2. Materials and methods
2.1. Study site and sampling
Soil and litter sampleswere collected in theXaverovsky´ HajNatural
Reserve, near Prague, Czech Republic in a sessile oak (Quercus
petraea) forest, a site previously used for the study of the extracellular
enzyme production by saprotrophic fungi (Valaˇskova et al.,
2007; Baldrian et al., in press) and for the analysis of the vertical
distribution of enzyme activities (ˇSnajdr et al., 2008b). The soil
was an acidic cambisol with developed L, H, Ah and A horizons:
L—thickness 0.5–1.5 cm, pH 4.3; 46.2% C; 1.76% N; H—thickness
1.5–2.5 cm, pH 3.7; 21.5% C; 0.56% N, Ah—thickness 6–8 cm, pH 3.4;
3.0–14.3% C; 0.10–0.39% N.
The study was conducted on a single 144m2 plot, where a total
of 49 soil cores (4.5cm diameter) were collected in a rectangular
grid of 7×7 samples (closest distance between samples=2m).
Preliminary experiments demonstrated the spatial independence
of samples located at the grid nodes. A homogeneous plot covered
with litter was selected for the study to exclude the effect of grass
and herbal roots. To evaluate the level of spatial variability in soil
moisture content, a small subplot (33cm×33 cm, 0.11m2) of the
study site was analyzed with samples collected in a rectangular grid
of 7×7 with a distance of 5.5cm between adjacent samples. The
amount of material depended upon the thickness of the sampled
horizons and moisture content but generally it was around 5 g wet
mass of litter and 12–20 g wet mass of H horizon material.
The periods where relative humidity were expected to be similar
but the amount of fungal biomass in soil was expected to differ
(May and August) were preliminarily selected based on the results
obtained during a previous, independent sampling performed at
the same site in the preceding year (ˇSnajdr et al., 2008b). The temperatures
at the soil surface were monitored using a Testo 175 H
(Testo, Germany) data logger with six reads per hour to select a
time period well representative of the means and circadian temperature
changes typical of either spring and late summer and to
avoid the effect of climatic extremes.
The material of the soil cores was separated into independent
samples of L and H horizon material, homogenized and used
for enzyme activity assays and microbial biomass quantification.
Organic matter content was estimated by combustion in an oven
at 550 ◦C until constant mass. Soil pH was measured in soil water
extract (1 g of soil and 10 ml of water left to stand overnight at
room temperature). Two independent aliquots of material from
each horizon were used for gravimetric soil moisture content determination,
after drying at 85 ◦C until constant mass. Differences
between the two replicates of the same sample were negligible
(t-value for paired t-test >0.9).
2 วัสดุและวิธีการ
2.1 เว็บไซต์การศึกษาและการเก็บตัวอย่างดินและ
sampleswere ครอกเก็บรวบรวมไว้ใน thexaverovsky 'hajnatural
สำรองใกล้สาธารณรัฐเช็กในนั่งไม้โอ๊ก (petraea วร์
) ป่าเว็บไซต์ที่ใช้ก่อนหน้านี้สำหรับการศึกษาของ extracellular
การผลิตเอนไซม์จากเชื้อรา saprotrophic ( valaskova, et al, 2007
.. baldrian, et al, ในการกด) และสำหรับการวิเคราะห์แนวตั้ง
การกระจายตัวของเอนไซม์ (snajdr et al. 2008b)
ดินเป็นกรด cambisol กับการพัฒนา l, H, อาและขอบเขตอันไกลโพ้น:
l หนา 0.5-1.5 ซม. , pH 4.3; 46.2% c; 1.76 n%; H-
ความหนา 1.5-2.5 ซม. , 3.7 พีเอช; 21.5% c; 0.56% n, ah ความหนา 6-8 ซม. , 3.4 ph;
% 3.0-14.3 c; 0.10-0.39% n
การศึกษาได้ดำเนินการในพล็อต 144m2 เดียวที่รวม
จาก 49. แกนดิน (45cm เส้นผ่าศูนย์กลาง) ถูกเก็บไว้ในตาราง
รูปสี่เหลี่ยมผืนผ้าจาก 7 × 7 ตัวอย่าง (ระยะใกล้สุดระหว่างตัวอย่าง = 2m).
