2.5. Equilibrium adsorption capacit

2.5. Equilibrium adsorption capacities
To assess the nanofibre equilibrium binding capacity the mats
were cut into 25-mm discs. Discs were incubated in 0.0–2.0 mg/mL
model protein solutions and UV absorbance readings at 280 nm
(Jasco V-630, Essex, UK) were taken at each step of before binding,
after binding (16 h), wash (1 h) and elution (1 h). For testing
the DEAE cellulose nanofibre, BSA was used as the model protein
in 10 mM Tris buffer at pH 8.0. For the COO-cellulose binding
study, lysozyme was used in 20 mM sodium acetate buffer at
pH 5.5. The elution buffers used were the same as the respective
binding buffer and containing 0.5 M NaCl. After elution, the
nanofibres were regenerated in 0.1 M aqueous NaOH for repeat
testing. Three tests were performed and the adsorbed equilibrium
protein concentrations (Q) and liquid phase equilibrium concentrations
(C) were averaged. The Langmuir adsorption isotherm
Q = QmaxKdC/Kd + C was used, where Qmax is the maximum capacity
of protein bound, and Kd is the equilibrium dissociation constant.
The linearised form of Langmuir isotherm was plotted and from a
line of best fit the Qmax and Kd values were estimated. The wet
bed height was measured with a digital micrometer (Mitutoyo,
Kawasaki, Japan; 0.001 mm resolution) to calculate the volume.
The experiment was performed three times. Elution performance
was calculated as a ratio of the protein concentration after elution
and the adsorbed equilibrium protein concentration. The recovered
protein concentration was 75% for DEAE and 90% for COO
adsorbents.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.5 ความจุสมดุลดูดซับในการประเมินสมดุล nanofibre ผูกผลิตเสื่อถูกตัดเป็นแผ่นดิสก์ 25 มม. ดิสก์ถูก incubated ใน 0.0-2.0 mg/mLรุ่นโซลูชั่นโปรตีนและ UV อ่าน absorbance ที่ 280 nm(Jasco V-630 เอสเซ็กซ์ สหราชอาณาจักร) ได้ดำเนินการในแต่ละขั้นตอนของก่อนผูกหลังจากผูก (16 h), (1 h) ล้าง และ elution (1 h) สำหรับการทดสอบใช้ nanofibre DEAE เซลลูโลส บีเอสเอเป็นโปรตีนรูปแบบใน 10 มม.ทริสเรทติ้งบัฟเฟอร์ที่ pH 8.0 สำหรับผูกบิลล์เซลลูโลสศึกษา lysozyme ในบัฟเฟอร์ acetate โซเดียม 20 มม.ที่ใช้pH 5.5 บัฟเฟอร์ elution ใช้ได้เหมือนกับที่เกี่ยวข้องผูกบัฟเฟอร์ และประกอบด้วย 0.5 M NaCl หลังจาก elution การnanofibres ถูกสร้างใน 0.1 M NaOH อควีสำหรับซ้ำทดสอบ ดำเนินการทดสอบสาม และสมดุล adsorbedความเข้มข้นของโปรตีน (Q) และเฟสของเหลวสมดุลความเข้มข้น(ค) มี averaged Isotherm ดูดซับ LangmuirQ = QmaxKdC/Kd + C ใช้ Qmax อยู่ที่ความจุสูงสุดของโปรตีนผูก และ Kd เป็นค่าคง dissociation สมดุลแบบฟอร์ม linearised ของ Langmuir isotherm ถูกพล็อต และจากการบรรทัดส่วนพอดี Qmax และมีประเมินมูลค่า Kd เปียกความสูงเตียงถูกวัด ด้วยไมโครมิเตอร์ดิจิตอล (Mitutoyoคาวาซากิ ญี่ปุ่น 0.001 มม.ความละเอียด) ในการคำนวณปริมาณทดลองทำสามครั้ง Elution ประสิทธิภาพคำนวณเป็นอัตราส่วนของความเข้มข้นโปรตีนจาก elutionและความเข้มข้นโปรตีนสมดุล adsorbed การกู้คืนความเข้มข้นของโปรตีนได้ 75% สำหรับ DEAE และ 90% สำหรับบิลล์adsorbents

