2.1. Sample collection and culturing
Cryopreserved bovine semen and IVFm, IVCm, and
IVMm samples were collected from the commercial routine
of In Vitro Brasil Ltda (Mogi Mirim, Sao Paulo, Brazil). The
samples of cryopreserved semen were aliquots of
commercial sealed straws collected after thawing and
before the use for the bovine embryo IVP.
In vitro oocyte maturation and fertilization have been
performed during 22 to 24 hours and the culture during
7 days in BD Falcon disposable cell culture dishes 35 10
mmin drops containing 90 mL of medium under mineral oil
(Sigma, St Louis, MO, USA). Culture media composition and
IVP procedures has been described elsewhere [41]. After
each of the IVP steps, 50 mL of IVFm, IVCm, and IVMm were
sampled, sent refrigerated to the microbiological laboratory,
and rapidly incubated as described below. The
samples have been cultured in brain heart infusion (BHI)
broth, a highly nutritious general-purpose growth medium.
If the presence of a specific microorganism must be
screened, a selective growing can be performed by using
a differential and selective medium.
2.1. Sample collection and culturing
Cryopreserved bovine semen and IVFm, IVCm, and
IVMm samples were collected from the commercial routine
of In Vitro Brasil Ltda (Mogi Mirim, Sao Paulo, Brazil). The
samples of cryopreserved semen were aliquots of
commercial sealed straws collected after thawing and
before the use for the bovine embryo IVP.
In vitro oocyte maturation and fertilization have been
performed during 22 to 24 hours and the culture during
7 days in BD Falcon disposable cell culture dishes 35 10
mmin drops containing 90 mL of medium under mineral oil
(Sigma, St Louis, MO, USA). Culture media composition and
IVP procedures has been described elsewhere [41]. After
each of the IVP steps, 50 mL of IVFm, IVCm, and IVMm were
sampled, sent refrigerated to the microbiological laboratory,
and rapidly incubated as described below. The
samples have been cultured in brain heart infusion (BHI)
broth, a highly nutritious general-purpose growth medium.
If the presence of a specific microorganism must be
screened, a selective growing can be performed by using
a differential and selective medium.
การแปล กรุณารอสักครู่..
2.1 . การเก็บตัวอย่างและการตรวจสอบคุณภาพน้ำเชื้อวัว และ ivfm
,
ivmm ivcm และตัวอย่างที่เก็บจากการค้าตามปกติ
ของหลอด Brasil Ltda ( Mogi Mirim เซาเปาโล ประเทศบราซิล )
ตัวอย่างตรวจสอบคุณภาพน้ำเชื้ออยู่เฉยๆของ
พาณิชย์ผนึกหลอดเก็บหลังการละลายและ
ก่อนที่จะใช้สำหรับ IVP ตัวอ่อนวัว เลี้ยงไข่ปฏิสนธิในหลอดทดลองและ
ได้ดำเนินการ ในระหว่างวันที่ 22 - 24 ชั่วโมงและวัฒนธรรมระหว่าง
7 วันใน BD เหยี่ยวทิ้งเซลล์วัฒนธรรมอาหาร 35 10
90 ml mmin หยดที่มีขนาดกลางภายใต้
น้ำมันแร่ ( Sigma , เซนต์ หลุยส์ , มิสซูรี , สหรัฐอเมริกา ) องค์ประกอบของวัฒนธรรมสื่อและ
ขั้นตอน IVP ได้ถูกอธิบายไว้ในที่อื่น [ 41 ] หลังจาก
ของแต่ละขั้นตอนของ ivfm IVP , 50 ml ivcm และ ivmm )
, ตัวอย่าง ,ส่งจำหน่ายไปยังห้องปฏิบัติการจุลชีววิทยา
อย่างรวดเร็วและบ่ม , ตามที่อธิบายไว้ด้านล่าง
ตัวอย่างได้รับการเพาะเลี้ยงแบบหัวใจสมอง ( BHI )
broth เป็นอาหารเลี้ยงเชื้อเอนกประสงค์ คุณค่าทางโภชนาการสูง .
ถ้าการแสดงตนของจุลินทรีย์เฉพาะต้อง
คัด , การเลือกที่สามารถดำเนินการได้โดยใช้
ความแตกต่างและเลือกปานกลาง
การแปล กรุณารอสักครู่..