การทดลองเบื้องต้นแสดงให้เห็นถึงความเป็นอิสระ
อวกาศของกลุ่มตัวอย่างอยู่ที่ nodes ตาราง พล็อตเหมือนกัน
ปกคลุมด้วยครอกได้รับเลือกสำหรับการศึกษาที่จะไม่รวมผลกระทบของหญ้า
และรากสมุนไพร เพื่อประเมินระดับของความแปรปรวนในดิน
ความชื้นแผนขนาดเล็ก (ขนาด 33cm × 33 ซม. , 0.11m2) ของเว็บไซต์การศึกษา
ได้รับการวิเคราะห์กับกลุ่มตัวอย่างเก็บรวบรวมไว้ใน
กริดเป็นรูปสี่เหลี่ยมผืนผ้าจาก 7 × 7 กับระยะทางจาก 5.5cm ระหว่างกลุ่มตัวอย่างที่อยู่ติดกัน จํานวนเงิน
ของวัสดุที่นี้เมื่อ depended ความหนาของการเก็บตัวอย่างขอบเขตอันไกลโพ้น
และเนื้อหาที่การบำรุงให้ชุ่มชื้น แต่โดยทั่วไปมันเป็นไปรอบ ๆ 5 มวลกรัม
เปียกจากครอกและ 12-20 มวลกรัมเปียกของวัสดุที่เส้นขอบฟ้าชั่วโมง.
งวดที่ความชื้นสัมพัทธ์ถูกคาดว่าจะเป็น
คล้ายกัน แต่ปริมาณของเชื้อราในดินที่คาดว่าจะแตกต่างกัน
(เดือนพฤษภาคมและสิงหาคม) ได้รับการคัดเลือกในเบื้องต้นขึ้นอยู่กับผลที่ได้รับในระหว่าง
หน้าที่การสุ่มตัวอย่างที่เป็นอิสระดำเนินการที่
เว็บไซต์เดียวกัน ในปีก่อน (snajdr et al. 2008b)
อุณหภูมิที่พื้นผิวดินถูกตรวจสอบโดยใช้ Testo 175 ชั่วโมง
(Testo,เยอรมนี) คนตัดไม้ข้อมูลที่มีหกอ่านต่อชั่วโมงเพื่อเลือกช่วงเวลาที่ดี
ตัวแทนของวิธีการและอุณหภูมิที่เปลี่ยนแปลง circadian
ปกติของฤดูใบไม้ผลิและฤดูร้อนทั้งตอนปลายและเพื่อหลีกเลี่ยงผลกระทบ
สุดขั้วของภูมิอากาศ.
วัสดุของแกนดินเป็น แยกออกเป็นตัวอย่าง
อิสระของวัสดุที่ขอบฟ้าลิตรต่อชั่วโมงหดหายและใช้
สำหรับการวิเคราะห์กิจกรรมของเอนไซม์และปริมาณจุลินทรีย์. เนื้อหาเรื่อง
อินทรีย์เป็นที่คาดจากการเผาไหม้ในเตาอบ
ที่ 550 ◦ C จนมวลคงที่ ค่าพีเอชของดินถูกวัดในน้ำดินสารสกัด
(1 กรัมของดินและ 10 มล. ของน้ำทิ้งให้ยืนค้างคืนที่อุณหภูมิห้อง
) สอง aliquots เป็นอิสระจากวัสดุจาก
ขอบฟ้าแต่ละถูกนำมาใช้สำหรับการกำหนดความชื้นดินตกตะกอนเนื้อหา
หลังจากการอบแห้งที่ 85 ◦ C จนมวลคงที่ ความแตกต่างระหว่าง
สองซ้ำของกลุ่มตัวอย่างเดียวกันอยู่เล็กน้อย
(มูลค่าที่ T-สำหรับคู่ t-test> 0.9).
การแปล กรุณารอสักครู่..
2. วัสดุและวิธี
2.1 ศึกษาสุ่มตัวอย่างและไซต์
sampleswere ดินและทิ้งเก็บไว้ใน theXaverovsky´ HajNatural
สำรอง ใกล้ปราก สาธารณรัฐเช็กในโอ๊ค sessile (Quercus
เพเทรีย) ป่า ไซต์ก่อนหน้านี้ ใช้สำหรับการศึกษาใน extracellular
ผลิตเอนไซม์จากเชื้อรา saprotrophic (Valaˇskova et al.,
2007 Baldrian et al. ในกด) และการวิเคราะห์แนวนี้
การกระจายของกิจกรรมเอนไซม์ (ˇSnajdr et al., 2008b) ดิน
ถูก cambisol เป็นกรดกับฮอลิซันส์ L, H, Ah และ A พัฒนา:
L — ซม.ความหนา 0.5–1.5 ค่า pH 4.3 46.2% C 1.76% N H คือความหนา
1.5–2.5 ซม. ค่า pH 3.7 21.5% C 0.56% N, Ah — ซม.ความหนา 6–8 ค่า pH 3.4;
3.0–14.3% C 0.10–0.39% N.
