Quantitative RT-PCR oligonucleotide

Quantitative RT-PCR oligonucleotide primers for chicken cytokines, chemokines, and GAPDH are listed in Table 1. Amplification and detection were carried out using equivalent amounts of total RNA from intestine using the Mx3000P system and Brilliant SYBR Green QPCR master mix (Stratagene) as described (Hong et al., 2006; Park et al., 2008). Standard curves were generated using log10 diluted standard RNA and the levels of individual transcripts were normalized to those of GAPDH using the Q-gene program (Muller et al., 2002). Each analysis was performed in triplicate. To normalize RNA levels between samples within an experiment, the mean threshold cycle (Ct) values for the amplification products was calculated by pooling values from all samples in that experiment.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ไพรเมอร์ oligonucleotide RT-PCR เชิงปริมาณไก่ cytokines, chemokines และ GAPDH จะแสดงในตารางที่ 1 ขยายและตรวจสอบได้ดำเนินการใช้เทียบเท่ากับจำนวนรวมที่อาร์เอ็นเอจากลำไส้โดยใช้ระบบ Mx3000P และสดใส SYBR Green QPCR หลักผสม (Stratagene) เป็นอธิบาย (Hong et al., 2006 สวนร้อยเอ็ด al., 2008) สร้างเส้นโค้งมาตรฐานใช้ log10 ผสมอาร์เอ็นเอมาตรฐาน และระดับของแต่ละใบแสดงผลได้ตามปกติกับ GAPDH ใช้โปรแกรม Q-ยีน (มูลเลอร์และ al., 2002) วิเคราะห์แต่ละที่ดำเนินการใน triplicate ปกติระดับอาร์เอ็นเอระหว่างตัวอย่างในการทดลอง วงจรหมายถึงขีดจำกัดค่า (Ct) สำหรับผลิตภัณฑ์ขยายถูกคำนวณ โดยร่วมค่าจากตัวอย่างทั้งหมดในการทดลองที่

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ปริมาณ RT-PCR oligonucleotide ไพรเมอร์สำหรับ cytokines ไก่ chemokines และ GAPDH มีการระบุไว้ในตารางที่ 1 การขยายและการตรวจสอบได้ดำเนินการโดยใช้ในปริมาณที่เทียบเท่าของอาร์เอ็นเอรวมจากลำไส้โดยใช้ระบบ Mx3000P และสดใสสีเขียว SYBR qPCR ผสมต้นแบบ (Stratagene) ตามที่อธิบายไว้ (Hong et al, 2006;.. สวน et al, 2008) เส้นโค้งมาตรฐานถูกสร้างขึ้นโดยใช้ log10 เจือจางอาร์เอ็นเอที่ได้มาตรฐานและระดับของใบรับรองผลการเรียนของแต่ละบุคคลเป็นปกติกับของ GAPDH ใช้โปรแกรม Q-ยีน (มุลเลอร์ et al., 2002) การวิเคราะห์แต่ละคนได้ดำเนินการในเพิ่มขึ้นสามเท่า ที่จะปรับระดับอาร์เอ็นเอระหว่างกลุ่มตัวอย่างที่อยู่ในการทดสอบวงจรเกณฑ์เฉลี่ย (CT) ค่าสำหรับผลิตภัณฑ์ขยายที่คำนวณได้รวมกำไรค่าจากตัวอย่างในการทดลองว่า

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

เชิงปริมาณ ซึ่งไพรเมอร์ชนิดนี้สำหรับไก่ , gapdh คีโมไคนส์ และมีการระบุไว้ในตารางที่ 1 การขยายและการตรวจสอบได้ดำเนินการโดยใช้เงินเทียบเท่าของอาร์เอ็นเอรวมจากลำไส้ ใช้ระบบ mx3000p brilliant และ SYBR สีเขียว qpcr Master Mix ( stratagene ) ตามที่อธิบายไว้ใน et al . , 2006 ; ปาร์ค et al . , 2008 )เส้นโค้งมาตรฐาน ได้แก่ มาตรฐานการสร้าง RNA LN เจือจาง และระดับของยีนแต่ละตัวในรูปที่ gapdh โดยใช้โปรแกรม q-gene ( Muller et al . , 2002 ) ในการวิเคราะห์ทั้งสามใบ ปกติ RNA ระดับระหว่างตัวอย่างในการทดลองหมายถึงเกณฑ์วงจร ( CT ) ค่าสินค้าที่ถูกคำนวณโดยการเพิ่มจำนวนค่าจากกลุ่มตัวอย่างในการทดลองนี้