Yeast cells were grown at 30ºC, wit

Yeast cells were grown at 30ºC, with orbital shaking at 300 rpm, in standard YNB
glucose medium supplemented with 20 mg/l L-tryptophan, 40 mg/l adenine and 20 mg/l
L-histidine. A standard lithium acetate protocol was used for production of competent
yeast and transformation (Burke et al., 2000). Transformants of the W303-1B strain
7
(carrying pEMBLyex or pEMBLyex-vpr plasmids) were maintained in selective
medium (containing 20 mg/l L-leucine). For vpr expression, yeast cells were cultured in
YNB medium containing 2% galactose plus required supplements (inducing medium).
The pH of media was adjusted with Trizma base. When required, solid medium was
prepared by the addition of 1.5 % purified agar (Difco) to the broth.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

เซลล์ยีสต์ได้เติบโตขึ้นที่ 30ºC กับการสั่นของวงโคจรที่ 300 rpm ในมาตรฐาน YNBน้ำตาลในสื่อเสริม ด้วย 20 mg/l L-ทริปโตเฟน adenine 40 mg/l และ 20 mg/lL-histidine โพรโทคอ acetate มาตรฐานลิเธียมถูกใช้สำหรับการผลิตของพนักงานเจ้าหน้าที่ยีสต์และการแปลง (ลิตี้เบอร์กและ al., 2000) สายพันธุ์ Transformants W303 1B 7(กระเป๋า pEMBLyex หรือ pEMBLyex-vpr plasmids) ถูกเก็บรักษาไว้ในงานปานกลาง (ประกอบด้วย 20 mg/l L leucine) สำหรับนิพจน์ vpr เซลล์ยีสต์มีอ่างในYNB ขนาดกลางมี 2% กาแล็กโทสบวกต้องเสริม (inducing ปานกลาง)PH ของสื่อมีการปรับปรุงมี Trizma เมื่อถูกต้อง แข็งปานกลางจัดทำ โดยการเพิ่ม 1.5% บริสุทธิ์ agar (Difco) กับซุป

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

เซลล์ยีสต์เติบโตที่ 30 องศาเซลเซียสโดยมีวงโคจรเขย่าที่ 300 รอบต่อนาทีมาตรฐาน YNB
กลางกลูโคสเสริมด้วย 20 mg / l โพรไบโอ L-40 mg / l adenine และ 20 mg / l
L-histidine โปรโตคอลอะซิเตตลิเธียมมาตรฐานที่ใช้สำหรับการผลิตที่มีอำนาจยีสต์และการเปลี่ยนแปลง (เบิร์ et al., 2000)
Transformants ของสายพันธุ์ W303-1B
7
(แบก pEMBLyex หรือพลาสมิด pEMBLyex-VPR)
ได้รับการดูแลในการเลือกสื่อ(ที่มี 20 mg / l L-leucine) สำหรับการแสดงออก VPR เซลล์ยีสต์เลี้ยงใน
YNB ขนาดกลางที่มีกาแลคโต 2% บวกกับผลิตภัณฑ์เสริมอาหารที่ต้องการ (กลางชักนำ).
ค่า pH ของสื่อมีการปรับฐาน Trizma เมื่อจำเป็นต้องใช้สื่อที่เป็นของแข็งได้รับการจัดทำขึ้นโดยการเพิ่มขึ้นของ 1.5% อาหารเลี้ยงเชื้อบริสุทธิ์ (Difco) เพื่อน้ำซุป

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

เซลล์ยีสต์เติบโต 30 º C เขย่า วงโคจรที่ 300 รอบต่อนาทีในมาตรฐานกลาง กลูโคส ynb
เสริม 20 มก. / ล. - 40 mg / l และสารอัลคาลอยด์ 20 มก. / ล.
l-histidine . มาตรฐานโปรโตคอลลิเธียมเตตใช้สำหรับการผลิตยีสต์ที่มีความสามารถ
และการแปลง ( เบิร์ก et al . , 2000 ) พลาสมิดของ w303-1b เมื่อย

7( แบก pemblyex หรือ pemblyex vpr พลาส ) ถูกเก็บรักษาไว้ใน selective
ปานกลาง ( 20 mg / l ( แอล ) สำหรับการแสดงออก vpr เซลล์ยีสต์ที่เพาะเลี้ยงในอาหารที่มี 2 %
ynb กาแลคโตสพลัสเป็นอาหารเสริม ( กระตุ้น ) ) .
pH ของสื่อกับ trizma ปรับฐาน เมื่อต้องแข็งปานกลาง
เตรียมเพิ่ม 1.5% วุ้นบริสุทธิ์ ( difco ) ซุป