ดำเนินการวิจัยในแปลงเดียว 144 ม. 2 รวม
ของแกนดิน 49 (45 cm เส้นผ่าศูนย์กลาง) ถูกรวบรวมไว้ในสี่เหลี่ยม
ตาราง 7 × 7 ตัวอย่าง (ใกล้เคียงระยะห่างระหว่างตัวอย่าง = 2 เมตร) .
ทดลองเบื้องต้นแสดงให้เห็นว่าอิสรภาพปริภูมิ
อย่างโหนตาราง ครอบคลุมแผนเหมือน
กับแคร่ถูกเลือกสำหรับการศึกษาการแยกผลของหญ้า
รากสมุนไพรและการ การประเมินระดับของความแปรผันปริภูมิในดิน
ชื้น subplot การเล็ก (33 ซม. × 33 ซม. 0.11m2) ของการ
ไซต์ศึกษาได้วิเคราะห์กับตัวอย่างที่เก็บในตารางสี่เหลี่ยม
7 × 7 มีระยะทาง 5.5 ซมระหว่างตัวอย่างที่ติด
พร้อมจำนวนวัสดุที่ความหนาของตัวอย่างที่
ฮอลิซันส์ และชื้น แต่โดยทั่วไปมีประมาณ 5 กรัมเปียก
มวลของแคร่และ 12–20 เปียกมวลวัสดุขอบฟ้า H.
รอบระยะเวลาที่ความชื้นสัมพัทธ์คาดว่าจะคล้าย
แต่คาดว่าจำนวนของชีวมวลเชื้อราในดินที่แตกต่าง
(พฤษภาคมและสิงหาคม) preliminarily เลือกตามผลลัพธ์
ได้รับระหว่างการสุ่มก่อนหน้า อิสระที่
ไซต์เดียวกันในปีก่อนหน้า (ˇSnajdr et al., 2008b) อึดอัด
ที่พื้นผิวดินถูกติดตามโดยใช้
(Testo, เป็น Testo 175 H เยอรมนี) data logger กับหกอ่านต่อชั่วโมงต้องการ
เวลาแทนดีระยะเวลาวิธีการและอุณหภูมิ circadian
ปกติฤดู และปลายฤดูร้อน และการเปลี่ยนแปลง
หลีกเลี่ยงผลของ climatic สุด
วัสดุของแกนดินถูกแบ่งออกเป็นอิสระ
ตัวอย่างวัสดุ L และ H ฮอไรซอน homogenized และใช้
สำหรับ assays กิจกรรมเอนไซม์และจุลินทรีย์ชีวมวลนับ
อินทรีย์เนื้อหาถูกประเมิน โดยการเผาไหม้ในเตาอบ
ที่ 550 ◦C จนมวลคง มีวัดค่า pH ของดินในน้ำดิน
แยก (g 1 ของดินและ 10 ml น้ำซ้ายยืนนอนที่
อุณหภูมิห้อง) Aliquots อิสระสองวัสดุจาก
ขอบฟ้าแต่ละใช้สำหรับดินต้องชื้นเนื้อหากำหนด,
หลังจากการอบแห้งที่ 85 ◦C จนมวลคง ความแตกต่าง
ระหว่าง replicates สองของอย่างเดียวได้ระยะ
(ค่า t t-ทดสอบจัดเป็นคู่ > 0.9) .
การแปล กรุณารอสักครู่..
2 . วัสดุและวิธีการ
2.1 . เว็บไซต์การศึกษาและการสุ่มตัวอย่าง
ดินและเก็บรวบรวมขยะมูลฝอย sampleswere ใน thexaverovsky ' hajnatural
สำรองที่อยู่ใกล้กับเมือง Prague ,สาธารณรัฐเช็กใน sessile ไม้โอ๊ค( ประเภท
petraea )ป่า,ไซต์ที่มีการใช้งานมาแล้วสำหรับการศึกษาของ extracellular
เอนไซม์การผลิตโดย saprotrophic เห็ด( valaˇskova et al .,
2007 ; baldrian et al .,ในกด)และสำหรับการวิเคราะห์ตลาดแนวตั้ง
การกระจายของกิจกรรมเอนไซม์( ˇsnajdr et al . 2008 B )
ซึ่งจะช่วยให้ดินเป็นกรด cambisol พร้อมพัฒนา L , H ,อาและที่แน่ๆ:
L - ความหนา 0.5 - 1.5 ซม., pH 4.3 ; 46.2% C ; 1.76% n ; H - ความหนา
1.5 - 2.5 ซม., pH 3.7 ; 21.5% C ; 0.56% N , AH - ความหนา 6 - 8 ซม., pH 3.4 ;
3.0 - 14.3% C ; 0.10 - 0.39% N .
