Challenge of yeast cells with exoge

Challenge of yeast cells with exogenous H2O2
Cultures were grown to mind-exponential phase (12 h ; OD600=0.5) under the conditions described above. Cells were washed twice with 100 mM potassium phosphate buffer, pH 7.4 (KPi), collected by centrifugation at 2000 g for 10 min at 25 ⁰C and divided in two fractions. The fractions were resuspended in the YPD from the original culture or in KPi, and challenged with H2O2 at 30 ⁰C for 1.5h with shaking at 225 rpm and a flask-to=medium volume ratio of 1:5 Following the challenge, the cultures were serially diluted, plated on YPD ager and incubated at 30 ⁰C for 2 days. Cell viability was determined by counting the total colony forming units (cfu) in H2O2 – challenged and untreated cultures.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ความท้าทายของเซลล์ยีสต์ด้วย H2O2 บ่อยวัฒนธรรมถูกปลูกระยะใจเนน (12 h OD600 = 0.5) ภายใต้เงื่อนไขที่อธิบายไว้ข้างต้น เซลล์ถูกล้าง ด้วย 100 มม.โพแทสเซียมฟอสเฟตบัฟเฟอร์ ค่า pH 7.4 (KPi), รวบรวม โดย centrifugation ที่ 2000 g ใน 10 นาทีที่ 25 ⁰C สอง และแบ่งออกเป็นสองส่วน เศษได้ resuspended YPD จากวัฒนธรรมเดิม หรือ KPi และท้าทายกับ H2O2 ที่ 30 ⁰C สำหรับ 1.5h กับ 225 รอบต่อนาทีและความหนาวสั่น-การ =อัตราส่วนปริมาณปานกลางของ 1:5 ต่อความท้าทาย วัฒนธรรม serially ผสม ชุบบนผ้า แบบ YPD และ incubated 2 วันที่ 30 ⁰C เซลล์ชีวิตที่ถูกกำหนด โดยการนับโคโลนีทั้งหมดขึ้นรูปหน่วย (cfu) ใน H2O2 – สนุก ๆ และไม่ถูกรักษาวัฒนธรรม

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ความท้าทายของเซลล์ยีสต์กับภายนอก H2O2
วัฒนธรรมเจริญเป็นเฟสใจชี้แจง (12 ชั่วโมง; OD600 = 0.5) ภายใต้เงื่อนไขที่ระบุไว้ข้างต้น เซลล์ที่ถูกล้างครั้งที่สองกับ 100 มิลลิโพแทสเซียมฟอสเฟตบัฟเฟอร์พีเอช 7.4 (KPI) ที่เก็บรวบรวมโดยการหมุนเหวี่ยงที่ 2000 กรัมเป็นเวลา 10 นาทีที่ 25 ⁰Cและแบ่งออกเป็นสองเศษส่วน เศษส่วนถูก resuspended ใน YPD จากวัฒนธรรมเดิมหรือใน KPI และท้าทายด้วย H2O2 วันที่ 30 ⁰Cสำหรับ 1.5h ในการเขย่า 225 รอบต่อนาทีและขวดต่อ = อัตราส่วนเสียงปานกลาง 1: 5 กำลังติดตามความท้าทายวัฒนธรรมได้ ปรับลดลำดับชุบใน Ager YPD และบ่มที่อุณหภูมิ 30 ⁰C 2 วัน มีชีวิตเซลล์ถูกกำหนดโดยนับรวมการสร้างอาณานิคมหน่วย (cfu) ใน H2O2 - วัฒนธรรมที่ท้าทายและได้รับการรักษา

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ความท้าทายของเซลล์ยีสต์กับวัฒนธรรมภายนอก H2O2
ปลูกจิตใจระยะ exponential ( 12 H ; od600 = 0.5 ) ภายใต้เงื่อนไขที่อธิบายไว้ข้างต้น เซลล์มีการล้างสองครั้งกับ 100 มม. โพแทสเซียมฟอสเฟตบัฟเฟอร์ พีเอช 7.4 ( KPI ) ที่รวบรวมโดยการหมุนเหวี่ยงที่ 2000 G สำหรับ 10 นาทีที่ 25 องศาเซลเซียส และ⁰ออกเป็น 2 เศษส่วน เศษส่วนมี resuspended ใน ypd จากวัฒนธรรมเดิมหรือ KPI ,และท้าทายให้กับแบตเตอรี่ที่ 30 ⁰ C ช่วงเขย่า ที่ 225 รอบต่อนาทีและขวด = ปริมาตรปานกลาง 1 : 5 ตามความท้าทาย วัฒนธรรมก็เป็นเจือจางชุบบน ypd อายุบ่มที่ 30 ⁰ C เป็นเวลา 2 วัน เซลล์ถูกกำหนด โดยนับรวมอาณานิคมสร้างหน่วย ( CFU ) ในแบตเตอรี่–ท้าทายและวัฒนธรรม
ดิบ