HCCSCs were infected with lentivira

HCCSCs were infected with lentiviral particles encoding shRNA targeting p53 (Santa Cruz Biotechnology, Paso Robles, CA) according to the supplier's protocol. Briefly, HCCSCs were infected at a multiplicity of infection of 10 in HCCSC growth medium containing 5 μg/mL of Polybrene at 37°C and 5% CO2. After 24 hours, media were replaced with fresh media and the cells were cultured for 2 days. The infected cells were selected in the presence of puromycin (7.5 μg/mL) for 5 days. Protein extract from these cells was run on a gel to confirm complete suppression of p53 as described earlier [34].

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

HCCSCs ถูกติดเชื้ออนุภาค lentiviral เข้ารหัสกำหนดเป้าหมาย p53 shRNA (ซานตาครูซเทคโนโลยีชีวภาพ พาโซ Robles, CA) ตามโพรโทคอลผู้ผลิตที่ สั้น ๆ HCCSCs มีการติดเชื้อที่มากมายหลายหลากของเชื้อ 10 ใน HCCSC เจริญเติบโตประกอบด้วย 5 μg/mL ของ Polybrene ที่ 37° C และ 5% CO2 หลังจาก 24 ชั่วโมง สื่อถูกแทนที่ ด้วยสื่อสด แล้วเซลล์มีอ่าง 2 วัน เซลล์ติดเชื้อถูกเลือกในต่อหน้าของ puromycin (7.5 μg/mL) 5 วัน สารสกัดโปรตีนจากเซลล์เหล่านี้ถูกเรียกใช้บนเจลเพื่อยืนยันปราบปรามสมบูรณ์ของ p53 ก่อนหน้านี้อธิบาย [34]

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

HCCSCs มีการติดเชื้อที่มีอนุภาคเข้ารหัส lentiviral shRNA กำหนดเป้​​าหมาย p53 (ซานตาครูซเทคโนโลยีชีวภาพโซโรเบิลส์) ตามโปรโตคอลของซัพพลายเออร์ สั้น ๆ , HCCSCs มีการติดเชื้อที่หลายหลากของการติดเชื้อ 10 ในสื่อที่มีการเจริญเติบโต HCCSC 5 ไมโครกรัม / มิลลิลิตร Polybrene ที่ 37 องศาเซลเซียสและ CO2 5% หลังจาก 24 ชั่วโมงสื่อถูกแทนที่ด้วยสื่อสดและเซลล์เพาะเลี้ยงเป็นเวลา 2 วัน เซลล์ที่ติดเชื้อได้รับการคัดเลือกในการปรากฏตัวของ puromycin (ที่ 7.5 ไมโครกรัม / มิลลิลิตร) เป็นเวลา 5 วัน สารสกัดจากโปรตีนจากเซลล์เหล่านี้ทำงานบนเจลเพื่อยืนยันการปราบปรามที่สมบูรณ์ของ p53 ตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ [34]

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

hccscs ติดเชื้อ lentiviral อนุภาค shrna เป้าหมายตัวอย่างการเข้ารหัส ( Santa Cruz เทคโนโลยีชีวภาพ , Paso Robles , CA ) ตามขั้นตอนของผู้ผลิต สั้น ๆ , hccscs ติดเชื้อที่หลายหลากของการติดเชื้อจาก 10 ใน hccsc การเจริญเติบโตปานกลางประกอบด้วย 5  μกรัม / มิลลิลิตรที่อุณหภูมิ 37 องศา C และ polybrene คาร์บอนไดออกไซด์ 5% หลังจาก 24 ชั่วโมง สื่อถูกแทนที่ด้วยสื่อสดและเซลล์เพาะเลี้ยงเป็นเวลา 2 วันเซลล์ที่ติดเชื้อถูกเลือกในการแสดงตนของ puromycin ( 7.5  μ g / ml ) เป็นเวลา 5 วัน สารสกัดโปรตีนจากเซลล์เหล่านี้ถูกใช้ในเจลเพื่อยืนยันการปราบปรามที่สมบูรณ์ของกิจกรรมตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ [ 34 ]