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.5 ขีดความสามารถในการดูดซับความสมดุลเพื่อประเมินความสมดุล nanofibre กำลังการผลิตที่มีผลผูกพันเสื่อถูกตัดเป็นแผ่น25 มม แผ่นถูกบ่มใน 0.0-2.0 มิลลิกรัม / มิลลิลิตรโซลูชั่นโปรตีนและการอ่านรูปแบบการดูดกลืนรังสียูวีที่280 นาโนเมตร(Jasco V-630, Essex, UK) ได้รับการดำเนินการในแต่ละขั้นตอนของก่อนที่จะมีผลผูกพันหลังจากที่มีผลผูกพัน(16 ชั่วโมง) ล้าง (1 ชั่วโมง ) และชะ (1 ชั่วโมง) สำหรับการทดสอบnanofibre เซลลูโลสดีอีเออีบีเอสเอถูกใช้เป็นโปรตีนรูปแบบใน10 มิลลิบัฟเฟอร์ Tris ที่ pH 8.0 สำหรับซีโอโอเซลลูโลสที่มีผลผูกพันการศึกษาไลโซไซม์ที่ใช้ในโซเดียม 20 มมอะซิเตตบัฟเฟอร์ที่พีเอช5.5 บัฟเฟอร์ชะใช้เป็นเช่นเดียวกับที่เกี่ยวข้องบัฟเฟอร์ผูกพันและมี 0.5 M NaCl หลังจากชะที่เส้นใยนาโนที่ถูกสร้างใหม่ใน 0.1 M NaOH น้ำซ้ำสำหรับการทดสอบ สามการทดสอบได้รับการดำเนินการและความสมดุลดูดซับความเข้มข้นของโปรตีน (Q) และความเข้มข้นสมดุลของเหลว (C) ได้รับการเฉลี่ย ดูดซับ Langmuir isotherm Q = QmaxKdC / Kd + C ถูกนำมาใช้ที่คิวแม็กซ์เป็นความจุสูงสุดของโปรตีนที่ถูกผูกไว้และKd คือการแยกตัวออกสมดุลอย่างต่อเนื่อง. รูปแบบเชิงเส้นของ Langmuir isotherm ถูกพล็อตและจากสายของที่ดีที่สุดพอดีกับคิวแม็กซ์และค่า Kd อยู่ที่ประมาณ เปียกสูงเตียงวัดด้วยไมโครมิเตอร์แบบดิจิตอล (Mitutoyo, คาวาซากิประเทศญี่ปุ่น 0.001 มมความละเอียด). ในการคำนวณปริมาณการทดลองได้ดำเนินการสามครั้ง ประสิทธิภาพ elution ที่คำนวณเป็นอัตราส่วนของความเข้มข้นของโปรตีนหลังจากชะและความเข้มข้นของโปรตีนสมดุลการดูดซับ ฟื้นความเข้มข้นของโปรตีนเป็น 75% สำหรับ DEAE และ 90% สำหรับซีโอโอตัวดูดซับ

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.5 ความสมดุลการดูดซับ
ประเมิน nanofibre สมดุลผูกพันความจุเสื่อ
มาตัดเป็นแผ่น 25 mm ดิสก์ถูกบ่มใน 0.0 – 2.0 มิลลิกรัม / มิลลิลิตรและค่าการดูดกลืนแสงยูวี
แบบโปรตีนโซลูชั่นการอ่านที่ 280 nm
( jasco v-630 , Essex , อังกฤษ ) ถ่ายในแต่ละขั้นตอน ก่อนผูก
หลังจากผูก ( 16 ชั่วโมง ) ล้าง ( 1 ) H ( 1 ชั่วโมง ) สำหรับการทดสอบ
nanofibre DEAE เซลลูโลส ,หากใช้เป็นแบบโปรตีน
ใน 10 มม. โดยบัฟเฟอร์ ที่ pH 8.0 . สำหรับขันเซลลูโลสผูกพัน
การศึกษาไลโซไซม์ที่ใช้ใน 20 มิลลิเมตรโซเดียมอะซิเตตบัฟเฟอร์ pH 5.5 ที่
. การใช้บัฟเฟอร์ที่ใช้เป็นเหมือนแต่ละบัฟเฟอร์ที่มี 0.5 M
ผูกพันและเกลือ หลังจากใช้ ,
nanofibres ได้ในสารละลาย 0.1 M NaOH มีการทดสอบซ้ำ

สามการทดสอบการดูดซับโปรตีนความเข้มข้นสมดุล
( Q ) และเฟสของเหลวและสมดุลความเข้มข้น
( C ) โดยเฉลี่ย ที่แลงเมอร์ไอโซเทอมการดูดซับ
Q = qmaxkdc / kd c ใช้ที่คิวแมกซ์เป็นกำลังการผลิตสูงสุด
โปรตีนผูกพันและ KD คือการสมดุล linearised
รูปแบบของแลงเมอร์ไอโซเทอมถูกวางแผนจาก
เส้นที่ดีที่สุดและพอดีกับคิวแมกซ์ KD มีค่าประมาณ ความสูงเตียงเปียก
วัดด้วยไมโครมิเตอร์ดิจิตอล ( มิตูโตโย
, คาวาซากิ , ญี่ปุ่น ; 0.001 มม. ความละเอียด ) เพื่อคำนวณปริมาตร .
ทดสอบ 3 ครั้ง
งานได้มาคำนวณเป็น อัตราส่วนของโปรตีนหลังจากใช้
และดูดซับสมดุลโปรตีนเข้มข้น การกู้คืน
ความเข้มข้นของโปรตีน 75% สำหรับการทำและ 90% สำหรับขัน
ดูดซับ