดยภูมิคุ้มกันโดยใช้ ELISA ซีรั่มในการทดสอบ ABS
IgG จลนพลศาสตร์แสดงเป็น log ( 1 / titre สื่อ 1 ) แต่ละแยก วัน เมื่ออายุ 10 ขวบ เคลือบด้วย ecd-her2 ecd-her1 ( A ) และ ( B ) การตอบสนองของหนูแต่ละตัว ABS ( n = 5 )
แสดงในรูป การตอบสนองที่เฉพาะเจาะจงกับ ecd-her1 ( ค ) และ ( ง ) และ ecd-her2
วัดโดยวางแผนกฎลอการิทึมของ ABS ชื่อเรื่องบวก 1 วัน 87
ภูมิคุ้มกันโปรโตคอลตัวอักษรที่แตกต่างกันแสดงสถิติที่ทดสอบโดยการวิเคราะห์ความแปรปรวนสองทาง
( ปัจจัยกลุ่ม ) โดยใช้การแก้ไขแบบทดสอบบนเฟอโรนี ( P < 0.05 )
15 รูปที่ 2 แสดงการรับรู้และ mdamb468 mcf7 / her2 เนื้องอกเซลล์ภูมิคุ้มกันโดยการ her2
( herl วัคซีนชนิดไบวาเลนต์มก. และวัคซีนและ her1 her2
( , การไหลเซลล์เนื้องอกของมนุษย์ดังกล่าวถูกบ่มด้วย
) ภูมิคุ้มกัน ( n = 5 ) หรือกับของผสมภูมิคุ้มกันเจือจางก่อน ( 1:200 ในวันที่ 35 ของ
ภูมิคุ้มกันโปรโตคอล รวมทั้งการควบคุมของการแสดงออกของรีเซปเตอร์ : 20 nimotuzumab trastuzumab และแอนติบอดีที่ความเข้มข้น 10 ไมโครกรัมต่อมิลลิลิตร เมื่อเซลล์ถูก
ป้ายกับแพะ pabs ป้องกันเมาส์ IgG conjugated กับี่ไอโซไธโอไซยาเนต .
ป้ายเซลล์ถูกมองเห็นโดยเซลล์ไหล จำนวนเซลล์การยอมรับโดย
เซร่าและโคลนไหลโจใช้วิเคราะห์ซอฟต์แวร์รุ่น 5.7.2 . ตัวอักษรที่แตกต่างกันทางสถิติอย่าง
แสดงการทดสอบโดยการวิเคราะห์ความแปรปรวนสองทาง ( ปัจจัยกลุ่มการรักษาโดยใช้
)25 บอนเฟอร์โรนีทดสอบการแก้ไขอย่างมีนัยสำคัญทางสถิติ ( p < 0.05 ) .
รูปที่ 3 แสดงการรับรู้ของ h292 เนื้องอกเซลล์ภูมิคุ้มกันที่เกิดจากวัคซีนชนิดไบวาเลนต์ ) โดย her1 her2 มก. และวัคซีน her1 her2 ( และการไหล เซลล์เนื้องอกของมนุษย์ถูกบ่มในวันที่ 3 ของการโพรโทคอลกับภูมิคุ้มกันเซรา ( n = 5 )
หรือกับของผสมก่อน ( 1:300 ภูมิคุ้มกันเจือจาง ,