ที่การศึกษาเป็นผู้ดำเนินการในที่เดียว 144 ม. 2 ที่ดินสถานที่ซึ่งรวม
ของ 49 ดินแกนหลัก( 4 )เส้นผ่านศูนย์กลาง 5 ซม.)ได้จากการเก็บข้อมูลในรูปทรงสี่เหลี่ยม
เส้นกริดของ 7 x 7 ตัวอย่าง(ในระยะทางใกล้กับระหว่างตัวอย่าง= 2 ม.)..
การทดลองเบื้องต้นซึ่งแสดงให้เห็นถึงความเป็นอิสระแบบ Spatial ที่
ของตัวอย่างตั้งอยู่ที่โหนดกริด ที่ดินเป็นเนื้อเดียวกันแบบมีหลังคาพร้อมด้วยเปลหาม
ซึ่งจะช่วยเป็นที่เลือกสำหรับการศึกษาในการแยกผลของหญ้า
และรากสมุนไพร ในการประเมินผลระดับของช่องได้ในเนื้อหาดิน
ความชื้นขนาดเล็ก subplot ( 33 ซม. x 33 ซม. 0.11 ม. 2 )ของไซต์
ซึ่งจะช่วยการศึกษาที่เป็นวิเคราะห์ได้ด้วยตัวอย่างเก็บรวบรวมในตารางสี่เหลี่ยมที่
ของ 7 x 7 พร้อมด้วยระยะทางอยู่ที่ 5.5 ซม.ระหว่างตัวอย่างอยู่ใกล้กับ
ซึ่งจะช่วยได้ก็ขึ้นอยู่กับจำนวนของวัสดุเชื่อมต่อในเมื่อความหนาของตัวอย่าง
แน่ๆแต่เนื้อหาและความชื้นโดยทั่วไปแล้วมันเป็นประมาณ 5 กรัมเปียก
มวลชนของเสลี่ยงและ 12 - 20 กรัมเปียกมวลชนของชั่วโมงบนเส้นขอบฟ้าวัสดุเชื่อมต่อใน
ช่วงเวลาที่ความชื้นสัมพัทธ์อยู่คาดว่าจะมีความเหมือน
แต่จำนวนของเชื้อราจากชีวมวลในดินมีแนวโน้มที่จะแตกต่าง
(อาจและเดือนสิงหาคม)เป็นเบื้องต้นที่ใช้อยู่ในผลการ
ซึ่งจะช่วยได้ในระหว่างที่ก่อนหน้าเป็นอิสระทำการสุ่มตัวอย่างที่
ที่เดียวกันในปีที่ผ่านมา( ˇsnajdr et al ., 2008 B ) อุณหภูมิ ที่พื้นผิว
ซึ่งจะช่วยปรับปรุงดินให้มีตรวจสอบโดยใช้ testo 175 ชั่วโมง
( testo ที่เยอรมนี)พร้อมด้วยข้อมูล Logger หกอ่านต่อชั่วโมงเพื่อเลือก
ช่วงเวลาดีตัวแทนของที่นั่นหมายความว่าและ circadian อุณหภูมิ
ซึ่งจะช่วยการเปลี่ยนแปลงตามแบบอย่างของทั้งฤดูใบไม้ผลิและช่วงปลายฤดูร้อนและ
ซึ่งจะช่วยป้องกันไม่ให้มีผลบังคับใช้ในอากาศหรือ.
วัสดุที่เป็นแกนหลักดินเป็นอิสระแยกออกเป็น
ตัวอย่างของ L และชั่วโมงเส้นขอบฟ้าวัสดุ,สดพร่องมันเนยเป็นและใช้
สำหรับการทำงานของเอนไซม์เนื้อหาจึงจำเป็นต้องมี.
ประกอบรัฐธรรมนูญว่าด้วยเรื่อง assays จุลินทรีย์และพลังงานชีวมวลได้รับการประเมินจากการเผาไหม้ในเตาอบที่
ที่ 550 ◦c จนกว่าการคงที่ ค่า pH ของดินวัดได้ในน้ำดิน
ซึ่งจะช่วยดึง( 1 G ของดินและ 10 มล.ของน้ำจากซ้ายไปยืนอยู่พักค้างคืนที่ อุณหภูมิ ห้อง
) สอง aliquots เป็นอิสระจากวัสดุจาก
แต่ละเส้นขอบฟ้าได้ถูกนำมาใช้สำหรับการกำหนดเนื้อหาความชื้นดิน gravimetric
หลังจากการเป่าผมแห้งที่ 85 ◦c จนกว่าจำนวนมากอย่างต่อเนื่อง. ความแตกต่างระหว่างสอง
หาดจอมเทียนของตัวอย่างเดียวกันนั้นไม่
( T - ความคุ้มค่าสำหรับ T ที่จับคู่กัน - การทดสอบ> 0.9 )..
การแปล กรุณารอสักครู่..