To evaluate the approach, we cloned

To evaluate the approach, we cloned eight fragments from viruses PR8 and A/Chicken/Jiangsu/WS1/2012(H9N2) (WS1)respectively. All eight influenza genes from the cDNA of PR8 andWS1 were efficiently amplified by the fragment specific primers and had the expected molecular mass (Fig. 2). After the recombination of the PCR amplicon with the linear vector mediated by enzyme ExnaseTM II, the positive clones were screened by PCR and sequenced. During the screening of positive clones, we found that more than 90% of the selected clones were positive. This positive rate of clones was similar to that claimed by the Clon-ExpressTM II kit. Through this cloning strategy, we rapidly and efficiently got all positive clones for the eight influenza genes from the cDNA of PR8 and WS1 during a single ground of PCRand in vitro recombination

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

การประเมินวิธีการ เราลอกแบบแปดเศษจากไวรัส PR8 และ A/Chicken/Jiangsu/WS1/2012(H9N2) (WS1) ตามลำดับ ยีนทั้งหมดในไข้หวัดใหญ่แปดจาก cDNA ของ PR8 andWS1 ได้ถูกขยาย โดยไพรเมอร์ที่เฉพาะส่วนได้อย่างมีประสิทธิภาพ และมีมวลโมเลกุลคาด (2 รูป) หลังจากรวมตัวกันของ amplicon PCR กับเวกเตอร์เชิงเส้นการไกล่เกลี่ย โดยเอนไซม์ ExnaseTM II โคลนบวกโดย PCR และเรียงลำดับ ในระหว่างการคัดเลือกโคลนบวก เราพบมากกว่า 90% ของ clones เลือกบวก ราคานี้บวกของโคลนก็คล้ายกับที่อ้าง โดยชุด Clon ExpressTM II ผ่านกลยุทธ์นี้ cloning เราอย่างรวดเร็ว และมีประสิทธิภาพมีโคลนทั้งหมดบวกสำหรับไข้หวัดใหญ่ยีนแปดจาก cDNA PR8 และ WS1 ระหว่างพื้นเดียว PCRand ในหลอดทดลองรวมตัวกัน

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ในการประเมินวิธีการที่เราโคลนแปดเศษจากไวรัส PR8 และ A / ไก่ / มณฑลเจียงซู / WS1 / 2012 (H9N2) (WS1) ตามลำดับ ทั้งแปดยีนไข้หวัดใหญ่จากยีนของ PR8 andWS1 ถูกขยายได้อย่างมีประสิทธิภาพโดยเฉพาะไพรเมอร์ชิ้นส่วนและได้ที่คาดว่ามวลโมเลกุล (รูปที่. 2) หลังจากการรวมตัวกันของ amplicon PCR กับเวกเตอร์เชิงเส้นไกล่เกลี่ยโดยเอนไซม์ ExnaseTM ครั้งที่สองโคลนบวกถูกคัดกรองโดยวิธี PCR และลำดับขั้นตอน ในระหว่างการตรวจคัดกรองของโคลนบวกเราพบว่ากว่า 90% ของโคลนที่เลือกเป็นบวก อัตราการบวกของโคลนก็คล้ายคลึงกับที่โดยชุด Clon-ExpressTM ครั้งที่สองอ้างว่า ผ่านกลยุทธ์การโคลนนี้เราได้อย่างรวดเร็วและมีประสิทธิภาพมีโคลนบวกทั้งหมดสำหรับยีนไข้หวัดใหญ่แปดจากยีนของ PR8 และ WS1 ระหว่างพื้นดินเดียวของ PCRand รวมตัวกันอีกในหลอดทดลอง

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

เพื่อประเมินวิธีการที่เราโคลนแปดเศษจากไวรัส pr8 และ / ไก่ / เจียงซู / ws1 / 2555 ( h9n2 ) ( ws1 ) ตามลำดับ ทั้งหมดแปดไข้หวัดใหญ่ยีนจาก cDNA ของ pr8 andws1 ได้อย่างมีประสิทธิภาพ โดยขยายส่วนที่เฉพาะเจาะจงและมีมวลโมเลกุลสูงไว้ ( รูปที่ 2 ) หลังจาก recombination ของ PCR และกับเส้นเวกเตอร์ ) โดยเอนไซม์ exnasetm II , โคลนบวกจากการศึกษานี้ ในการคัดเลือกโคลนเป็นบวก เราพบว่า มากกว่า 90% ของเลือกโคลนอยู่ในเชิงบวก ราคานี้บวกของโคลนคือคล้ายกับที่อ้างโดยโคลน " 2 ชุด ผ่านการโคลนนิ่งยุทธศาสตร์เราอย่างรวดเร็วและมีประสิทธิภาพมีโคลนบวกทั้งหมดแปดไข้หวัดใหญ่จาก cDNA ของยีนและ pr8 ws1 ระหว่างพื้นดินเดียวของการ pcrand ในหลอดทดลอง